Медицина/ 1. Акушерство и гинекология
Новикова О.Н., Ушакова
Г.А., Вавин Г.В.
Кафедра акушерства и
гинекологии №1 ГБОУ ВПО «Кемеровская государственная медицинская академия»
Минздравсоцразвития России,
МБУЗ Кемеровской области
ОКБ №1 г. Кемерово, Россия
Медиаторы иммунного ответа у
новорожденных при различных путях инфицирования
Значительное
распространение вирусно-бактериальных инфекций у женщин во время беременности
приводит к росту частоты внутриутробного инфицирования плода, которое
обусловливает развитие перинатальных осложнений [2,3,6]. Реализация
внутриутробной инфекции у новорожденного во многом зависит от его иммунитета
[1,5,7], который определяется состоянием здоровья матери. Носительство
хронических инфекций у матери во время беременности, широкое распространения
нарушений биоценоза влагалища, воспалительные заболевания во время беременности
способствуют длительной внутриутробной антигенной стимуляции иммунной системы
плода и приводят к нарушению формирования адекватного иммунного ответа новорожденного
[4].
Цель
исследования - изучение особенностей состояния новорожденного и уровня
медиаторов иммунного ответа при внутриутробном инфицировании.
Материал
и методы исследования. Для оценки
уровня медиаторов иммунного ответа у новорожденных при внутриутробном
инфицировании проведено ретроспективное исследование случай-контроль, в которое
включено 452 новорожденных от женщин, родоразрешенных в родильном доме №1 МБУЗ
ГКБ №3 им. М.А. Подгорбунского г. Кемерово за период 2009-2011гг. Проведен
анализ особенностей анамнеза, течения беременности и родов у матерей,
клиническое и иммунологическое обследование их новорожденных. Все новорожденные
были разделены на 2 группы. В I группу были
включены 321 новорожденный от матерей с
инфицированным плодным яйцом, причем в Iа группу – 177
новорожденных от матерей с инфекциями TORCH- комплекса, в Ib
группу – 78 новорожденных от матерей с нарушением влагалищного биоценоза во
время беременности, в Iс группу – 66
новорожденных от матерей с пиелонефритом во время беременности, во II
группу – 131новорожденный от матерей с неинфицированным плодным яйцом. Критерии
включения в Iа группу: наличие клинически и лабораторно подтвержденных у
матери во время беременности инфекций TORCH-комплекса, морфологическое
подтверждение диагноза гематогенного воспалительного поражения последа. Критерии
включения в Ib группу: наличие клинически и лабораторно подтвержденных у
матери во время беременности нарушения влагалищного биоценоза, морфологическое
подтверждение диагноза восходящего инфекционного поражения последа. Критерии
включения в Iс группу: наличие клинически и лабораторно подтвержденных у
матери во время беременности инфекционного процесса в почках, морфологическое
подтверждение диагноза воспалительного поражения последа. Критерии включения во
II группу: отсутствие клинических и лабораторных проявлений у
матери и новорожденного инфекций TORCH-комплекса, нарушения
влагалищного биоценоза во время беременности, отсутствие
инфекционно-воспалительных заболеваний какой-либо локализации во время беременности,
отсутствие воспалительных изменений в последе при морфологическом исследовании.
Критерии исключения из исследования: наличие у матери тяжелой соматической
патологии, преэклампсия во время настоящей беременности, изосерологическая несовместимость
крови матери и плода по группе или резус-фактору, курение, отсутствие
информированного согласия матери на участие в исследовании.
После
рождения плода в сыворотке пуповинной крови
изучался уровень интерлейкина-1 (ИЛ-1), интерлейкина-6 (ИЛ-6),
интерлейкина-8 (ИЛ-8), интерлейкина-10 (ИЛ-10), α-частицы фактора некроза
опухоли (ФНО-α). Забор крови из пуповины проводился путем свободного поступления
крови в пробирку до момента отделения плаценты. Исследование концентраций
цитокинов (пкг/мл) проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа
в системе бидетерминантного определения антигена (ELISA) с применением
пероксидазы в качестве индикаторного фермента в культурах клеток крови
новрожденных. Исследование проведено на базе клинико-биохимической лаборатории
ОКБ №1 г. Кемерово (зав. лабораторией – к.м.н. Вавин Г.В.).
Статистический
анализ данных проводился с использованием пакета прикладных программ StatSoft
Statistica 6.1. (лицензия № ВХХR006BO92218FAN11). Для представления данных
использовали как абсолютные, так и относительные показатели (доли, %), методы
описательной статистики: среднее (М), стандартное отклонение (σ).
Достоверность различий показателей сравниваемых групп оценивалась с помощью
параметрического критерия Стьюдента (t-тест). Статистически значимыми считали
различия при p≤0,05.
Результаты
и их обсуждение. Средний срок беременности в группах на момент исследования не
имел различий и составил в Ia группе 39,33±0,15 недель
(рIa-II <0,001), в Ib
– 38,81±0,25
недель (рIb-II <0,001), в Ic –
39,0±0,3 недели (рIc-II <0,001),
во II группе – 39,53±0,17
недель.
Уровень медиаторов иммунного ответа у
новорожденных представлен в таблице.
Таблица
Уровень иммуноцитокинов у новорожденных
при рождении в зависимости от пути инфицирования
|
Группы, n |
Показатели цитокинов,
пкг/мл M±σ |
||||
|
ИЛ-1β |
ИЛ-6 |
ИЛ-8 |
ИЛ-10 |
ФНО-α |
|
|
Iа, n=40 |
2130,24±270,72 p<0,001 |
73,57±30,57 p=0,001 |
49,84±23,36 р<0,001 |
11,95±4,46 р<0,001 |
3,89±0,54 0,479 |
|
Ib, n=40 |
1373,56±260,29 р=0,865 |
12,69±1,69 р=0,000 |
5,09±1,48 р=0,000 |
3,31±2,04 р=0,000 |
2,21±0,12 р=0,000 |
|
Ic, n=40 |
1558,25±195,41 р=0,0008 |
9,2±1,17 р=0,000 |
2,96±0,31 р=0,000 |
2,93±1,02 р=0,000 |
3,0±0,49 р=0,211 |
|
II, n=40 |
1362,92±294,57 |
47,9±35,16 |
20,51±9,77 |
1,32±0,72 |
3,13±0,43 |
Примечание: р –
достоверность различий между группой инфицированных и группой неинфицированных
новорожденных
Интерлейкин
-1β входит в группу провоспалительных цитокинов и играет центральную роль
в остром и хроническом воспалении, как локально, так и системно. У
новорожденных от матерей с гематогенным инфицированием плодного яйца, а также
при лимфогенном распространении инфекционного агента уровень провоспалительного
цитокина ИЛ-1β был выше, чем у новорожденных группы сравнения (соответственно
2130,24±270,72 и 1362,92±294,57, р<0,001 и 1558,25±195,41, р=0,0008), у
новорожденных от матерей с восходящим инфицированием уровень этого медиатора
достоверно не отличался от уровня у неинфицированных новорожденных
(1373,56±260,29 и 1362,92±294,57, р=0,865).
Одной
из основных функций ИЛ-6 является регуляция процессов созревания
антителопродуцирующих клеток из В-лимфоцитов и продукции иммуноглобулинов.
Повышение продукции ИЛ-6 часто связано с повреждением тканей и развитием
стресса, например, при ишемии. ИЛ-6 может стимулировать гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковую
систему, активность которой играет важную роль в механизмах антистрессовой
защиты. У новорожденных от матерей с гематогенным инфицированием плодного яйца
уровень ИЛ-6 превышал значения у новорожденных неинфицированных матерей
(73,57±30,57 и 47,9±35,16, р=0,001). В группах новорожденных с восходящим
инфицированием и пиелонефритом у матери уровень этого медиатора был достоверно
ниже (12,69±1,69 и 9,2±1,17 соответственно), что могло свидетельствовать о
снижении адаптационных возможностей иммунной системы.
ИЛ-8
– самый ранний провоспалительный цитокин, повышенный уровень которого наблюдается
при тяжелых бактериальных поражениях, причем коррелирует с тяжестью
порвреждения. У новорожденных в группе пациенток с гематогенным инфицированием
плодного яйца уровень ИЛ-8 более, чем в 2 раза превышал уровень у неинфицированных
новорожденных (49,84±23,36 и 20,51±9,77, р<0,001). В группах новорожденных с
восходящим инфицированием и пиелонефритом у матери уровень этого медиатора
также был достоверно ниже, чем у неинфицированных новорожденных (5,09±1,48 и
2,96±0,31 соответственно).
Главная
роль ИЛ-10 – это ингибирование избыточного синтеза провоспалительных цитокинов
(ИЛ-1α, ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-α и др.) активированными
макрофагами и Th1-клетками. Повышенный уровень ИЛ-10 ассоциирован с сепсисом,
бактериальным менингитом, причем его высокие концентрации связывают с неблагоприятным
прогнозом. У новорожденных в группе пациенток с гематогенным инфицированием
плодного яйца уровень ИЛ-10 в 9 раз превышал уровень у неинфицированных новорожденных
(11,95±4,46 и 1,32±0,72, р<0,001), в группах новорожденных с восходящим
инфицированием и пиелонефритом у матери также отмечалось кратное увеличение
уровня этого медиатора (3,31±2,04 и 2,93±1,02 соответственно).
ФНО-α
участвует в защитных реакциях и в процессах деструкции и репарации,
сопутствующих воспалению, служит одним из медиаторов деструкции тканей, обычной
при длительном, хроническом воспалении. У новорожденных в группе пациенток с гематогенным
инфицированием плодного яйца и при пиелонефрите у матери уровень ФНО-α не
имел достоверных отличий от уровня у неинфицированных новорожденных (3,89±0,54
и 3,13±0,43, р=0,479 и 3,0±0,49 и 3,13±0,43, р=0,211), а при восходящем
инфицировании – был достоверно ниже, чем у неинфицированных новорожденных
(2,21±0,12 и 3,13±0,43, р=0,000).
Выводы. Таким образом, уровень
провоспалительных и противовоспалительных медиаторов воспаления у новорожденных
от матерей с гематогенным инфицированием плодного яйца достоверно превышает
аналогичные показатели неинфицированных новорожденных. Причем повышение
цитокинов, относящихся к разным фазам динамики патологического процесса (I
фаза – ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8; III фаза – ИЛ-10) позволяет
судить о длительности антигенной стимуляции организма плода еще в утробе матери
и говорит не только о внутриутробном инфицировании, но и о течении внутриутробной
инфекции. При восходящем инфицировании плодного яйца отмечается более низкий
уровень медиаторов первой фазы иммунного ответа и повышение медиаторов II
и III
фазы, что свидетельствует о длительности процесса и может говорить о
перенесенном инфекционном процессе еще внутриутробно и, возможно, о некотором
угнетении иммунной системы плода. При пиелонефрите у матери во время
беременности у новорожденных отмечается повышение только медиаторов III
фазы иммунного ответа, что может говорить о перенесенном внутриутробно
воспалительном процессе и, возможно, формировании очага хронической инфекции у
новорожденного ребенка.
Литература:
1. Володин, Н.Н. Иммунология перинатального периода / Н.Н. Володин, М.В. Дегтярева // Педиатрия. – 2001.- №4.- С. 4-8.Гриноу, А. Врожденные, перинатальные и неонатальные инфекции / А. Гриноу, Дж. Осборн, Ш. Сазерленд.- М.: Медицина, 2000. – 287с.
2. Перинатальные инфекции: Практическое пособие / под ред. А.Я. Сенчука, З.М. Дубоссарской. – М.: МИА, 2005. – 318с.
3. Сухих, В.Т. Иммунитет и генитальный герпес / В.Т. Сухих, Л.В. Ванько, В.И. Кулаков.- Н.Новгород: НГМА, 1997. – 224с.
4. Таболин, В.А. Актуальные вопросы перинатальной иммунологии / В.А. Таболин, Н.Н. Володин, М.В. Дегтярева и др. // Int. J. on Immunorehabilitation. – 1997. - №6. – Р.112-122.Фризе, К.
5. Инфекционные заболевания беременных и новорожденных: пер. с нем. / К. Фризе, В. Кахель. – М.: Медицина, 2003. – 424с.
6.
Raes, M. Lymphocyte subpopulations
in healthy newborn infants: comparison of cord blood values with five days after
birth / M. Raes, P. Alliet, P. Gillis et al. // J. Pediatr. -1993. -123(3). –
P. 465-467.