Медицина/7. Клиническая медицина

Козлова Н.М., Меринова Н.И., Колесниченко Л.С., Ясько М.В., Суслова А.И., Егорова И.Э., Бахтаирова В.И., Булавинцева О.А.

Иркутский государственный медицинский университет, кафедра факультетской терапии, кафедра химии и биохимии, Россия.

Перекисное окисление липидов и система глутатиона при обострении хронического панкреатита в зависимости от функции поджелудочной железы.

Несмотря на достижения диагностики и фармакотерапии, проблема хронического панкреатита (ХП) на сегодняшний день является одной из самых сложных и актуальных в гастроэнтерологии. Между тем, патогенез хронического панкреатита во многом остается неясным, недостаточно эффективны применяемые методы лечения. В последнее время большую роль в патогенезе отводят оксидативному стрессу. Многочисленными исследованиями продемонстрировано, что у больных ХП повышен уровень продуктов перекисного окисления липидов в крови [2,3,5] и в ткани поджелудочной железы [4]. Состояние антирадикальной защиты изучено недостаточно, имеющиеся данные противоречивы. Известно, что система глутатиона представляет одну их самых мощных антиоксидантных систем клетки, взаимодействующих со свободными радикалами [1]. Восстановленный глутатион (GSН) выполняет антиоксидантную функцию внутриклеточно во многих клетках организма, в том числе в клетках поджелудочной железы и в эритроцитах.

При хроническом панкреатите комплексного исследования системы глутатиона, которая представлена восстановленным глутатионом (GSH) и ферментами его метаболизма: глутатионтрансферазой (ГТ) и глутатионредуктазой (ГР) [1], раздельно в плазме и в эритроцитах (ЭР) крови ранее не проводилось.

Целью нашей работы было комплексное определение сдвигов в системе глутатиона раздельно в ЭР и в плазме крови у больных с обострением хронического панкреатита в зависимости от функции поджелудочной железы (ПЖ).

Материалы и методы исследования

Было обследовано 60 больных с хроническим панкреатитом в фазе обострения с болевым синдромом. В общую группу (n=60) включены все пациенты с обострением ХП с болевой формой вне зависимости от нарушения функции. В зависимости от нарушения функции было выделено 3 группы: с нарушением внешнесекреторной функции (n=16), с нарушением внутрисекреторной функции (развитием сахарного диабета) (n=15), с сохраненной функцией ПЖ (n=29). Группу клинического сравнения (ГКС) составили 23 практически здоровых человека, не имевших поражения поджелудочной железы, без признаков обострения хронических заболеваний, с близким распределением по полу и возрасту. Диагноз хронического панкреатита устанавливали в соответствии с рекомендациями, изложенными в «Стандартах (протоколах) диагностики и лечения болезней органов пищеварения».

В лизатах эритроцитов и плазме крови определяли восстановленный глутатион (GSH) и активность ферментов глутатионтрансферазы (ГТ) и глутатионредуктазы (ГР) стандартными спектрофотометрическими методами. Определение МДА в плазме исследовали по методу Stocks J.et. al. (1974).

Статистическую обработку проводили, используя программу Statistica 6 for Windows. Достоверность различий определяли по критерию u-Манна-Уитни. Показатели считали значимыми при p<0.05. Для оценки интенсивности болевого синдрома использовалась десятибалльная аналоговая шкала, предложенная Bonica J.J., 1990 г.

Результаты и обсуждение

Болевой синдром являлся ведущим клиническим симптомом обострения ХП. У всех исследуемых больных обострение ХП характеризовалось усилением болевого синдрома в верхней половине живота и в левом подреберье различной интенсивности. Интенсивность болевого синдрома по 10 бальной аналоговой шкале составила 5 (2-10) баллов.

В плазме крови при обострении ХП вне зависимости от функции ПЖ установлено повышение уровня МДА на 192% (р<0,001). Определена прямая корреляционная зависимость между уровнем МДА и интенсивностью боли (r = 2,6, р<0,02). При обострении ХП с нарушением внутрисекреторной функцией (развитие сахарного диабета) в сравнении с контрольной группой – уровень МДА повышен на 275% (р<0,001), с сохранением функции ПЖ – на 225% (р<0,001), у больных с нарушением внешнесекреторной функции – на 108% (р<0,02). Проведен сравнительный анализ между группами больных ХП с нарушением внутрисекреторной, внешнесекреторной и сохраненной функциями ПЖ. Интенсивность перекисного окисления липидов была ниже у пациентов со стеатореей, что возможно, связано с преобладанием процессов фиброзирования над процессами воспаления. В группе ХП с развитием сахарного диабета более выражен оксидативный стресс, сопровождающийся накоплением свободных радикалов и повышением уровня МДА.

В ответ на активацию процессов перекисного окисления при обострении ХП реагирует система глутатиона, одна из ведущих антиоксидантных ферментных систем глутатиона [1].

При исследовании GSH в ЭР крови больных с обострением ХП вне зависимости от функции ПЖ выявлено снижение концентрации GSH на 23% (р<0,001); при внешнесекреторной недостаточности отмечено снижение на 30% (р<0,004); при внутрисекреторной недостаточности – на 35% (р<0,005), с сохраненной функцией ПЖ – на 20% (р<0,001). Дефицит этого SH-содержащего трипептида в эритроцитах может свидетельствовать о напряжении антиоксидантной защиты, выступая в качестве наиболее раннего показателя усиления окислительных процессов в клетках и может способствовать прогрессированию заболевания.

При обострении ХП с сохранением функции и с нарушением внутрисекреторной функции отмечается повышение GSН в плазме на 141% (р<0,001) и 100% (р<0,006) соответственно, вследствие выхода из клетки, обусловленного повреждением клеток ПЖ или повышением проницаемости сосудов. При развитии внешнесекреторной недостаточности концентрация GSH в плазме не отличалась от показателей контрольной группы (p<0,5), что, возможно, связано с фиброзом ПЖ.

Одновременно наблюдались изменения активности глутатионзависимых ферментов. В плазме выявлено повышение активности ГТ при обострении ХП с сохраненной функцией на 21% (р<0,04), с нарушенной внутрисекреторной функцией – 48% (р<0,03). При нарушении внешнесекреторной функции активность ГТ в плазме не изменялась (р<0,9), что, вероятно, обусловлено преобладанием процессов фиброзирования над воспалением. Активность ГТ в ЭР была стабильна (р<0,6). Отсутствие повышения активности ГТ в ЭР при одновременном снижении концентрации GSH в ЭР, возможно, связано с большим расходом ГТ, вызванным инактивацией активных форм кислорода.

Выявлено снижение активности ГР в ЭР на 52% (р<0,004) при обострении ХП с нарушением внутрисекреторной недостаточности, проявляющейся развитием сахарного диабета, что, вероятно, связано со снижением уровня восстановленного никотинамидадениндинуклеотидфосфата (НАДФН) вследствие нарушения работы пентозофосфатного пути. При сохранении функции и нарушении внешнесекреторной функции ПЖ активность ГР в ЭР не изменялась по сравнению с контрольной группой.

Выводы:

1. В плазме крови у больных ХП выявлено повышение концентрации GSH, активности ГТ, что, вероятно, обусловлено нарушением проницаемости сосудов или повреждением клеток ткани ПЖ.

2. При ХП с внешнесекреторной недостаточностью концентрация GSH в плазме стабильна, что, возможно, связано с фиброзом ПЖ.

3. При обострении ХП независимо от функции ПЖ установлено повышение уровня МДА и снижение GSH в ЭР, что свидетельствует об активации процессов ПОЛ и снижении антирадикальной защиты.

4. Выявлено снижение активности ГР в ЭР при обострении ХП с внутрисекреторной недостаточностью, что усугубляет недостаточность антиоксидантной защиты.

Литература:

1. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Система глутатиона // Биомедицинская химия. – 2009. – Т55, вып 3. – С.255-277.

2. Braganza J.M. Antioxidant therapy for pancreatitis: clinical experience // Manchester: University Press. – 1991. – P. 178-97.

3. Podborska M, Sevcikova A, Trna J, Dite P, Lojek A, Kubala L. Increased markers of oxidative stress in plasma of patients with chronic pancreatitis // Neuro Endocrinol Lett – 2009, №30. – P. 116-20.

4. Schoenberg M.N., Buchier M., Pietrzyk C. et al. Lipid peroxidation and glutathione metabolism in chronic pancreatitis // Pancreas. – 1995, N.10. – P.36-43.

5. Varlaan M., Roelofs M.J. Assessment oxidative stress in chronic pancreatitis patients // World J. Gastroenterol. – 2006. – Vol. 12, №25. – P. 5705–5710.