Медицина 8. Морфология

к.м.н. Горчакова О.В., д.м.н., проф. Горчаков В.Н.

Новосибирский государственный университет, НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, Новосибирск, Россия

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИМФАТИЧЕСКОГО УЗЛА В РАЗНЫЕ ВОЗРАСТНЫЕ ПЕРИОДЫ И В УСЛОВИЯХ ПРИЕМА ФИТОСБОРА

Старение – сложный процесс, являющийся естественным этапом онтогенетического развития, и проявляется в неравномерности изменений органов и систем организма за счет развития инволютивных и компенсаторно-приспособительных процессов (Альтман Д.Ш. и др., 2003). Одними из первых изменяются иммунная и лимфатическая системы (Ярилин А.А. и др., 1997; Сененко А.Ш., 2002, 2003; Топорова С.Г., 2003, 2007). При этом не разграничены до конца собственно возрастные и патологические сдвиги в лимфатической системе (Топорова С.Г., 2003), степень развития которых определяет надежность лимфоидной ткани при длительном функционировании их в процессе жизни. В этой связи исследования структурной организации лимфатической системы, лежащей в основе адаптации организма, является одной из актуальной задач современной геронтологии и морфологии.

Постоянно ведется поиск новых эффективных средств геропротекторов, влияющих на темпы старения. Наибольший интерес вызывает фитотерапия, которая широко применяются в медицине из-за позитивного действия на организм (Корсун В.Ф. и др., 1995; Кортиков В.Н. и др., 1998). Но за пределами изучения остается лимфатическая составляющая механизмов действия фитотерапии в зависимости от возраста. Результат имеет практическое значение для оптимизации эндоэкологической реабилитации в пожилом и старческом возрасте.

Цель исследования – выявить особенности структурно-функциональной организации соматического лимфатического узла геронтов в формировании ответной реакции на фитотерапию.

Материал и методы исследования. Опыты проведены на 160 беспородных белых крысах-самцах разного возраста (4-6 месяцев и 12-15 месяцев). Животные получали при свободном доступе к воде стандартную диету (экструдированный комбикорм ПК-120-1). Эксперимент проведен в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и в соответствии с приказом МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.

В эксперименте использован биоактивный фитосбор (БАФ), включающий бадан, родиолу розовую, копеечник сибирский, лист черники, брусники, смородины, шиповник майский, чабрец, пищевые волокна. Выбор конкретных лекарственных растений основан на принципах фитотерапии (Корсун В.Ф. и др., 1995; Кортиков В.Н. и др., 1998). Фитосбор применяли в суточной дозе 0,1-0,2 г/кг в течение одного месяца у животных разного возраста.

Исследовали регионарные паховые лимфатические узлы, которые являются «сторожевыми» для территории задней конечности и генитальной области. Изучение осуществляли в соответствии с требованиями к гистологическому исследованию лимфатических узлов (Cottier H. et al., 1973; Белянин В.Л. и др., 1999). Забранные кусочки лимфатического узла фиксировали в 10% нейтральном формалине. Далее следовала классическая схема проводки и заливки материала в парафин с последующим приготовлением гистологических срезов. Гистологические срезы лимфатических узлов окрашивали гематоксилин-эозином и азур-эозином. Морфометрический анализ структурных компонентов лимфатического узла осуществляли с помощью морфометрической сетки случайного шага (Автандилов Г.Г., 1990), которая накладывалась на срез лимфатического узла. Подсчитывалось количество узлов или пересечений сетки, приходящихся на весь срез в целом и раздельно на каждый из структурных компонентов с перерасчетом в проценты. Статистическая обработка полученных данных осуществлялась при помощи компьютерных программ Image-Pro Plus 4.1, Excel (Васильева Л.А., 2004).

Сравнительная характеристика лимфатического узла геронтов

Лимфатические узлы паховой области имеют некоторые особенности строения. В паховых, как впрочем, во многих других подкожных, периферических лимфатических узлах, более выражены, по сравнению с висцеральными, соединительнотканные элементы капсулы и трабекул. Строение лимфатических узлов с возрастом меняется (табл. 1). В большей степени это касается тех лимфатических узлов или сегментов их, которые не были подвержены инволюции и сохранили структурно-функциональные зоны, входящие в состав лимфоидной дольки. Именно сохранность лимфоидной дольки определяет функции лимфатического узла, значимые в определенном возрасте и необходимые для выполнения дренажно-детоксикационной функции.

Для геронтов характерна неоднородность структуры лимфатического узла из-за процессов фиброзирования, выражающиеся утолщением капсулы, развитием соединительной ткани вокруг сосудов. Наряду с этим отмечена локализация субкапсулярного склероза параллельно краевому синусу в периферической коре, что затрудняет пассаж лимфы в компартменте лимфатического узла. На этом фоне имеет место общая компактизация лимфатического узла. Корково-мозговое соотношение мало меняется и составляет в среднем 1,91±0,25 (у молодых животных 1,98±0,23). В структуре лимфатического узла преобладают структуры коркового вещества. При этом увеличивается в 1,6 раза площадь, занимаемая корковым плато. Увеличение площади коркового плато связано с уменьшением площади лимфоидных узелков, особенно содержащих герминативные центры. Соотношение лимфоидных узелков с герминативным центром и без него (фолликулярный индекс) составляет у геронтов 1,1, когда у молодых животных он равен 1,39. Это указывает на снижение пролиферативных процессов в лимфатическом узле с возрастом. Наоборот, в молодом возрасте наблюдается интенсивное образование центров размножения в лимфоидных узелках. Площадь лимфоидных узелков с герминативным центром превосходит в 1,4 раза площадь лимфоидных узелков без герминативного центра у молодых животных.

У геронтов формируется недостаточность клеточного звена иммунитета, судя по величине, занимаемой площади Т-зонами в лимфатическом узле. Паракортекс может сохранять компактное расположение лимфоидных клеток по периферии или в виде отдельных полос на фоне разряжения структуры (Рис. 1). У геронтов наблюдаемое изменение площади структурно-функциональных зон лимфатического узла, ответственных как за клеточный, так и за гуморальный иммунитет, что может быть расценено, как отражение антагонизма гуморального и клеточных звеньев иммунитета.

Рис. 1. Разрежение паракортекса с сохранением компактного расположения лимфоидной ткани по периферии. В периферической коре лимфоидные узелки без герминативного центра. Геронты. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ок.7, об. 4.

Мозговые синусы лимфатических узлов геронтов выглядели широкими образованиями, пронизывающими всю ткань узла. Отмечено увеличение в 2,3 раза размера мозгового синуса лимфатического узла. Просвет синусов выполнен клеточными элементами. Эти изменения можно трактовать как компенсаторные и связанные с развитием диспропорции притока в лимфатический узел и оттоком лимфы из него. Расширенные синусы являются структурной предпосылкой для замедления тока лимфы и накопления лимфоцитов в структурах лимфатического узла.

Можно констатировать, что морфологическая картина пахового лимфатического узла у геронтов отражает сохранность реактивности лимфоидной ткани на фоне склерозирования, компактизации и разряжения структуры паракортикальной зоны в условиях снижения процессов лимфопоэза в герминативных центрах. Лимфатический узел с возрастом испытывает состояния функциональной напряженности при наличии морфологических эквивалентов компенсации.

Структурная характеристика лимфатического узла

в разные возрастные периоды при приеме фитосбора

Прием фитосбора вызывает разный по степени выраженности структурный ответ со стороны лимфатического узла у молодых и старых животных. Прием фитосбора молодыми животными не оказывает существенного влияния на размерность структурно-функциональных зон лимфатического узла (табл. 1). Отмечено только статистически значимое увеличение в 1,33 раза площади лимфоидных узелков без герминативного центра с тенденцией к увеличению площади лимфоидных узелков с герминативным центром. При этом не происходит изменения их соотношения, что указывает на сохранение лимфопролиферативного потенциала. Прослеживается тенденция к увеличению субкапсулярного синуса, как свидетельство повышения притока лимфы в физиологических пределах.

У геронтов прием фитосбора влияет на размерность нескольких структурно-функциональных зон лимфатического узла. Наблюдается уменьшение в 1,76 раза площади коркового плато при увеличении в 1,21 раза площади паракортекса. Изменение площади коркового плато и паракортекса можно связать миграцией лимфоидных клеток внутри лимфатического узла и указывает на активацию клеточного звена иммунитета. В условиях приема фитосбора наблюдается тенденция к увеличению размера лимфоидных узелков с герминативным центром. Наблюдается формирование лимфоидных узелков на границе коркового и мозгового веществ в лимфатическом узле. Уменьшается в 1,3 раза размер синусной системы в условиях приема фитосбора у геронтов. Компактный морфотип лимфатического узла сохраняется, так как корково-мозговое соотношение мало изменилось после фитотерапии, как и не исчезли элементы фиброзирования в лимфоидной паренхиме вокруг синусов.

Таблица 1.

Площади структурно-функциональной зоны и индексы лимфатического узла в разные возрастные периоды

в условиях приема биоактивного фитосбора (БАФ) и без него, %

Структура и индексы лимфатического узла	Молодые	Молодые + БАФ	Старые	Старые + БАФ
	1	2	3	4
Капсула	1,16±0,09	1,13±0,08	1,62±0,07°	1,60±0,13°
Субкаспулярный синус	0,57±0,07	0,70±0,06	0,41±0,04	0,45±0,06°
Корковое плато	1,20±0,09	1,39±0,16	1,90±0,08°	1,08±0,09*
Лимфоидный узелок без герминативного центра	1,16±0,06	1,54±0,11*	1,24±0,08	1,22±0,11
Лимфоидный узелок с герминативным центром	1,61±0,17	2,08±0,21	1,37±0,12	1,62±0,13
Паракортекс	7,14±0,67	6,78±0,39	8,94±0,49	10,78±0,36*°
Мозговые тяжи	5,20±0,32	5,33±0,31	5,08±0,34	6,0±0,21
Мозговой синус	1,30±0,12	1,09±0,08	2,94±0,20°	2,26±0,12*°
Общая площадь	19,35±1,03	21,04±1,12	23,44±1,35	25,0±0,91
Примечание: *P1-2, 3-4 < 0,05, ° P1-3, 2-4 < 0,05

Сравнение структуры лимфатических узлов старых и молодых животных в условиях приема фитосбора показало некоторые отличия, которые характеризуются в увеличении площадей капсулы на 41,59%, паракортекса на 59,0%, мозгового синуса в 2,07 раза в лимфатическом узле геронтов (табл. 1). Характер изменения основных структурно-функциональных зон сопровождается увеличением на 18,82% общей площади лимфатического узла геронтов.

Таким образом, при приеме фитосбора в большей степени структурные преобразования отмечаются со стороны структурно-функциональных зон лимфатического узла геронтов, чем у молодых животных. У геронтов усиливается клеточное звено иммуногенеза, судя по увеличению размера паракортекса при сохранности соотношения лимфоидных узелков с герминативным центром и без него.

Заключение

При исследовании структуры пахового лимфатического узла у геронтов имеют общие признаки, отражающие общий процесс старения, особенно это касается соединительнотканного компонента. Своеобразием является мозаичность структуры лимфатического узла, зависящего от локализации склероза на фоне сниженного лимфопоэза. Развитие субкапсулярного склероза отражается на дренажной функции лимфатического узла и его структуре. Функция лимфатического узла сохраняется и отражает состояние напряжения и компенсации на уровне отдельных его компартментов (лимфоидной дольки).

Фитокорекция вызывает разный по интенсивности структурный ответ лимфатического узла у молодых и старых животных. Обращает внимание, что структурно-функциональные зоны лимфатического узла изменяют свою площадь в большей степени у геронтов, нежели у молодых животных. Предполагается модулирующее действие фитокоррекции. У геронтов происходит усиление иммунного потенциала и дренажной функции лимфатического узла, судя по характеру изменений структурно-функциональных зон лимфатического узла.

Литература

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов. – М., 1990. – 384 с.

2. Альтман Д.Ш. Темпы старения и показатели иммунного статуса у участников современных войн / Д.Ш. Альтман, С.Н. Теплова, Н.Г. Кочеткова, М.Е. Солодянкина [и др.] // Альманах «Геронтология и гериатрия», 2003. – Вып. 2. – С.195-196.

3. Белянин В.Л. Диагностика реактивных гиперплазий лимфатических узлов / В.Л. Белянин, Д.Э. Цыплаков. – Санкт-Петербург-Казань, 1999. – 328с.

4. Васильева Л.А. Статистические методы в биологии. Учебное пособие к курсу лекций «Биометрия». – Новосибирск: Институт цитологии и генетики СО РАН, 2004. – 127 с.

5. Корсун В.Ф. Фитотерапия экземы / В.Ф. Корсун, А.А. Кубанова, С.Я. Соколов. – Минск: «Навука i Тэхнiка», 1995. – 276с.

6. Кортиков В.Н., Кортиков А.В. Лекарственные растения / В.Н. Кортиков, А.В. Кортиков. – М.: Рольф, Айрис-пресс, 1998. – 768 с.

7. Сененко А.Ш. Возрастные изменения скорости лимфатического дренажа / А.Ш. Сененко // Альманах «Геронтология и гериатрия». – М., 2003. – Вып. 2. – С.95

8. Топорова С.Г. Особенности системы околоклеточного гуморального транспорта при старении: обзор литературы / С.Г. Топорова // Альманах «Геронтология и гериатрия». – М., 2003. – Вып. 2. – С.90-94.

9. Топорова С.Г. Эндоэкологическая концепция противодействия преждевременному старению / С.Г. Топорова, Л.П. Свиридкина, С.А. Попова, О.И. Лопырева // Материалы III Международного конгресса «Эндоэкологическая медицина» и Первой международной школы «Эндоэкологической медицины». Республика Кипр, 21-28 октября 2007 г. – М.: ОАО «Щербинская типография», 2007. – С.23-24.

10. Ярилин А.А. Введение в современную иммунологию / А.А. Ярилин, Н.А. Добротина. – Нижний Новгород: Изд-во Нижегородского ун-та, 1997. – 128 с.

11. Cottier H. Предложения по стандартизации описания гистологии лимфатического узла человека в связи с иммунологической функцией / H. Cottier, J. Turk, L. Sobin // Бюлл. ВОЗ. – 1973. – С.372-377.