Биологические науки/9.Биохимия и биофизика

¹Д.б.н. Руднева И.И., к.б.н. ¹Скуратовская Е.Н., ¹Шайда В.Г., ²Невар Л.А.

³Кондрашихина К.И.

¹Институт биологии южных морей НАН Украины

²Севастопольский национальный технический университет

3Клиническая лаборатория станции переливания крови г.Севастополя

Сравнительный анализ некоторых биохимических показателей сыворотки людей с разной группой крови

В настоящее время для оценки состояния организма и диагностики различных заболеваний существует множество различных биохимических и биофизически методов анализа крови. С помощью них были показаны изменения различных показателей сыворотки крови людей в зависимости от пола [ 7 ], возраста [ 8, 10, 11, 12 ], патологических и стрессовых состояний [9, 11]. При этом исследователи не всегда учитывают принадлежность образцов к той или иной группе крови и информация в этом плане ограничена [5]. Известно, что группа крови – показатель, характеризующий наличие в крови определенных антител и антигенов. Антитело – это гликопротеин, содержащийся в биологических жидкостях и на поверхности В-лимфоцитов. Антиген вызывает образование антител. Антиген и антитело взаимодействуют другом, что лежит в основе иммунного ответа. В случае с группой крови антигены локализованы на поверхности эритроцитов, а антитела растворены в плазме крови. Информативными биомаркерами негативных изменений в организме, в том числе происходящих в результате стресса, является соотношение белков сыворотки крови, а также показатели их прооксидантно-антиоксидантного баланса [3, 4, ].

В результате стресса в сыворотке крови людей и животных происходит изменения содержания различных компонентов, а также увеличение концентрации окисленных модифицированных форм белков, свободных радикалов и сокращение уровня антиоксидантов [1, 2]. Использование хемилюминесценции, свойственной биологическим жидкостям человека, позволяет решать многие диагностические проблемы, а также определять физиологическое состояние человека (усталость, стресс, комфортность условий жизни и влияние различных факторов химической и физической природы).

Целью настоящего исследования явился сравнительный анализ особенностей соотношения белковых фракций, окисленных форм белков и параметров хемилюминесценции сыворотки крови здоровых людей с различной группой крови.

Материалы и методы исследования

Материалом исследования служила сыворотка крови доноров с различной группой крови ( 96 образцов), полученная на станции переливания крови города Севастополя. Проводили сравнительный анализ показателей содержания белка, белковых фракций, окисленных модифицированных форм белков (ОМБ) и хемилюминесценции. Определение концентрации белка, альбумина и белковых фракций в сыворотке крови доноров осуществляли с помощью стандартных наборов реагентов «Фелисит» (Украина). Уровень окислительной модификации белков определяли спектрофотометрически [3, 4], показатели хемилюминесценции (ХЛ) анализировали на Люминометре 2010 ( LKB, Швеция) путем индуцирования ХЛ перекисью водорода и раствором сульфата железа [1]. Всего изучено 96 образцов сыворотки крови. Результаты обработаны статистически [6].

Результаты и их обсуждение

Содержание белка в сыворотке крови доноров заключено в пределах 68-72 г/л и не имеет достоверных различий у людей с разной группой крови. Почти половина от уровня общего белка приходится на альбумин, содержание которого различается у доноров исследуемых групп (Рис. 1).

Рис. 1. Соотношение белковых фракций в сыворотке крови доноров с различной группой крови ( I-IV – группы крови).

Соотношение белковых фракций варьирует у доноров с различной группой крови: концентрация альбумина выше в сыворотке людей с I и II группой, по сравнению с донорами, имеющими III и IV группы ( рис. 1). Следует отметить также, что в сыворотке крови доноров с IV группой крови снижено содержание β-глобулинов.

Соотношение различных форм модифицированных белков в сыворотке крови доноров представлено на рис. 2. Как можно видеть, уровень продуктов окислительной модификации в сыворотке доноров с III и IV группами крови превышает таковые показатели в сыворотке крови доноров, имеющих I и II группы, за исключением продуктов, определяемых при длине волны 530 нм, где разница достоверна только по отношению к показателям людей с группой крови IV.

Рис. 2. Содержание продуктов окислительной модификации белков в сыворотке крови доноров (М+ m). I, II, III, IV – группы крови, 346 нм – альдегидные продукты нейтрального характера, 370 нм – кетонные продукты нейтрального характера, 430 нм – альдегидные продукты основного характера, 530 нм – кетонные продукты основного характера

Минимальное значения показателей флуоресценции сыворотки было обнаружено у доноров с группой крови IV, максимальное с группой крови I ( Рис. 3).

Рисунок 3. Показатели ХЛ сыворотки крови доноров с различной группой крови.

Как можно видеть, достоверных различий между показателями ХЛ доноров с различной группой крови не выявлено. Вместе с тем, в сыворотке крови людей имеющих группу крови I и III исследуемые параметры были несколько выше по сравнению с соответствующими показателями сыворотки крови доноров с группой крови II и IV.

Таким образом, результаты исследований показали наличие определенных различий между показателями сыворотки крови доноров с I и II группой крови и III и IV. Так, содержание альбумина было существенно ниже в сыворотке крови доноров первых двух групп, тогда как концентрация окисленных белков превалировала в сыворотке крови людей, имеющих III и IV группу крови. Показатели ХЛ сыворотки крови также различались и проявляли тенденцию к снижению у доноров с II и IV группой крови. Следует отметить, что другие авторы также отмечают существенные различия в содержании гликозаминогликанов и гидроксипролина в сыворотке крови людей с разной группой крови и имеющих разный резус-фактор [5]. Полученные результаты могут быть использованы для оценки физиологического состояния человека и его патологий.

Литература

1. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. - 252 с.

2. Владимиров Ю.А. Активированная хемилюминесценция и биолюминесценция как инструмент в медико-биологических исследованиях. Соросовский образовательный журнал. – 2001. – Т. 7. - С. 16-20.

3. Дубинина Е.Е., Шугалей И.В.Окислительная модификация белков. Усп. совр. биологии – 1993. – Т. 113, вып. 1. – С. 71 – 81.

4. Дубинина Е.Е., Бурмистров Д. А., Ходов И.Г., Поротов С.О.

Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод ее определения. Вопр. мед. химии. - 1995. Т. 41, № 1. - С. 24 - 26.

5. Ким Л.Б., Путятина А.Н., Никонова И.К. Содержание гликозаминогликанов и гидроксипролина в сыворотке крови у практически здоровых людей в зависимости от пола, возраста и группы крови. Клиническая и лабораторная диагностика. - 2013. – 6. – С. 23-25.

6. Лакин Г.Ф. Биометрия. М: Высшая школа, 1990. – 352 с.

7. Мажитова М.В., Теплый Д.Л. Возрастные и половые особенности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты плазмы крови белых крыс. Экспериментальная физиология, морфология и медицина. Естественные науки. – 2010. – Т 1 (30). – С. 79 – 85.

8. Руднева И.И., Скуратовская Е.Н., Шайда В.Г. Возрастные изменения сыворотки крови доноров. Материалы ІХ Международной научно-практической интернет-конференции «Проблемы и перспективы развития науки в начале третьего тысячелетия в странах СНГ». 2013. С. 15-17.

9. Berr C., Coundray С., Bonithon-Корр C. Demographic and cardiovascular risk factors in relation to antioxidant status: the EVA study. International J. for Vitamin and Nutrition Research. - 1998. - N 01. – P. 3.

10. Devi R. Kumar M.P. Effect of aging and sex on the caeruloplasmin (Cp) and the plasma protein levels. Journal of Clinical and Diagnostic Research. – 2012. – May (Suppl-2). – Vol. 6(4). – P. 577 – 580.

11. Lasheras C., Huerta J.M., Gonzalez S. Independent and interactive association of blood antioxidants and oxidative damage in elderly people. Free Radical Research. - 2002. - V. 36, N 8. – P. 875 – 882.

12. Nakhjavani M., Morteza A., Meysamie A. Serum heat shock protein 70 and oxidized LDL in patients with type 2 diabetes: does sex matter? Cell Stress Chaperones. – 2011. –16(2). – P 195 – 201.