Биологические науки / 2. Структурная ботаника и биохимия растений

Мозуль В.И.,  Денисенко О.Н.

Запорожский государственный медицинский университет

ИЗУЧЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА ТРАВЫ ТЫСЯЧЕЛИСТНИКА ЧЕРНОМОРСКОГО

          Одной из актуальных задач современной фармакогнозии является поиск и изучение  растений традиционно применяемых в народной медицине как потенциальных источников лекарственного сырья.

            Представителей рода тысячелистник (Achillea) насчитывается  cвыше 150  видов, произрастающих в лесной, лесостепной и степной зонах. Среди видов тысячелистника  наиболее изучен тысячелистник обыкновенный. Интерес к нему обусловлен тем, что он обладает кровоостанавливающим, гипотензивным, спазмолитическим, ранозаживляющим, желчегонным действием,  усиливает секреторную активность желудка и  повышает диурез [3].

Определенный интерес представляет тысячелистник черноморский (Асhillea euxina  Klok.), произрастающий  на приморских песках  Николаевской, Херсонской и Запорожской области,  который изучен недостаточно.

  Предварительными качественными и хроматографическими методами исследования, нами установлено наличие в траве тысячелистника черноморского значительного количества аминокислот. Известно, что аминокислоты выполняют регуляторную и пластическую функции, являются исходным материалом для биосинтеза ферментов, гормонов, аминокислот, витаминов, алкалоидов [1, 2]. Препараты аминокислот используются для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта, печени, для профилактики атеросклероза, уменьшения возбуждения центральной нервной системы,   улучшения кровообращения, в качестве гипогликемического и антиаритмического средств [4].

Целью настоящего исследования было определение качественного и количественного содержания  аминокислот в надземной части тысячелистника черноморского (Асhillea euxina  Klok.) .

Материалы и методы исследования

Нами проведен анализ состава аминокислот в траве тысячелистника черноморского, собранного в Приморском районе Запорожской области. Аналитическую пробу травы тысячелистника черноморского измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм, помещали в круглодонную колбу со шлифом, прибавляли 20 мл 70% спирта этилового, взвешивали с точностью ±0,01 г и нагревали на водяной бане с обратным холодильником на протяжении 1 часа. Колбу охлаждали до комнатной температуры, взвешивали и доводили 70% этанолом до первоначальной массы. Отбирали 50 мкл извлечения и упаривали досуха в вакуумном испарителе. Сухой остаток растворяли в 200 мкл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, нагревали на водяной бане в течении 15 минут, при температуре 120°С, перемешивали и центрифугировали 3 минуты при 4000 оборотах. Для анализа использовали 50 мкл гидролизата. Анализ  аминокислот проводили на аминокислотном анализаторе ААА Т-339 М (Чехия). Разделение проводили в среде цитратного буферного раствора. В качестве неподвижной фазы использовали катионит марки Ostion LGAN на колонках размером 0,8×60 см (№1), 0,7×60 см (№2). Аминокислоты идентифицировали методом стандартных добавок.  Повторность анализов трехкратная, достоверность различий оценивали по критерию Стьюдента. Полученные данные представлены в таблице 1.

                                                                                                             Таблица 1

Содержание аминокислот  в траве тысячелистника черноморского (мг/100мг)

Аминокислоты

Содержание, мг/100мг

Аминокислоты

Содержание, мг/100мг

Заменимые аминокислоты

 

Оксипролин

0,25

Моноаминомонокарбоновые

 

Незаменимые

 

Аланин

0,48

Моноаминомонокарбоновые

 

Глицин

0,85

Валин

0,51

Серин

0,58

Изолейцин

0,38

Тирозин

0,28

Лейцин

0,28

Цистеин

0,17

Метионин

0,21

Моноаминодикарбоновые

 

Треонин

0,39

Аспарагиновая кислота

0,36

Фенилаланин

0,32

Глютаминовая  кислота

1,85

Диаминомонокарбоновые

 

Диаминокарбоновые

 

Лизин

0,79

Аргинин

1,61

Оксилизин

0,09

Гетероциклические

 

Сумма заменимых кислот

7,43

Гистидин

0,41

Сумма незаменимых кислот

2,99

Пролин

0,59

Сумма аминокислот

10,42

 

          В результате проведенных исследований в траве тысячелистника черноморского обнаружено 19 аминокислот, из которых 8 незаменимых (лизин, лейцин, валин, треонин, изолейцин, фенилаланин, метионин, оксилизин).

Суммарное содержание аминокислот в траве тысячелистника черноморского  высокое и составляет 10,42 мг/100мг. Количество заменимых кислот несколько выше (7,43 мг/100мг), чем незаменимых (2,99 мг/100мг).

В ряду анализируемых кислот больше всего выявлено моноаминокарбоновых кислот (4,45 мг/100мг), из которых преобладают заменимые кислоты – глицин, серин, аланин, из незаменимых – валин, треонин, изолейцин. Среди всех обнаруженных аминокислот преобладают моноаминодикарбоновая глутаминовая кислота (1,85 мг/100мг) и диаминомонокарбоновая кислота – аргинин (1,61 мг/100мг).

В незначительных количествах выявлены гетероциклические аминокислоты. Лимитирующими аминокислотами являются  незаменимые аминокислоты – оксилизин (0,09 мг/100мг) и метионин (0,21 мг/100мг) и моноаминокарбоновая заменимая кислота цистеин (0,17 мг/100мг). Таким образом, доля заменимых аминокислот составляет более 70% от общей суммы, чем незаменимых  (около 30%).

     Выводы

1.Исследован качественный состав и количественное содержание аминокислот в траве тысячелистника черноморского. Идентифицировано 19 аминокислот, из которых 8 незаменимых (изолейцин, лизин, оксилизин, метионин, фенилаланин, тирозин, треонин, валин) .

2. Содержание суммы аминокислот в траве тысячелистника черноморского составляло 10,08 мг/100мг

       Литература

1.     Дроздова И.Л., Бубенчиков Р.А. Аминокислоты фиалки и донника рослого // Фармация. – 2003. – №5. – С. 14-15.

2.     Кисличенко В.С., Вельма В.В. Изучение аминокислотного состава цветков, листьев и экстракта из Sambucus nigra // Химия природных соединений. – 2006. – №1. – С 98.

3.     Кортиков В.Н. Полная энциклопедия лекарственных растений /В.Н. Кортиков, А.В. Кортиков  . – Ростов н/Д: Феникс, 2008. – 797 с.

4.     Сергунова Е.В., Самилина И.А., Сорокина А.А. Изучение аминокислотного состава плодов и экстракта шиповника // Фармация. – 2003. – №2. – С. 13-15.