Биологические науки/6.Микробиология

 

Д.м.н. Савченко Т.Н.

Волгоградский государственный медицинский университет, Россия

 

Микробиологическая характеристика дрожжеподобных грибов, выделенных из генитального тракта женщин репродуктивного возраста

 

Заболевания, вызванные грибами, занимают одно из ведущих мест среди оппортунистических инфекций. Кроме роста числа таких инфекций, в современных условиях чётко определяются две тенденции – изменение видового  спектра   грибов в  этиологической  структуре микозов и появление

проблемы лекарственной устойчивости. Данные тенденции определяют повышенное внимание исследователей к проблеме диагностики и лечения грибковых инфекций.

Цель настоящего исследования – определить видовой состав и чувствительность к противогрибковым препаратам дрожжеподобных грибов, выделенных из вагинального отделяемого.

Материалы и методы исследования

Нами было обследовано 228 пациенток. Вагинальное отделяемое высевали на агар Сабуро, оценивали культуральные свойства (характер поверхности, пигмент, консистенцию колоний), способность грибов формировать истинный мицелий и хламидоспоры, проводили дальнейшую биохимическую идентификацию с помощью тест-системы «Mycotube» (BBL, США), позволяющей изучить способность ферментировать углеводы (декстрозу, ксилозу, сахарозу, раффинозу, лактозу и трегалозу), расщеплять цитрат и мочевину.

Чувствительность грибов к антигрибковым препаратам оценивали с помощью тест-системы «Fungi test» (Bio Rad, США), воспроизводящей стандарт М27 A2 NCCLS и включающей 6 препаратов: флуцитозин, амфотерицин, миконазол, кетоконазол, итраконазол и флуконазол.

Полученные данные анализировали и подвергали статистической обработке.

Результаты исследования

Дрожжеподобные грибы были выделены из отделяемого влагалища у 27,3% обследованных женщин.

Идентифицировано 10 видов грибов, относящихся к 4 родам: Сandida, Saccharomyces, Geotrichum и Trichosporon. Доминирующим видом был C. albicans. Частота его обнаружения составляла 83,7% от всех изолированных культур. На долю других видов приходилось 16,3% находок. Среди них наиболее часто встречались C. glabrata (35,3%), C. krusei (19%), C. parapsilosis (14,2%) и C. tropicalis (12,9%).

Другие виды выделяли значительно реже: S. сerevisiae (9,1%), C. kefyr, С. guilliermondii, Geotrichum candidum и Тrichosporon spp. (от 0,4 до 5,6%).

Анализ биохимических профилей у разных видов грибов свидетельствует о их многовариантности, свойственной большинству изученных видов. Максимальное количество биовариантов отмечено у C. albicans и C. glabrata (по 7), 6 – у C. parapsilosis , по 4 у C. tropicalis, C. krusei и S. cerevisiaе.              

У 167 штаммов грибов, относящихся к 9 видам, определена чувствительность к 6 антимикотикам. В их числе 102 штаммов С. albicans и 65 штаммов других видов.

Установлено, что частота встречаемости штаммов С. albicans, чувствительных ко всем 6 препаратам составила 71,9%, в то время  как у других видов - 19,2%. Максимально низкие показатели числа чувствительных ко всем антимикотикам штаммов выявлены у C. glabrata, C. krusei и C. tropicalis. Подавляющее большинство этих видов (63,6–80%) имели 1–2 маркера чувствительности ко всем исследованным препаратам. Установлено, что амфотерицин В был единственным, к которому все грибы имели чувствительность.

К флуцитозину in vitro были чувствительны 97,3% штаммов C. albicans, 98,8% C. glabrata, 90,5% C. parapsilosis, 95,5% C. tropicalis. Несколько ниже

этот показатель был для S. cеrevisiae и C. kеfyr (76,9 и 75% соответственно). Среди С. krusei только 31,3% штаммов были чувствительны к флуцитозину.

Что касается миконазола и кетоконазола, то к ним были чувствительны соответственно 92,4 и 80,4% штаммов C. albicans, по 90,5% штаммов C. parapsilosis, по 91,7% – C. kefуr, 76,9 и 84,6% – S. cеrevisiae, 70 и 74% – С. glabrata. Значительно ниже этот показатель был у С. krusei (28,1 и 53,1%) и C. tropicalis (50 и 68,2%). Обращает на себя внимание, что для большинства видов грибов имела место перекрёстная устойчивость к обоим препаратам группы имидазолов. В то же время среди C. tropicalis и С. krusei значительно чаще встречались штаммы, чувствительные к кетоконазолу, чем к миконазолу.

Для препаратов триазолов (итраконазол, флуконазол) перекрестная устойчивость была менее характерна. Так, относительно высокая частота чувствительных к итраконазолу штаммов отмечена у C. albicans (84,8%), C. parapsilosis (81%), C. kefyr (83,3%). У остальных видов (C. glabrata, С. krusei, C. tropicalis, S. cеrevisiae) этот показатель почти всегда был ниже 50% (24, 31,3, 54,6 и 46,2% соответственно). Напротив, к флуконазолу чувствительные штаммы грибов регистрировали заметно чаще. Исключение составил вид С. krusei, среди штаммов которого чувствительными к флуконазолу были только 15,6% штаммов.

Выводы

Полученные данные свидетельствуют о многообразии видового состава дрожжеподобных грибов в вагинальном микробиоценозе, среди которых преобладающим видом   является C. аlbicans.

Установлена индивидуальная чувствительность различных штаммов к противогрибковым препаратам, что диктует необходимость дифференцированного подхода к назначению этиотропной терапии.

Литература

1.     Сергеев А.Ю., Маликов В.Е., Жариков Н.Е. Этиология вагинального кандидоза и проблема устойчивости к антимикотикам. Национальная академия микологии. – 2001. - № 4. – С.12-18.

2.      Багирова Н.С., Дмитриева Н.В. Дрожжевые грибы: идентификация и резистентность к противогрибковым препаратам в онкогематологическом стационаре/Инфекции и антимикробная терапия. – 2007. - № 3. – С.178-182.

3.     Rex J.H., Rinald M.G.,Pfaller M.A. Resistance of Candida species to fluconazole. Antimicrob Agents Chemother. – 2005. - № 39. – Р.18-23.

4.      Wingard J.R. Increase in Candida krusei infection among patients with bone marrow transplantation and neutropenia treatment prophylactically with fluconazole. N. Engl. J. Med. 1991. – Р. 325-327.