Егорова Е.В., Пересторонин В.И., Цыбиков Н.Н.

ГБОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия

Фагоцитарная активность нейтрофилов у больных хроническими гнойными риносинуситами

Особое место среди механизмов защиты слизистой оболочки носа и околоносовых пазух (ОНП) принадлежит фагоцитозу. Фагоциты участвуют в подготовке чужеродных субстанций и их переработке в те формы, которые стимулируют иммунный ответ. Без участия фагоцитоза невозможны специфические иммунные реакции организма[5, 6, 7].

Фагоцитоз является главной функцией полиморфноядерных нейтрофильных лейкоцитов и мононуклеарных клеток (макрофагов). Время реакции нейтрофилов на воспалительные стимулы составляет от нескольких минут до 2 - 3 часов. В течение этого времени они в больших количествах появляются в тканях и фактически отвечают за реакции острой фазы воспаления [1].

Известно, что фагоцитарное число (ФЧ) и фагоцитарный индекс (ФИ) нейтрофилов на поверхности слизистых, является одним из критериев местной резистентности [3,4]. При этом, следует учесть, что наряду с важностью определения этих показателей, несомненным является высокая патофизиологическая значимость лейкоцитов в воспалении.

Цель исследования: изучить фагоцитарную активность нейтрофилов у здоровых и больных хроническим гнойным и гнойно-полипозным риносинуситом

Материалы и методы исследования

Под нашим наблюдением находилось 60 больных хроническим гнойным риносинуситом (ХГРС) и 40 пациентов хроническим гнойно-полипозным риносинуситом (ХГПРС) в возрасте от 18 до 55 лет. Контрольная группа состояла из 20 здоровых лиц без сопутствующей и ЛОР патологии.

Материалом для иммунологического исследования служили назальный секрет здоровых и больных ХГРС и ХГПРС, нейтрофилы, полученные из стабилизированной донорской крови. Для получения смывов из полости носа пациенту в каждый общий носовой ход на 10 минут вводили сухой марлевый тампон, который после извлечения переносили в пробирку, содержащую 1 мл 0,9% раствора натрия хлорида.

Нейтрофилы выделяли из донорской крови на градиенте плотности (1,097 г/мл) фиколл-урографин, трижды отмывали физиологическим раствором, вносили в пробирки в объеме 200 мкл (1000000 клеток в каждой аликвоте) и дополнительно вводили по 20 мкл назального секрета. В контрольные пробирки вместо носового секрета вводили 2 мл забуференного физиологического раствора. Через 30 минут инкубации при 37⁰С готовили мазки.

Для определения фагоцитарного числа (ФЧ) и фагоцитарного индекса (ФИ) в пробирки дополнительно вводили по 50 мкл суспензии латекса (d - 1,4 мкм) и после 30-минутной инкубации готовили мазки, которые окрашивали по Романовскому-Гимза. Исследование проводилось в клинико-иммунологическом центре, г. Чита.

Статистическая обработка данных осуществлена при помощи пакета программ «Biostat» и Microsoft Excel 2003 (Microsoft Office 2003 for Windows XP Professional).

Результаты и обсуждение

В таблице 1 нами представлены результаты определения ФЧ и ФИ нейтрофилов доноров, предварительно инкубированных назальным секретом, как здоровых, так и больных хронических гнойных риносинуситом (ХГРС). Постановка этих экспериментов отличается оригинальностью, т.к. исследуется фагоцитарная активность не непосредственно в очаге воспаления, а модуляция ФЧ и ФИ лейкоцитов, взятых у доноров.

Таблица 1

Фагоцитарное число и фагоцитарный индекс нейтрофилов, инкубированных с назальным секретом у здоровых и больных ХГРС

(M ±SD)

Обследуемые группы	Субстрат	Фагоцитарное число (%)	Фагоцитарный индекс
Контроль n=10	Физ. раствор	2,5±0,1	30,3±4,5
Здоровые n=20	Назальный секрет	10,1±0,4 Р<0,05	60,5±2,6 Р<0,05
Больные ХГРС n=60	Назальный секрет	15,5±0,3 Р1<0,05	75,0±2,5 Р1<0,05
Больные ХГПРС n=40	Назальный секрет	24,3±0,2 Р2<0,05 Р3<0,05	84,2±2,2 Р2<0,05 Р3<0,05

Примечание: Р - уровень значимости достоверных отличий между контролем и здоровыми, Р1 - уровень значимости достоверных отличий между здоровыми и больными ХГРС, Р2 - уровень значимости достоверных отличий между здоровыми и больными ХГПРС, Р3 - уровень значимости достоверных отличий между больными ХГРС и ХГПРС

Оказалось, что после инкубации с назальным секретом здоровых лиц ФЧ возрастает в 4 раза, а ФИ в 2 раза. Активация нейтрофилов в этих условиях отражает способность секретов вообще и назального в частности стимулировать реакции. Ранее этот феномен был описан неоднократно [2], касательно ротовой и зубодесневой жидкости. Вместе с тем, назальный секрет больных ХГРС и особенно ХГПРС в течение инкубации еще в большей степени увеличивает ФЧ и ФИ. Эти сдвиги, несомненно, свидетельствуют о высоких активаторных свойствах назального секрета больных с локальным гнойным воспалением.

Литература:

1. Азнабаева Л.Ф., Арефьева Н.А., Ворошилова Н.Н, Султанов Н.М. Взаимосвязь факторов защиты и микробного сообщества слизистых оболочек носа у больных хроническим гнойным // Успехи современного естествознания. – 2007. – № 3 – С. 69-71.

2. Активность нейтрофилов, инкубированных с ротовой и десневой жидкостями при воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области / М.Ю. Игнатов, Н.Н. Цыбиков, Е.Т. Доманова, Е.Ю. Масло // Забайкальский медицинский вестник. – 2010 г. - №1. – С.14-17.

3. Гусейнов Х.Ю. Синдром вторичного иммунодефицита у больных хроническим бронхитом// Проблемы туберкулеза - 1999. - №2. - С. 37-39.

4. Кетлинский С.А. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета /С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина // Иммунология - 1995. - №3 - С. 30-44.

5. Хаитов Р.М. Иммунология / Р.М. Хаитов. – М. : Медицина, 2000. – 432 с.

6. Чеснокова Н.П., Мареев О.В. , Капустина Н.Ю. Хронический синусит: патогенетические факторы развития, обоснование новых принципов повышения эффективности комплексной терапии // Практическая медицина, 2011. - № 51. – С. 7-10.

7. Vorland L.H. Antimicrobial peptides as part of the innate immune defense system. Folia Otorhinolaryng et Pathol Respiratoriae 1996; 2: 1-2: 13-21.