УДК 616.155.392-036.111

МУТАЦИОННЫЙ СТАТУС ГЕНА FLT3 У БОЛЬНЫХ НА ОСТРЫЙ ЛЕЙКОЗ

Молеща Б.Т.

НУТУ «Київський політехнічній інститут»

e-mail: bogdana11@ukr.net

Острый миелоидный лейкоз (ОМЛ) представляет собой гетерогенную группу заболеваний, морфологическим субстратом которых являются миелоидные бластные клетки. К лейкозной трансформации при ОМЛ приводит накопление приобретенных соматических генетических изменений в кроветворных клетках-предшественниках.

Ген FLT3 кодирует рецептор классу ІІІ тирокиназ, который регулирует кровообразование. Мутация гена FLT3 – самая распространенная генетическая аномалия при острых миелоидных лейкозах (ОМЛ) и острого лимфобластного лейкоза. Наиболее распространенными мутациями в гене FLT3 являются внутренние тандемные дупликации (ITD) в околомембранном домене и точечные мутации в тирозинкиназном домене (TKD), которые приводят к активации рецептора и ассоциируются с высоким риском рецидива и низкой общей выживаемостью.

Белок FLT3 кодируется геном flt3, который расположен на длинном плече хромосомы 13 (13q12.2). Ген flt3 состоит из 24 экзонов, длина его транскрипционной РНК составляет 2979 пар оснований [1]. Представленные нарушения FLT3 являются очень «удобными» в отношении диагностики из-за их локализации, главным образом, в двух участках гена.

Внутренние тандемные дупликации ITD наблюдаются между 14-м и 15-м экзонами гена flt3. По разным данным, размер вставки может варьировать от 2 до 400 нуклеотидов. Расстояние между этими экзонами составляет чуть более 300 нуклеотидов, поэтому вставку можно обнаружить с помощью одной полимеразной цепной реакции (ПЦР).

ПЦР и электрофорез в агарозном геле. Для анализа геномных нарушений FLT3 используют образцы свежей периферической крови или костного мозга, из которых выделяется ДНК и затем проводится ПЦР. После этого амплифицированные фрагменты ДНК разделяются по размеру в агарозном геле. В случае крупных ITD-вставок (более 10 нуклеотидов) можно ограничиться визуальным анализом полученного результата, так как крупные вставки видны невооруженным глазом. В норме подобранные праймеры амплифицируют фрагмент в 328 пар оснований (п.о.). В том случае, если вставка затрагивает оба аллельных локуса гена (что случается крайне редко), продукт ПЦР мигрирует в виде одной полосы выше 328 п.о. Как правило, наблюдается 2 полосы: 328 п.о. – что соответствует нормальном аллелю и полосы большего размера – показатель наличия ITD [2].

Задачи исследования:

1.    Сравнить частоту выявления мутаций в гене FLT3.

2.    Оценить частоту и характеристики мутаций в генах FLT3, у пациентов с ОМЛ в сравнении со здоровыми донорами – добровольцами.

3.    Сравнить клинико-гематологические характеристики ОМЛ с мутациями FLT3 без мутаций в данных генах.

На сегодня перспективным является исследование мутации рецептора FLT3 с целью совершенствования лечебной практики.

Литература:

1. Yamamoto Y., Kiyio H., Nacano Y. et al. Activating mutation of D835 within the activation loop of FLT3 in human hematologic malignancies. Blood 2001;97:2434–9. 3.

2. Birg F., Rosnet O., Carbuccia N. et al. The expression of FMC, kit and FLT3 in hematopoietic malignancies. Leuk Lymph 1994;13:223–7.