К.м.н. Московский А.В., д.б.н. Любовцева
Л.А., д.м.н. Шумский А.В.
Чувашский госуниверситет
им. И.Н. Ульянова,
Самарский
медицинский институт «РЕАВИЗ», Россия
Морфофункциональное
исследование
биоаминсодержащих
и иммунокомпетентных
клеток
пульпы зуба
Целью нашего исследования
явилось изучение морфо-функциональных изменений пульпы зуба в процессе одонтогенеза,
при кариесе и пульпите в сочетании с пародонтитом.
Объектом
исследования служили развивающиеся ткани зубочелюстной системы эмбрионов и
плодов человека в возрасте от 8 до 28 недель и пульпа зуба взрослого человека в
возрасте от 23 до 49 лет. Пациенты были разбиты на 8 групп в соответствии с
патологией. Контрольной группой служила пульпа зуба взрослого человека, взятая
по ортопедическим показаниям. Из ткани готовились криостатные
и парафиновые срезы, которые обрабатывались люминесцентно-гистохимическими
методами Фалька и Кросса для выявления структур, содержащих биогенные амины.
Полученные препараты рассматривались под люминесцентным микроскопом ЛЮМАМ-4.
Метод спектрофлуориметрии использовался для
количественного выражения уровней серотонина, катехоламинов и гистамина в
структурах пульпы. Также срезы окрашивались методами Гленнера на моноаминоксидазу, Массона-Фонтаны
для гистохимической идентификации серотонина и его метаболитов, суданом чёрным
«В» для выявления внутриклеточных комплексно связанных липидов, паральдегид-фуксином по Гомори для выявления клеток с
пептидной секрецией и контрольно окрашивались гематоксилин-эозином.
Для оценки состояния местного иммунитета и выявления антигенных
маркёров нейроэндокринных клеток (синаптофизина, нейронспецифической энолазы – нейронспецифической энолазы,
хромогранина А), а также иммунокомпетентных клеток (CD3, CD20, CD68) проводили иммуногистохимические исследования с применением моноклональных антител и реактивов фирмы «Dako» (Дания).
Нами
обнаружено, что в структурах развивающегося зуба нейромедиаторные
биогенные амины впервые появляются на самых ранних этапах и являются важными
индукторами дифференцировки тканей. Они обеспечивают взаимное влияние
эпителиальных и мезенхимальных структур в процессе развития зуба.
В
здоровой пульпе зуба взрослого человека,
нейромедиаторы были выявлены в нервных волокнах и их окончаниях
около субодонтобластического слоя, одонтобластах,
гранулярных и тучных клетках. По ходу кровеносных сосудов выявляются единичные
тучные клетки, с плотно упакованными гранулами, содержащие биоамины, обладающие
ортохромазией, аргентаффинностью,
суданофилией и слабой реакцией на моноаминоксидазу.
Гранулярные люминесцирующие клетки субодонтобластического
слоя проявляют свойства APUD-клеток: дают положительную реакцию на биоамины, моноаминоксидазу, синаптофизин, нейронспецифическую
энолазу, хромогранин А, альдегид-фуксин, обладают аргентаффинностью, суданофилией и
часть из них по локализации совпадают с дендритными клетками пульпы зуба. Иммуннопозитивные клетки в интактной пульпе зуба единичны,
выявляются в субодонтобластическом слое.
При
кариесе и остром пульпите в сочетании с пародонтитом отмечается максимальный
динамический подъём биоаминов: увеличение содержания гистамина в тучных клетках
и кровеносных сосудах, катехоламинов и серотонина – в гранулярных
люминесцирующих клетках. Возрастает число β-метахроматичных
клеток с отчётливо различимыми гранулами и признаками дегрануляции. Изменения
морфо-функциональных свойств нейроэндокринных клеток наблюдаются уже при
начальном поражении твёрдых тканей зуба и предшествуют развитию острого
пульпита в сочетании с пародонтитом средней степени тяжести. При развитии
кариозной патологии происходит увеличение количества нейроэндокринных клеток с
максимумом при глубоком кариесе в сочетании с пародонтитом лёгкой степени.
При
хроническом пульпите в сочетании с пародонтитом тяжёлой степени наблюдается
истощение нейромедиаторной системы пульпы зуба. В популяции тучных клеток
преобладают слабо люминесцирующие дегранулированные
клетки, обладающие низкой суданофилией и аргентаффинностью.
Число иммунопозитивных клеток снижается.
Таким
образом, при использовании комплекса гистохимических методов, нами изучен
морфогенез пульпы с момента её возникновения вплоть до разрушения при
воспалении. Нами обнаружено, что нейромедиаторные
биогенные амины присутствуют в развивающейся пульпе зуба с самых ранних периодов
эмбриогенеза, принимая участие в регуляции процессов дифференцировки тканей развивающегося
зуба. Изменение морфо-функциональных свойств нейроэндокринных клеток наблюдаются
уже при начальном поражении твёрдых тканей зуба и предшествуют развитию острого
пульпита. При развитии кариозной патологии происходит, увеличение нейроэндокринных
клеток с максимумом их количества при глубоком кариесе. При остром пульпите
отмечается максимальный динамический подъём биоаминов, что можно связать с
процессами воспаления при данной патологии. При хронизации воспалительного
процесса наблюдается истощение нейромедиаторной системы пульпы зуба, а число иммуннопозитивных клеток снижается.
ЛИТЕРАТУРА
1.
Гемонов В.В., Лаврова Э.Н., Фалин
Л.И. Развитие органов полости рта и зубов. М: Медицина, 2002. 185 с.
2.
Григорьян А.С. Общая патология и проблемы теории и
практики стоматологии // Стоматология. М: Медиа
Сфера, 2002. № 5. С. 7-10.
3.
Иванов В.С., Винниченко Ю.Л., Иванова Е.В. Воспаление пульпы зуба. М:
Медицинское информационное агентство, 2003. 264 с.
4.
Родзаевская Е.Б., Воробьёва Г.П., Богомолова Н.В.,
Романова Т.П. Развитие и гистофизиология
зубочелюстного аппарата человека. Саратов: Изд-во СГМУ, 2004. 141 с.