Аргынбекова А.С., Жетписбаев Б.А., Адекенов С.М., Тулеуов Б.И.

Государственная медицинская академия г. Семей, Казахстан

АО «НПЦ «Научный производственный центр фитохимии», г. Караганда, Казахстан

Изменение пуринового обмена у облученных животных при действии фитопрепарата Mit.

 

Биохимические исследования играют решающую роль в радиобиологии [1]. В связи с тем, что судьба облученного организма определяется степенью повреждения и восстановления клеток как радиочувствительных, так и радиорезистентных тканей, внимание ученых в настоящее время привлекают изменения метаболизма на уровне ткани, клетки и субклеточных структур. [2]. Кроме того, исследования на клеточном уровне позволяют установить наиболее общие закономерности радиобиологического ответа [3].

В настоящее время одной из  задач, стоящих перед клинической медициной и радиобиологами, является поиск новых средств противолучевой защиты, способных оказывать эффективное действие при воздействии облучения. При этом особое место среди них принадлежит средствам, направленным на коррекцию иммунологических и метаболических нарушений облученного организма [4,5].

Перспективным решением проблемы повышения неспецифической устойчивости организма при воздействии неблагоприятных факторов внешней среды может служить применение фармакологических средств растительного происхождения – фитопрепаратов. В этом отношении особый интерес представляют тритерпеноиды – класс, богатый соединениями, сочетающими доступность с биологической активностью. Последние десятилетия дали возможность надеяться на введение в медицину препаратов на основе тритерпеноидов лупанового ряда [6]. Наиболее перспективным из этого ряда является бетулин – тритерпеноид, поразительно широко распространенный в природе,  выделенный из коры березы повислой (Betula pendula Roth) [7,8] . В данной работе был апробирован фитопрепарат Mit, представляющий собой смесь тритерпеноидов (содержание бетулина до 80%) и флавоноидов, выделенных экстракцией коры березы 90% изопропанолом, с последующим охлаждением и фильтрованием выпавшего осадка.

Целью исследования явилось изучение действия фитопрепарата Mit (смесь тритерпеноидов из коры березы повислой) на обмен пуриновых нуклеотидов после острого общего гамма-облучения.

Материалы и методы исследования:

Выполнены 3 серии опытов на  42 белых беспородных половозрелых крысах массой 180-200 грамм. 1 группа – интактные животные (n=12), 2 группа – облученные (n=15), 3 группа – облученные + фитопрепарат Mit (n=15). Все подопытные животные содержались в однотипных условиях вивария.  Вторая и третья группы подвергались облучению в дозе 6 Гр  на радиотерапевтической установке «Луч-1», гамма-лучами 60Co.  Исследования во 2-ой  группе животных проводились через 30 дней после облучения.  Животные 3-ей серии опытов через 2 недели после облучения получали  фитопрепарат Mit из расчета  50 мг/кг массы тела per os в течение 14 дней. Из печени, селезенки, тимуса, надпочечников облученных и необлученных животных готовились гомогенаты, по ним определялась активность основных ферментов пуринового обмена – аденозинмонофосфатдезаминазы (АМФ-дезаминазы), аденозиндезаминазы (АДА) и 51-нуклеотидазы. Показатели определялись во всех указанных группах, с проведением соответствующей статистической обработки цифровых данных по общепринятым методам вариационной статистики по методике Е.В.Монцевичюте-Эрингене  с вычислением критериев Стьюдента. Разность показателей расценивалась как достоверная при Р0,05.

Результаты исследования:

Анализ экспериментального материала показывает (таблица 1), что через 30 дней после общего гамма-облучения происходят существенные изменения в селезенке: активность АМФ-дезаминазы снижается на 46%, АДА на 60% и 51-нуклеотидазы на 74,2% (P<0,05).

 

 

 

 

 

Таблица 1. Состояние обмена пуриновых нуклеотидов в селезенке, печени, тимусе и надпочечниках  облученного организма при действии фитопрепарата Mit.      

 

Биохимические

показатели

(нмоль/с)
                          Серии опытов

 

1

интактные

животные

(n=12)

2

облученные   животные

(n=15)

3

облученные животные+

фитопреп. Mit              (n=15)

 

                                                 Селезенка

АМФ-дезаминаза

0,390+0,059

0,212+0,021*

0,780+0,010* 0

АДА

1,480+0,096

0,589+0,031**

0,860+0,011*  0

51-нуклеотидаза

0,465+0,022

0,120+0,012**

0,085+0,008**  0
                                                          Печень

АМФ-дезаминаза

0,020+0,003

0,151+0,005**

0,780+0,072**  0

АДА

0,175+0,035

0,212+0,028

0,870+0,070**  0

51-нуклеотидаза

0,034+0,004

0,035+0,030

0,170+0,007**  00
                                                    Тимус

АМФ-дезаминаза

0,120+0,015

0,105+0,007*

2,25+0,36**  00

АДА

0,424+0,039

0,301+0,028*

3,65+0,015*  00

51-нуклеотидаза

0,138+0,011

0,095+0,013*

0,61+,010*  00

                                                  Надпочечники

АМФ-дезаминаза

0,060+0,006

0,155+0,004**

1,30+0,10**  00

АДА

0,801+0,072

0,401+0,022**

3,0+0,110**  00

51-нуклеотидаза

0,043+0,010

0,115+0,006**

0,550+0,005**  00

Примечание: * - достоверно к 1 группе Р<0,05 и **-   Р<0,01,

 0 – достоверно ко 2 группе Р<0,05 и 00 - Р<0,01

 

Полученные цифровые данные свидетельствуют о снижении обмена пуриновых нуклеотидов в селезенке при общем сублетальном  радиационном поражении организма.

При действии фитопрепарата Mit в селезенке облученного организма достоверно повышается активность АМФ-дезаминазы на 268% (P<0,05), в сравнении с контрольной группой,   превосходя показатели интактной группы. Достоверно по отношению к контрольным показателям повышается и активность АДА на 46%, но эти данные не достигают интактных показателей. На фоне повышения АМФ- дезаминазы и АДА продолжает снижаться активность 51-нуклеотидазы на 29,2% и 81,7% (Р<0,01) соответственно, в сравнении с контрольной и интактной группами.

Таким образом, фитопрепарат Mit в селезенке облученного организма  повышает активность АМФ- дезаминазы и снижает активность 51-нуклеотидазы.

При радиационном поражении организма в печени происходит достоверное повышение активности АМФ-дезаминазы в 7,5 раза (Р<0,01), имела тенденцию к увеличению активность АДА. При этом активность 51-нуклеотидазы не изменялась.

Фитопрепарат Mit в печени облученного организма достоверно повышает активность АМФ-дезаминазы в 5,2 раза и АДА в 4,1 раза (P<0,05), 51-нуклеотидазы  в 4,9 раза (P<0,01), в сравнении с контрольной группой, превосходя интактные показатели.

Таким образом, при действии фитопрепарата Mit в печени облученного организма повышается активность АМФ-дезаминазы, АДА и 51-нуклеотидазы.

 В тимусе под воздействием общего сублетального гамма-облучения происходит достоверное снижение активности АДА на 20% и 51-нуклеотидазы на 31,2% (P<0,05). При этом активность АМФ- дезаминазы существенно не изменяется.

При действии фитопрепарата Mit в тимусе облученного организма достоверно повышается активность АМФ- дезаминазы в 21,4 раза, АДА – 12,1 раза, 51-нуклеотидазы – 6,4 раза (P<0,01), в сравнении с контрольными данными.

Таким образом, фитопрепарат Mit повышает активность всех основных ферментов пуринового обмена в тимусе облученного организма.

Данные таблицы показывают, что в надпочечниках при действии общего сублетального гамма-излучения достоверно повышается активность АМФ- дезаминазы на 158,3% и  51-нуклеотидазы на 167,4%, в то же время активность АДА снижается на 50% (P<0,01).

Фитопрепарат Mit в надпочечниках облученного организма достоверно повышает активность 51-нуклеотидазы в 4,8 раза, АДА - 7,5 раза и АМФ- дезаминазы - 8,4 раза (P<0,01) по отношению к контрольной группе, эти данные значительно превышают показатели интактной группы.

Таким образом, фитопрепарат Mit в надпочечниках облученного организма вызывает повышение активности всех основных ферментов пуринового обмена.

 

Выводы:

1. При общем сублетальном радиационном поражении организма животных активность всех изучаемых ферментов пуринового обмена снижается в селезенке и тимусе, кроме печени и  надпочечников, где показатель  активности АМФ-дезаминазы повышается и превосходит данные  интактной группы.

2. При действии фитопрепарата Mit в облученном организме в печени, тимусе и надпочечниках повышается активность всех основных ферментов пуринового обмена по сравнению с контрольной и интактными группами животных, кроме селезенки, где отмечается понижение активности АДА и  51-нуклеотидазы.

Список используемой литературы:

1.     Кузин А.М. Молекулярная радиобиология клеточного ядра. М., 1973. – с.49-53.

2.     Ваничкин А.И., Каратаева Л.Ф. К вопросу о радиопоражаемости и радиочувствительности ткани при действии ионизирующего излучения // Механизмы регулирования жизнедеятельности организма в условиях патологии. Баку. – 1970. – с.529-530.

3.     Хансон К.П., Стрелина А.В., Воскобойников В.В. Биохимические аспекты действия ионизирующей радиации на живой организм. – Л., 1972. – с.64.

4. Деденков А.Н. Медицинская радиобиология: итоги и перспективы исследований // Медицинская радиология -1992. -Т.-37. -№9-10. -с.22

5.   Дранник Г.Н., Гриневич Ю.А, Дизик Г.М. Иммунотропные  препараты. - Киев:Здоров'я. - 1994.- с.37-62.

6.   Адекенов С.М. Биологически активные вещества растений и перспективы создания новых лекарственных препаратов// Развитие фитохимии и перспективы создания новых лекарственных препаратов, Алматы. – Ғылым. – 2004. –С.7-17.

7.  Похилло Н.Д., Махнев А.К., Уварова Н.И. //Химия природных соединений. -1995. -№6. – с.681.

8.  Василенко Ю.К.. Семенченко В.Ф., Фролова Л.М. и др. //Экспериментальная и клиническая фармакология. -1993. –Т.56. – с.53