Кирпушко О.В.¹, Ломберг М.Л.²

^1-Национальный университет пищевых технологий

^2-Институт ботаники им. М.Г. Холодного НАН Украины

МОРФОЛОГО-КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ ПРИЗНАКИ ОТДЕЛЬНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ COPRINUS SENSU LATO

Ежегодно в мире отмечается увеличение объемов промышленного производства грибов, расширение ассортимента культивируемых видов, что напрямую связано с их питательной и фармакологической ценностью. Недавние работы португальских и испанских исследователей [1, 2, 3] показали наличие в плодовых телах как съедобных, так и несъедобных видов коприноидных грибов биологически активных веществ различной природы, которые были обнаружены в их фенольных, полисахаридных и липидных фракциях. Были изучены химический состав и антиоксидантные свойства этих фракций, установлено наличие протокатеховой, р-гидроксибензойной, р-кумариновой кислот в фенольных фракциях; рамнозы, ксилозы, фукозы, арабинозы, фруктозы, глюкозы, маннозы, маннита, сахарозы, мальтозы и трегалозы в полисахаридных фракциях, а также линолевой кислоты, β- и γ-токоферолов, которые составляли основную часть липидных фракций [1].

В литературе приводятся данные относительно выделения из видов Coprinus sensu lato биологически активных веществ с противоопухолевыми, антифунгальными, антибактериальными, инсектицидными и антиоксидантными свойствами, а также их оценка. Ярким примером является представитель семейства Psathyrellaceae – Coprinopsis cinereа. Спиртовый екстракт плодових тел ингибирует рост клеток лимфоцитарного лейкоза in vivo. Также показано, что этот экстракт обладает антимикробной активностью относительно патогенной бактерии Neisseria gonorhoeae [3]. Сведения про антиоксидантную активность коприноидних грибов немногочисленны. Способность подавлять реакции перекисного окисления липидов отмечается

только у некоторых видов, таких как C. comatus, C. disseminatus и C. micaceus [4, 5].

Целью работы было определение морфолого-культуральных признаков отдельных представителей родов Coprinopsis и Coprinellus. Были исследованы морфологические и культуральные особенности 6 штаммов 3 видов и 2 родов коприноидных грибов из Коллекции шляпочных грибов Института ботаники им. М. Г. Холодного: Coprinellus ephemerus – 8, 49, 245; Coprinopsis сinerea – 200, 262; Coprinopsis atramentaria – 1946. Исследования скорости радиального роста проводили на агаризованных питательных средах различного состава: агаризованное пивное сусло (СА), картофельно-глюкозный агар (КГА), пшеничный агар (ПА), овсяный агар (OА), компостный агар (КА), мальт-экстракт агар (МЕА), мальт-экстракт-дрожжевой-пептон агар (МДПА) и мальт-экстракт-пептонный агар (МПА). Были охарактеризованы следующие культуральные признаки: тип колонии, цвет колонии и реверзума, плотность и зональность колонии, внешняя линия и т.п.

Анализируя полученные результаты, можно констатировать, что для большинства штаммов лучший рост обеспечивали среды натурального состава, например для штаммов C. atramentaria 1946 и C. ephemerus 245 в качестве оптимальной среды можно рекомендовать КА, для штамма C. ephemerus 49 – ПА соответственно. Наиболее универсальнымы оказались штаммы C. аtramentaria 1946, C. cinerea 262 и C. ephemerus 8, поскольку росли с одинаково высокой скоростью на двух различных питательных средах. Остальные исследованные штаммы оказались более избирательнымы по отношению к средам, поскольку максимальная скорость роста у данных штаммов фиксировалась на одной питательной среде. Наглядным примером может послужить штамм C. cinerea 200 для которого максимальную скорость роста обеспечивала комплексная среда МПА (рис. 1).

Рис. 1. Скорость роста штамма C. ephemerus 245 на различных питательных средах

Исходя из полученных данных, исследованные штаммы по скорости роста можно разделить на группы. К быстро растущим мы отнесли штаммы C. atramentaria 1946 , C. сinerea 200 и 262 с радиальной скоростью роста более 8 мм/сутки (табл. 1).

Таблица 1

Рекомендованные агаризованные среды для мицелиального роста исследованных штаммов

Вид	Штамм	Оптимальная питательная среда	Скорость роста, мм/сутки
C. atramentaria	1946	КГА	9,9 ±0,3
		КА	10,4 ±0,8
C. cinerea	200	МПА	9,2±0,5
	262	СА	8,3±0,1
		КГА	8,4±0,7
C. ephemerus	8	ПА	3,4±0,5
		ВА	3,9±0,8
	49	ПА	4,8±0,8
	245	КА	7,1±0,3

Промежуточную группу, со средней скоростью роста от 4 до 8 мм/сутки составили штаммы C. ephemerus 49 и 245, у которых скорость роста составила 4,8 и 7,1 мм/сутки соответственно. К медленно растущим, с радиальной скоростью роста менее 4 мм/сутки мы отнесли штамм C. ephemerus 8.

Следует подчеркнуть, что состав питательных сред существенно влияет не только на скорость, но и на характер роста мицелия. Образование мучнистых колоний наблюдалось для штаммов C. еphemerus 49, C. сinerea 200 и 262 на исследуемых средах КГА, СА, МДПА, МЕА и МПА. Следует отметить, что перистые колонии образовывались только у штаммов C. сinerea 200 и 262 на средах ПА и КА. Образование бархатистых колоний было характерно для штаммов C. еphemerus 8 и 49. Войлочные колонии наблюдались у штаммов C. еphemerus 8 и 245, C. еphemerus 200 на исследуемой среде ОА, а также у штамма C. atramentaria 1946 на питательной среде ПА. Бархатистые колонии образовывались только у штамма C. еphemerus 8 на среде МДПА. Образование ватообразных колоний наблюдалось у всех исследованных культур на питательных средах различного состава в зависимости от физиологических особенностей каждого конкретного штамма.

Интересно отметить, что наиболее плотные колонии наблюдались на натуральных питательных средах, в частности на среде СА у исследованных штаммов C. еphemerus 49 и 245, C. сinerea 200 и C. atramentaria 1946. На комплексных средах МПА и КГА плотные колонии образовывались у штаммов C. еphemerus 8 и 245, C. сinerea 200 и 262. Образование колоний с низкой плотностью было характерно для штаммов C. еphemerus 8 и 245, C. сinerea 200, 262 и C. atramentaria 1946 на средах натурального состава, а также для штаммов C. еphemerus 49 и C. atramentaria 1946 на коммерческой среде МЕА.

Ценным критерием для идентификации штаммов в культуре является концентрическая зональность, которая наблюдалась на питательных средах натурального состава (СА, КА) у всех исследованных штаммов. На комплексных питательных средах, в частности КГА, МДПА и МПА наблюдалось образование концентрических зональных кругов у штаммов C. еphemerus 8, 49 и C. сinerea 200, 262. Фиксируемые концентрические круги образовывались за счет разной плотности мицелия и хорошо прослеживались с возрастом колоний.

Следует указать, что к общим тенденциям при культивировании грибов на средах различного состава необходимо отнести варьирование текстуры, окраски колоний и изменение цвета реверзума. Окраска колоний всех исследованных штаммов на 1-2-е сутки культивирования была белой, потом со временем у многих видов наблюдалась определенная пигментация, как показано, например, для C. еphemerus 49, появлялись пигментные пятна коричневого цвета. Во время роста штаммов культуры происходило изменение цвета реверзума. Наиболее пигментированными оказались штаммы C. еphemerus 49 и 245. Не только цвет, но и текстура колоний исследуемых культур очень отличалась в зависимости от штамма и состава питательной среды.

Литература:

1. Heleno S.A., Barros L., Martins A., Queiroz M.J., Santos-Buelga C., Ferreira I.C. Phenolic, polysaccharidic, and lipidic fractions of mushrooms from northeastern Portugal: chemical compounds with antioxidant properties // J Agric Food Chem. – 2012. − Vol. 60 (18). – P. 4634 − 4640.

2. Pettita G. R., Menga Y., Pettita R.K., Heralda D. L., Hogana F., Cichacza Zb. A. Antineoplastic agents 582. Isolation and structure of a cyclobutane-type sesquiterpene cancer cell growth inhibitor from Coprinus cinereus (Coprinaceae) // Bioorg Med Chem. – 2010. − Vol. 18 (14). – P. 4879-4883.

3. Pettita G. R., Mengа Y., Pettita R.K., Heralda D. L., Cichacza Zb. A., Doubek D. L., Richert L. Antineoplastic agents 556. Isolation and structure of coprinastatin 1 from Coprinus cinereus // J Nat Prod. – 2010. − Vol. 73, № 3. – P. 388 – 392.

4. Бадалян С. М., Кьюз У., Аветисян Г. К. Скрининг антиоксидантной активности некоторых коприноидных грибов // Успехи медицинской микологии. – 2005. – Т. 5. – С. 176 – 178.

5. Бадалян С.М., Аветисян Г.К., Кьюз У. Морфологические особенности и параметры роста мицелия некоторых коприноидных грибов // Успехи медицинской микологии. – 2007. – Т. 9. – С. 214 – 217.