Шинкаренко
В.М., Одринская Е.А.
Лабораторная диагностика урогенитального трихомониаза
В настоящее время отмечается рост заболеваемости инфекциями, передающимися преимущественно
половым путем, среди них одно из
ведущих мест занимает
урогенитальный трихомониаз. Учитывая,
что зараженность трихомонадами возрастает после наступления
половой зрелости и
основными носителями инфекции
являются женщины детородного
возраста, можно сказать,
что урогенитальный трихомониаз
является очень серьезной
медико-социальной
проблемой, так как
этой инфекцией ежегодно заболевают
около 170 миллионов
человек на планете.
Актуальность своевременной
диагностики трихомонадной инфекции
обусловлена не только ее широкой
распространенностью, но и
способностью негативно влиять
на репродуктивное здоровье
населения, а также
способствовать передаче других
инфекций передающихся половым
путем, включая ВИЧ-инфекцию.
Возбудителем мочеполового трихомониаза как у
мужчин, так и
у женщин является
влагалищная трихомонада – Trichomonas vaginalis. Она относится
к простейшим (Protozoa), классу
жгутиковых (Flagellata), роду
трихомонад (Trichomonas). У человека паразитируют 3 вида трихомонад: Trichomonas tenax (в полости рта), Trichomonas hominis
(в желудочно-кишечном тракте), (Trichomonas vaginalis (в мочеполовом тракте).
При попадании кишечных или ротовых трихомонад во влагалище или
уретру они быстро погибают, не вызывая
воспаления. В процессе эволюции Tr. vaginalis приобрели способность поражать исключительно
нижний отдел мочеполовых органов
человека.
Трихомонада
представляет собой одноклеточный микроорганизм сложного строения. Ее тело
чаще всего имеет грушевидную форму, но
может быть округлым или овальным, что
связано с реакцией среды обитания, наличием ингибирующих факторов. Особая
пластичность цитоплазмы позволяет клетке настолько изменять свою форму,
что трихомонада может проникать в очень узкие проходы. Размеры
трихомонад подвержены значительным колебаниям в зависимости от темпа
размножения, условий роста и особенностей штамма. Tr. vaginalis –
самая крупная из трихомонад человека. Ее длина колеблется от 5 до 30 мкм, а ширина – от 2 до 5 мкм и
более. Величина трихомонад зависит от стадии
инфекции: мелкие особи (8-11мкм) чаще находят при остром заболевании, крупные (30-45мкм) - при
хроническом. На переднем конце тела
трихомонады имеется пучок из четырех свободных жгутиков, отходящих от
блефаропластов, раcположенных под внешней оболочкой.
Трихомонады обладают активной подвижностью за счет движения свободных жгутиков
и индулирующей мембраны. В определенных условиях они образуют псевдоподии,
обеспечивающие амебовидное передвижение. Обычным способом размножения является
деление материнской клетки на две
дочерние особи. Иногда происходит деление на 8-24 клетки и более по типу
шизогонии. Множественное деление бывает
чаще при неблагоприятных условиях
обитания. Трихомонады не образуют цист или других форм устойчивости, обеспечивающих их сохранение
вне человеческого организма. Трихомонады могут существовать в различных формах.
Наряду с весьма подвижными жгутиковыми трихомонадами возникают малоподвижные,
перемещающиеся благодаря псевдоподиям крупные
амебовидные формы. Атипичные формы
трихомонад, как правило, не обладают активной подвижностью, и их
идентификация затруднена.
Устойчивостью вне человеческого организма трихомонады не отличаются. Они быстро
теряют жизнеспособность во внешней среде. От высушивания трихомонады погибают
за несколько секунд, на них губительно
действуют температуры выше 400 C, прямые
солнечные лучи, медленное
замораживание, различные антисептики.
Патогенные свойства присущи всем
штаммам трихомонад, хотя вирулентность их может быть различной, что
объясняет разную реакцию (от бессимптомного носительства до острого
воспаления) на внедрение паразитов.
Свойства
трихомонады:
-способность повторять рельеф эпителиальной клетки,
проникать между клетками в узкие щели и инвагировать в клетку хозяина;
-способность урогенитальных трихомонад фиксировать на
своей поверхности большие количества
антитрипсина, что обеспечивает защиту простейших от разрушительного
действия организма;
-вирулентность урогенитальных трихомонад, которая
находится в прямо пропорциональной зависимости от их гемолитической активности;
-заразность (развитие заболевания после полового
контакта с больным трихомониазом);
-наличие на поверхности трихомонад протеолитических
ферментов (гиалуронидаза, амилаза, каталаза);
-выраженный хемотаксис полиморфноядерных лейкоцитов (на поверхности трихомонад
имеется фибронектин-гликопротеид, способствующий прикреплению паразита к
лейкоцитам, эпителиальным клеткам, эритроцитам).
Несмотря
на давнюю и подробную изученность трихомонады, диагностика трихомониаза до сих
пор вызывает определенные трудности у медиков. Объясняется это тем, что
трихомониаз часто протекает длительно и бессимптомно, и без разнообразных
многократных лабораторных исследований в определенных случаях выявить его
невозможно.
Обязательным
условием для постановки диагноза является обнаружение в исследуемом материале
трихомонад.
Для
лабораторной диагностики трихомониаза
применяются следующие методы:
-микроскопия взятого материала (неокрашенный препарат);
-микроскопия окрашенного препарата (окрашивание
метиленовым синим или по Грамму, окрашивание по Романовскому-Гимза);
-культуральные;
-иммунологические;
-ПЦР.
Диагностика
трихомониаза начинается со световой микроскопии. Во время первого же осмотра врач берет так называемый общий мазок для
бактериоскопического исследования. У женщин для анализа берутся выделения с заднего свода влагалища, у мужчин – выделения из
мочеиспускательного канала и секрет предстательной железы. Этот анализ делается
немедленно – биение ресничек
трихомонады и высокая
подвижность этих овальных микроорганизмов хорошо заметны под
микроскопом. Результат этого исследования будет готов уже через 15-20 минут. Этот вид диагностики позволяет
установить общее количество микробов и степень выраженности воспалительной
реакции слизистой.
Преимуществом исследования
трихомонад в окрашенных
препаратах является возможность их исследования спустя длительное время
после взятия материала. В окрашенных препаратах трихомонады имеют овальную,
круглую или грушевидную форму с хорошо выраженными контурами и нежноячеистым
строением цитоплазмы. Информативность этого метода выше, так как определяются
не только подвижные формы, но и неподвижные.
При
отрицательных результатах исследования патологического материала трихомонады
могут быть обнаружены с помощью культивирования отделяемого из уретры,
влагалища, секрета простаты и спермы. К
культуральным методам Tr. vaginalis относятся следующие: выращивание трихомонад в
бульонной культуре, метод пластикового конверта, рост патогенна на клеточной культуре. Культуральный метод
имеет большую ценность при распознавании атипичных форм с целью диагностики
трихомониаза и при контроле лечения.
В
сомнительных случаях при диагностике урогенитального трихомониаза используется
метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ). Этот метод отличается быстротой
проведения анализа – результаты исследования будут готовы уже через 1-2 часа. ПИФ-метод основан на выявлении
антител к возбудителю инфекции. Кроме того иногда проводятся другие
иммунологические исследования, они более оправданы у трихомонадоносителя, но
трихомонадная инфекция не приводит к развитию стойкого иммунитета. Выявленные у
больных или переболевших трихомониазом
сывороточные антитела являются лишь признаками существующей или ранее
перенесенной инфекции, но не способны обеспечить иммунитет. Выявляются они в
течение года после перенесенного
заболевания.
Наиболее
точным методом на настоящий момент считается ДНК-диагностика (ПЦР). Точность
этого исследования составляет
около 95%, а делается анализ за 1-2 дня. Для проведения ДНК-диагностики из
биологического материала извлекается генетически уникальный кусочек ДНК микроба и исследуется в лаборатории. К
достоинствам ПЦР относится также то, что он позволяет точно выявить и
возбудителей, сопутствующих трихомониазу: это могут быть хламидии, микоплазмы,
уреаплазмы и другие микроорганизмы.
Наша
клинико-диагностическая лаборатория проводит диагностику трихомониаза методом
микроскопии окрашенного препарата. Выявляемость при данном методе составляет от
23,5 до 28%. Цитоморфологическое исследование окрашенного мазка соскоба по
нашему мнению является оптимальным алгоритмом лабораторной диагностики при
обследовании разных групп населения. В случаях бессимптомного носительства или
атипичных форм трихомонад необходимо
применять более чувствительные методы диагностики: культуральный, ИФА,
ПЦР-диагностика. Необходимо указать, что культуральный метод имеет большую
ценность именно при диагностике атипичных форм трихомонад и с целью контроля
при лечении. Но в настоящее время ПЦР-технология занимает первое место в
клинической лабораторной диагностике (обладает очень высокой чувствительностью
и специфичностью), так как происходит прямое определение возбудителя –
выявляется ДНК Tr. vaginalis.
Литература:
-Дмитриев Т.А., Сюч Н.И., Латыпова М.Ф., и др.
Лабораторная диагностика урогенитального трихомониаза, ИППП, 2001.
-Копылов В.М., Бокарев Е.Г., Говорун В.М. и др.
Урогенитальный трихомониаз: актуальные вопросы диагностики и лечения, М., 2001.
-Кейт Л.Г., Бергер Т.С., Эдельман Д.А. Репродуктивное
здоровье т.1 Общие инфекции, М., 1988.
-Машкиллейсон А.Л., Гомберг М.А., Соловьев А.М.
Заболевания передаваемые половым
путем, 1995.
-Херрингтон К.
С. Заболевания передаваемые половым путем, 1995.
-Скрипник
Ю.К., Гребенюк В.Н., Торопова Н.П. Современные аспекты детской и
подростковой дерматовенерологии, 1998.