Колосова
О.А., Мозуль В.И., Тржецинский С.Д., Фурса Н.С.
Воронежский
государственный университет
Запорожский
государственный медицинский университет
Ярославский государственный медицинский университет
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ анализ
гидроксикоричных кислот И ФЛАВОНОИДОВ цветков и листьев валерианы
лекарственной, выращенной в Воронежской области
Валериана лекарственная
(Valeriana officinalis L.s.l.)
– важное лекарственное растение. В научной медицине широко используют корневища
с корнями растения. Вместе с тем недостаточно изучена и не применяется
надземная часть, хотя в древности она находила применение в качестве
мочегонного средства, эффект которого, возможно, обусловлен разнообразным
набором флавоноидов и гидроксикоричных кислот [1 – 6].
Цель исследования –
проанализировать методами двумерной хроматографии на бумаге и высокоэффективной
жидкостной хроматографии состав фенольных соединений цветков и листьев
валерианы лекарственной, выращенной в Воронежской области, и провести их
количественное определение.
Для исследования
заготовлены образцы анализируемых органов валерианы лекарственной, выращенной в
п. Усачевка Воронежской области.
При анализе
гидроксикоричных кислот этанольных экстрактов цветков и листьев валерианы
методом двумерной хроматографии на бумаге в системе растворителей спирт
н-бутиловый – уксусная кислота – вода в соотношении 4:1:2 (первое направление)
и 2%-ный водный раствор уксусной кислоты (второе) нами отмечено наличие не
менее 7 – 10 веществ, среди которых в листьях доминировала хлорогеновая
кислота. При анализе флавоноидов двумерной хроматографией на бумаге с
использованием систем растворителей БУВ, 4:1:2 (первое направление) и 15%-ный
раствор уксусной кислоты (второе) обнаружили более разнообразный их набор в
цветках (не менее 10 гликозидов), чем в листьях (6). В продуктах кислотного
гидролиза экстракта цветков больше всего содержалось гликозидов апигенина и
лютеолина, в меньшей мере – гликозидов диосметина и в незначительных количествах – гликозидов кверцетина и
кемпферола; листьев – диосметина и лютеолина [2 – 4].
Кроме хроматографии на
бумаге, анализ гидроксикоричных кислот и флавоноидов цветков и листьев
валерианы нами проведен на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы
"Gilston" (Франция), модель 305, инжектор ручной,
модель Rheogyne 7125 США с последующей обработкой результатов
исследования с помощью программы Мультихром для "Windows". В качестве
неподвижной фазы использована металлическая колонка размером 4,6 × 250 мм
KROMASIL C 18, размер частиц 5
микрон; в качестве подвижной фазы – система метанол – вода – фосфорная кислота
концентрированная в соотношении 400:600:5. Анализ проведен при комнатной
температуре. Скорость подачи элюента равнялась 0,8 мл/мин. Продолжительность
анализа составила 60 минут. Детектирование осуществлено с помощью УФ –
детектора "Gilston" UV/VIS,
модель 151, при длине волны 254 мм.
Анализируемые вещества
экстрагировали 70%-ным спиртом этиловым. Для идентификации отдельных
компонентов использовали стандартные образцы фенольных соединений. По 20 мкл
анализируемых извлечений и растворов сравнения вводили в хроматограф и
хроматографировали в описанных выше
условиях.
В результате
хроматографирования извлечения цветков выявлено не менее 30 веществ, из них
идентифицировано 15, среди которых флавоны (лютеолин, апигенин,
лютеолин-7-глюкозид), флавонолы (кверцетин, кемпферол, рутин), флаван-3-олы
(эпикатехин), гидроксикоричные кислоты (феруловая – основной компонент
извлечения, хлорогеновая, неохлорогеновая, о-кумаровая, коричная), кумарины
(умбеллиферон) и др.; листьев – 15 веществ с преобладанием в сумме
гидроксикоричных кислот (хлорогеновой – основной компонент извлечения,
кофейной, коричной). В сравнении с кислотами доля флавоноидов
(дигидрокверцетина, апигенина, рутина, лютеолина-7-глюкозида) значительно
меньше.
При количественном
определении суммы флавоноидов методом дифференциальной спектрометрии по реакции
комплексообразования с алюминия хлоридом установлено, что их содержание в
цветках равнялось 3,37%, в листьях – 2,78%, в траве – 1,92%; суммы
гидроксикоричных кислот методом прямой спектрофотометрии в траве находилось в
пределах 0,34%.
Следовательно, впервые
проведено методами двумерной
хроматографии на бумаге и высокоэффективной жидкостной хроматографии
сравнительное изучение флавоноидов и гидроксикоричных кислот цветков и листьев
валерианы лекарственной, выращенной в Воронежской области, и отмечено, что
цветки более богаты анализируемыми соединениями.
Литература:
1.
Горбунов
Ю.Н. Валерианы флоры России и сопредельных государств. – М.: Наука, 2002. – 208
с.
2.
Корнiєвська
В.Г. Порiвняльне фармакогностичне дослiдження валерiани
пагоносноï та валерiани високоï:
автореф. дис. … канд. фармац. наук. – Львiв, 2001. – 21 с.
3.
Рыбальченко
А.С., Фурса Н.С., Литвиненко В.И. Состав флавоноидов – диагностический признак
надземной части Valeriana exalt
ata Mikan. и Valeriana nitida Kreyer//Растит.
ресурсы. – 1976. – Т. 12, вып. 3. – С. 397 - 410.
4.
Талашова
С.В. Фармакогностическое изучение, стандартизация и комплексная переработка
валерианы лекарственно: автореф. дис. ... канд. фармац. наук. – М. 1996. - 24
с.
5.
Фурса
Н.С. и др. Валериана в фитотерапии. – Томск: Изд-во научно – тех. лит-ры, 1998.
- 212 с.
6.
Фурса
Н.С. и др. Валерианотерапия нервно – психических болезней. – Запорожье: ИВЦ
с/х, 2000. – 348 с.