Колосова О.А., Мозуль В.И., Тржецинский С.Д., Фурса Н.С.

Воронежский государственный университет

Запорожский государственный медицинский университет

Ярославский государственный медицинский университет

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ анализ гидроксикоричных кислот И ФЛАВОНОИДОВ цветков и листьев валерианы лекарственной, выращенной в Воронежской области

Валериана лекарственная (Valeriana officinalis L.s.l.) – важное лекарственное растение. В научной медицине широко используют корневища с корнями растения. Вместе с тем недостаточно изучена и не применяется надземная часть, хотя в древности она находила применение в качестве мочегонного средства, эффект которого, возможно, обусловлен разнообразным набором флавоноидов и гидроксикоричных кислот [1 – 6].

Цель исследования – проанализировать методами двумерной хроматографии на бумаге и высокоэффективной жидкостной хроматографии состав фенольных соединений цветков и листьев валерианы лекарственной, выращенной в Воронежской области, и провести их количественное определение.

Для исследования заготовлены образцы анализируемых органов валерианы лекарственной, выращенной в п. Усачевка Воронежской области.

При анализе гидроксикоричных кислот этанольных экстрактов цветков и листьев валерианы методом двумерной хроматографии на бумаге в системе растворителей спирт н-бутиловый – уксусная кислота – вода в соотношении 4:1:2 (первое направление) и 2%-ный водный раствор уксусной кислоты (второе) нами отмечено наличие не менее 7 – 10 веществ, среди которых в листьях доминировала хлорогеновая кислота. При анализе флавоноидов двумерной хроматографией на бумаге с использованием систем растворителей БУВ, 4:1:2 (первое направление) и 15%-ный раствор уксусной кислоты (второе) обнаружили более разнообразный их набор в цветках (не менее 10 гликозидов), чем в листьях (6). В продуктах кислотного гидролиза экстракта цветков больше всего содержалось гликозидов апигенина и лютеолина, в меньшей мере – гликозидов диосметина и в незначительных  количествах – гликозидов кверцетина и кемпферола; листьев – диосметина и лютеолина [2 – 4].

Кроме хроматографии на бумаге, анализ гидроксикоричных кислот и флавоноидов цветков и листьев валерианы нами проведен на высокоэффективном жидкостном хроматографе фирмы "Gilston" (Франция), модель 305, инжектор ручной, модель Rheogyne 7125 США с последующей обработкой результатов исследования с помощью программы Мультихром для "Windows". В качестве неподвижной фазы использована металлическая колонка размером 4,6 × 250 мм KROMASIL C 18, размер частиц 5 микрон; в качестве подвижной фазы – система метанол – вода – фосфорная кислота концентрированная в соотношении 400:600:5. Анализ проведен при комнатной температуре. Скорость подачи элюента равнялась 0,8 мл/мин. Продолжительность анализа составила 60 минут. Детектирование осуществлено с помощью УФ – детектора "Gilston" UV/VIS, модель 151, при длине волны 254 мм.

Анализируемые вещества экстрагировали 70%-ным спиртом этиловым. Для идентификации отдельных компонентов использовали стандартные образцы фенольных соединений. По 20 мкл анализируемых извлечений и растворов сравнения вводили в хроматограф и хроматографировали в  описанных выше условиях.

В результате хроматографирования извлечения цветков выявлено не менее 30 веществ, из них идентифицировано 15, среди которых флавоны (лютеолин, апигенин, лютеолин-7-глюкозид), флавонолы (кверцетин, кемпферол, рутин), флаван-3-олы (эпикатехин), гидроксикоричные кислоты (феруловая – основной компонент извлечения, хлорогеновая, неохлорогеновая, о-кумаровая, коричная), кумарины (умбеллиферон) и др.; листьев – 15 веществ с преобладанием в сумме гидроксикоричных кислот (хлорогеновой – основной компонент извлечения, кофейной, коричной). В сравнении с кислотами доля флавоноидов (дигидрокверцетина, апигенина, рутина, лютеолина-7-глюкозида) значительно меньше.

При количественном определении суммы флавоноидов методом дифференциальной спектрометрии по реакции комплексообразования с алюминия хлоридом установлено, что их содержание в цветках равнялось 3,37%, в листьях – 2,78%, в траве – 1,92%; суммы гидроксикоричных кислот методом прямой спектрофотометрии в траве находилось в пределах 0,34%.

Следовательно, впервые проведено  методами двумерной хроматографии на бумаге и высокоэффективной жидкостной хроматографии сравнительное изучение флавоноидов и гидроксикоричных кислот цветков и листьев валерианы лекарственной, выращенной в Воронежской области, и отмечено, что цветки более богаты анализируемыми соединениями.

Литература:

1.                  Горбунов Ю.Н. Валерианы флоры России и сопредельных государств. – М.: Наука, 2002. – 208 с.

2.                  Корнiєвська В.Г. Порiвняльне фармакогностичне дослiдження валерiани пагоносноï та валерiани високоï: автореф. дис. … канд. фармац. наук. – Львiв, 2001. – 21 с.

3.                  Рыбальченко А.С., Фурса Н.С., Литвиненко В.И. Состав флавоноидов – диагностический признак надземной части Valeriana exalt ata Mikan. и Valeriana nitida Kreyer//Растит. ресурсы. – 1976. – Т. 12, вып. 3. – С. 397 - 410.

4.                  Талашова С.В. Фармакогностическое изучение, стандартизация и комплексная переработка валерианы лекарственно: автореф. дис. ... канд. фармац. наук. – М. 1996. - 24 с.

5.                  Фурса Н.С. и др. Валериана в фитотерапии. – Томск: Изд-во научно – тех. лит-ры, 1998. - 212 с.

6.                  Фурса Н.С. и др. Валерианотерапия нервно – психических болезней. – Запорожье: ИВЦ с/х, 2000. – 348 с.