Биологические науки/9 Биохимия и биофизика

 

Проф.  Муравлева Л.Е., проф. Синявский Ю.А., проф. Сарсенбаев Б.А., Позднякова Е.В.,  к.м.н. Клюев Д.А., Кенжебаева Ш., к.б.н. Мурсалиева В.К., Нам С.В., к.б.н. Сулейменова Ж.М.

Государственная медицинская академия, Караганда

Казахская академия питания,  Алматы

 

ВЛИЯНИЕ НЕСИММЕТРИЧНОГО ДИМЕТИЛГИДРАЗИНА НА ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ ГОЛОВНОГО МОЗГА РАСТУЩИХ ЖИВОТНЫХ, ПОЛУЧАЮЩИХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ДОБАВКИ НА ОСНОВЕ СТАХИСА И СТЕВИИ  

 

Ранее проведенными нами исследованиями было установлено, что однократное введение несимметричного диметилгидразина (НДМГ) индуцирует нарушение перекисного окисления липидов в гомогенатах головного мозга растущих животных.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния биологически активных добавок на основе стахиса и стевии на показатели перекисного окисления липидов головного мозга растущих животных при однократном введении НДМГ.

Эксперимент проводился на 100 белых крысах – отъемышах обоего пола с исходной массой 45 + 2 грамма. Животные были разделены на  6 групп. В каждую группу вошло по 10 самок и 10 самцов – отъемышей.

В первую группу вошли интактные животные: контроль. Животным второй группы однократно внутрибрюшинно вводили НДМГ в дозе 5 мг /кг. Животные третьей группы  ежедневно получали БАД на основе стевии. Животные четвертой группы ежедневно получали БАД на основе стахиса. Животным пятой и шестой групп однократно внутрибрюшинно вводили НДМГ в дозе 5 мг /кг. Животные пятой группы  ежедневно получали биологически активную добавку на основе стевии, животные шестой группы  ежедневно  получали биологически активную добавку на основе стахиса. Биологически активные добавки животные получали из расчета 2 г/кг массы тела. Срок эксперимента составил 30 суток.

Животных выводили из эксперимента методом неполной декапитации под легким эфирным наркозом [1]. Для приготовления гомогената головной мозг замораживали в жидком азоте.  Интенсивность ПОЛ оценивали по содержанию диеновых конъюгатов (ДК), кетодиенов (КД) [2], оснований Шиффа (ШО) [2], и малонового диальдегида (МДА)  [3]. Определение активности каталазы (КАТ) осуществляли по методу М.А. Королюк и соавт [4]. Результаты были обработаны методами вариационной статистики. Достоверность различий оценивали по критерию Стьюдента.

В таблице 1 представлены результаты исследования показателей ПОЛ в гомогенатах головного мозга самок и самцов  растущих животных на 30 сутки после однократного введения НДМГ.

Изучение  показателей ПОЛ в гомогенатах головного мозга растущих животных контрольной группы выявило определенные отличия между самками и самцами по таким параметрам как диеновые коньюгаты, кетодиены и оснований Шиффа. Содержание ДК, КД и, особенно, ШО в гомогенатах головного мозга самцов было выше, чем у самок.

 

Таблица 1. Показатели ПОЛ в гомогенатах головного мозга растущих животных на 30 сутки после однократного введения НДМГ (X + m)

Показатели, единицы измерения

Контроль

 

2 группа (однократное введение НДМГ)

Самцы растущих животных

ДК, М-6

12.1±0.4

18.3±1

КД, усл. ед

7 .8±0.7

21.5±2.0*

ШО, усл. ед

0.1±0.003

0.25±0.01*

МДА, нмоль

3,8±0.3

4.1±0.4

КАТ, нмоль/мин/г

34.1±0.06

34.3±0.4

Самки растущих животных

ДК, М-6

7.9±0.2

12±0.1*

КД, усл. ед

5.5±0.1

24.5±1*

ШО, усл. ед

0.04±0.01

0.71±0.02*

МДА, нмоль

3.6±0.22

4.1±0.2

КАТ, нмоль/мин/г

34±0.24

35.2±0.9

* достоверность различий по сравнению с контролем, p< 0.05 и ниже

 

На 30 сутки после однократного введения НДМГ в гомогенатах головного мозга самцов достоверно возрастало содержание КД  и  оснований Шиффа по сравнению с контролем. В гомогенатах головного мозга самок зафиксирован достоверный рост диеновых коньюгатов, кетодиенов и оснований Шиффа по сравнению с таковыми самок контрольной группы, соответственно, на 51%, в 4.5 раза и в 17.8 раза.  

В таблице 2 представлены результаты исследования показателей ПОЛ в гомогенатах головного мозга самок и самцов  основной группы, получающих БАД на основе стевии и стахиса. Обращает на себя внимание достоверное снижение  (в 3.3. раза) оснований Шиффа у самцов, получающих  стахис, по сравнению с группой контроля. У самцов, получавших стевию, не зафиксировано изменения содержания продуктов ПОЛ в гомогенатах головного мозга по сравнению с контролем.

 

Таблица 2. Показатели ПОЛ в гомогенатах головного мозга растущих животных, получавших БАД на основе стевии и стахиса (X + m)

 

Показатели, единицы измерения

Контроль

 

3 группа (БАД стевия)

 

3 группа (БАД стахия)

 

Самцы растущих животных

ДК, М-6

12.1±0.4

10.9±1,8

12,8±2,1

КД, усл. ед

7 .8±0.7

10.3±1.7

9,2±1,5

ШО, усл. ед

0.1±0.003

0,1±0,01

0,03±0,006*

МДА, нмоль

3,8±0.3

3,9±0,3

2,56±0,4

КАТ, нмоль/мин/г

34.1±0.06

33±7.0

34.4±6.0

Самки растущих животных

ДК, М-6

7.9±0.2

11.9±1,9

11.5±1,7

КД, усл. ед

5.5±0.1

11.8±1.9

10.2±1,7

ШО, усл. ед

0.04±0.01

0,09±0,0098

0,09±0,009

МДА, нмоль

3.6±0.22

2.16±0,3

3,8±0.9

КАТ, нмоль/мин/г

34±0.24

36.2±6

38±8

* достоверность различий по сравнению с контролем, p< 0.05 и ниже

         В гомогенатах головного мозга самок, получавших как стахис, так и стевию, зафиксирована отчетливая тенденция к увеличению содержания кетодиенов и оснований Шиффа.

         Полученные данные наглядно демонстрируют, что ежедневный прием БАД на основе стахиса и стевии приводят к определенным изменениям перекисного окисления липидов в гомогенатах головного мозга растущих животных обоего пола.

В таблице 3 представлены результаты исследования показателей ПОЛ в гомогенатах головного мозга самок и самцов на 30 сутки после однократного ведения НДМГ и  получающих БАД на основе стевии и стахиса. Применение как стевии, так и  лимитировало избыточное образование ДК и КД в гомогенатах головного мозга  самцов. У самок содержание ДК также не отличалось от контроля, тогда как уровень КД достоверно отличался от такового контроля в 2.9 раза. Активность каталазы в головном мозге самок основной группы, получавших стевию, была на 60% ниже таковой контроля.

Обращает на себя внимание снижение содержания оснований Шиффа в гомогенатах головного мозга самцов и самок основной группы, получавших стевию, ниже значений контроля. 

        

Таблица 3. Влияние однократного введения НДМГ на показатели ПОЛ в гомогенатах головного мозга растущих животных, получавших БАД на основе стевии и стахиса (X + m)

 

Показатели, единицы измерения

Контроль

N = 10

5 группа (НДМГ + БАД на основе стевии )

6 группа (НДМГ + БАД на основе стахиса)

Самцы растущих животных

ДК, М-6

12.1±0.4

11.2 ±1.8

10.5 ±1,7

КД, усл. ед

7 .8±0.7

10.8 ±1.8

13.8 ±2,3

ШО, усл. ед

0.1±0.003

0.03 ±0.006

0.02 ±0.003

МДА, нмоль

3,8±0.3

4 ±1.1

3,9 ±1.1

КАТ, нмоль/мин/г

34.1±0.06

31 ±3.1

34.8 ±2

Самки растущих животных

ДК, М-6

7.9±0.2

9,9 ±2,2

13.2 ±2.2

КД, усл. ед

5.5±0.1

16 ±2.6*

12.9 ±2.1

ШО, усл. ед

0.04±0.01

0.05 ±0.001

0.09 ±0.001*

МДА, нмоль

3.6±0.22

3,9 ±1.1

7.6 ±1.2*

КАТ, нмоль/мин/г

34±0.24

21 ±3.0*

35 ±3.0

* достоверность различий по сравнению с контролем, p< 0.05 и ниже

 

В гомогенатах головного мозга самок опытной группы, получавших стахис, прослеживалась отчетливая тенденция к увеличению содержания ДК и КД по сравнению с таковыми контроля. Также зафиксирован достоверный рост ШО (в 2.3 раза) и МДА (в 2 раза) по сравнению с контролем.

         Следовательно, полученные нами данные показали,  что БАД на основе стевии и стахиса оказывали лимитирующий эффект на показатели ПОЛ в головном мозге самцов растущих животных. В тоже время не было  зафиксировано однозначно позитивного влияния стахиса и стевии на процессы ПОЛ в гомогенатах головного мозга самок растущих животных.

         Таким образом, БАД на основе стахиса и стевии можно рассматривать как достаточно перспективные средства немедикаментозной коррекции метаболических нарушений, индуцированных НДМГ.

Литература

1.Стальная И.Д. Метод определения диеновой коньюгации ненасыщенных высших жирных кислот // Современные методы в биохимии – М., Медицина, 1977 – 63-64.

2. Спектрофотометрическое определение конечных продуктов перекисного окисления липидов  / Е.И. Львовская, И.А. Волчегорский, И.А., Шемяков Р.И.Лифшиц // Вопросы мед. химии. – 1991. - №4. – с.92-93.

3.Костюк В.А., Потапович А.М. Определение продуктов перекисного окисления липидов с помощью тиобарбитуровой кислоты в анаэробных условиях //Вопр. мед. химии – 1987.- № 3.- С. 115-118.

4.Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И.  Иванова, И.Г. Майорова и др  // Лаб. дело.–1988.–№1.– С.16-19.