К.м.н. Бутвиловский В.Э., д.м.н. Кухта В.К., к.б.н. Колб А.В.

Белорусский государственный медицинский университет, Беларусь

Активность лактатдегидрогеназы в сыворотке крови

при экспериментальном трихинеллезе

Трихинеллез является природно-очаговым заболеванием в Республике Беларусь.  В странах, где трихинеллез встречается ежегодно, заболеваемость составила 10 000 случаев,  при смертности 0,2%.

При трихинеллезе происходит деструкция поперечнополосатой мышечной ткани, где происходят стойкие изменения метаболизма и глубокие морфологические перестройки. Следствием этого является повышенная проницаемость плазматических мембран и активный выход ферментов из тканей в кровь.

Специфическим ферментом, регулирующим основные механизмы энергообеспечения мышц, является лактатдегидрогеназа (ЛДГ) (К.Ф. 1.1.1.27). Лактатдегидрогеназа катализирует обратимую реакцию превращения пирувата в лактат в заключительной реакции гликолитического пути расщепления глюкозы, регенерируя НАД⁺ и поддерживая непрерывное течение гликолиза:

пируват + НАДН ^. Н⁺ L лактат + НАД⁺

Величина активности цитозольных ферментов в сыворотке крови при трихинеллезе является маркером количества пораженных мышечных волокон и свидетельствует о тяжести патологического процесса. В доступной нам литературе имеются некоторые сведения об изменении активности ЛДГ при экспериментальном трихинеллезе, но они весьма противоречивы.

Целью настоящего исследования явилось изучение активности вышеуказанного фермента в сыворотке крови при экспериментальном трихинеллезе различной степени тяжести в динамике.

Материал и методы. Экспериментальная часть выполнена на белых крысах самцах линии Wistar, средней массой 200 г. Моделировали экспериментальный трихинеллез легкой степени тяжести пероральным заражением личинками Trichinella spiralis (Owen, 1835) лабораторного штамма в дозе 5 л/г (личинок на 1 г массы тела); трихинеллез средней степени тяжести - в дозе 20 личинок; трихинеллез тяжелого течения - в дозе 35 личинок на 1 г массы тела [3]. Животных умерщвляли декапитацией на 7-е, 14-е, 21-е, 30-е, 45-е, 60-е, 90-е сутки после заражения. Контрольные и опытные группы составляли по 7 животных на каждый срок инвазии. Следует отметить, что животные с трихинеллезом тяжелого течения погибали после 30-х суток инвазии из-за тяжести клинического течения.

Определение активности лактатдегидрогеназы проводили на автоматическом фотометре с использованием диагностических наборов Cormay LDH. Метод основан на регистрации убыли НАДН при его окислении в ходе прямой лактатдегидрогеназной реакции (Д. Вилкинсон, 1981) [2]. Цифровые результаты обработаны методом вариационной статистики на ПК с использованием программы Epistat.

Результаты и их обсуждение. Полученные данные представлены на рис.

Рис. Активность ЛДГ (Е/л) в сыворотке крови при экспериментальном трихинеллезе различной степени тяжести в % к контролю.

Установлено, что при экспериментальном трихинеллезе происходят значительные изменения активности ЛДГ в сыворотке крови [1]. При инвазии легкой степени тяжести отмечается увеличение активности фермента на протяжении всего эксперимента, статистически достоверное на 14-е, 30-е и 45-е сутки (P < 0,001). Максимальные значения определяются на 30-е сутки после заражения (125% от контрольных цифр). При трихинеллезе средней степени тяжести изменения активности фермента статистически достоверны на 7-21-е и 45-е сутки инвазии (P < 0,01-0,001). Увеличение активности ЛДГ имеет место с 7-х по 30-е сутки инвазии (максимум на 14-е сутки – до 129%), на 45-е сутки отмечается резкое уменьшение активности фермента до 78,7% с последующим возвращением к контрольным цифрам на 60-90-е сутки после заражения. При трихинеллезе тяжелого течения значительное (P < 0,001) увеличение активности ЛДГ в сыворотке крови определяется, начиная с 21-х и по 30-е сутки (максимум до 168,7% на 30-е сутки).

Таким образом, активность ферментов энергообеспечения в сыворотке крови совпадает с циклом развития паразита: пик повышения активности наблюдается на стадиях мигрирующих (14-е сутки), неинкапсулированных личинок (21-е сутки) и пропорциональна степени тяжести инвазионного процесса. Вероятно, увеличение активности фермента в сыворотке крови связано с выходом их из пораженных мышц через поврежденные плазматические мембраны.

Литература

1. Бутвиловский В. Э. Изучение активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови и мышечной ткани при экспериментальном трихинеллезе // Здравоохранение. – 1995. – № 11. – С. 25-27.

2. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: В 2 т. Т.2. – Мн.: Беларусь, 2000. – 463 с.: ил.

3. Способ моделирования трихинеллеза различных форм тяжести / Бекиш О.-Я.Л., Бурак И.И., Острейко Н.Н., Затворницкая В.В. // Современные меры борьбы с паразитарными заболеваниями сельскохозяйственных животных. Тез. докл. респ. научно-практич. конф.- Минск, 1980.– С. 17-18.