Медицина / 7. Клиническая медицина
Ельчанинова Т. И.
ГУ «Днепропетровская
медицинская академия МОЗ Украины» ФПО кафедра педиатрии и клинической
лабораторной диагностики
Методы
определения протромбинового времени.
Определение протромбинового
(тромбопластинового) времени – это вариант определения времени рекальцификации
плазмы с добавлением тканевого тромбопластина. В комплексе с фактором VII и Са++
он непосредственно активирует фактор X, так что результаты теста зависят
от активности фактора VII, фактора X и факторов включающихся в процесс
свертывания крови на этапах тромбино – и фибринообразования (фактор V, II, I).
Принцип метода заключается в определении
времени свертывания бедной тромбоцитами цитратной плазмы в присутствии
оптимального количества кальция и избытка тканевого тромбопластина.
Протромбиновое время применяется для контроля ситстемы гемостаза в ходе лечения
антикоагулянтами.
Варианты определения этого теста: 1. Ручной (метод определения
протромбинового времениплазмы по Квику,
1974 г.). этот показатель определяется по кривой зависимости
протромбинового времени от % содержания факторов протромбинового комплекса,
которая строится с использованием разных разведений контрольной плазмы. Такой
способ получения результатов является наиболее точным, особенно в области
низких значений. В зоне низких значений протромбин по Квику и протромбиновый
индекс не совпадают. Протромбиновый индекс 50 – 60 % может быть равным 30 – 40
% протромбина по Квику. Нормальные величины: 12 – 20 с. (в зависимости от
активности тромбопластина.). 2.
Метод определения протромбинового времени разведенной плазмы в соотношении 1:1.
нормальные величины: примерно также колеблются в зависимости от активности
тромбопластина. 3. Определение
протромбинового индекса. Этот показатель представляет собой отношение времени
свертывания плазмы донора к времени свертывания плазмы больного, выраженное в
процентах:
ПТИ
=
нормальное протромбиновое время / протромбиновое время больного ×
100
Нормальные величины: 80 – 110 %. Этот показатель в
области низких значений зависит от чувствительности используемых реактивов. 4. Согласно рекомендациям ВОЗ,
Международного комитета по изучению тромбозов и гемостаза, и Международного
комитета по стандартизации в гематологии в настоящее время результаты следует представлять
в виде Международного Нормализованного Отношения – МНО (International Normalized Ration
– INR).
МНО рассчитывается по формуле : INR (МНО)
= ПО мич (isi) , где ПО = протромбиновое
время пациента / нормальное среднее протромбиновое время. ISI (МИЧ)
– International Sensivity Index
of tromboplastin), или МИЧ (международный индекс чувствительности тромбопластина),
характеризующий активность используемого тромбопластина по отношению к
активности стандартного тромбопластина (ВОЗ, lot 67/40, лиофилизированный тромбопластин из мозга
человека). При этом, чем ниже МИЧ (ближе к 1,0), тем больше используемый
тромбопластин соответствует стандарту ВОЗ.
Также важно, что в знаменателе содержится
среднее значение протромбинового времени, полученное с помощью используемого
тромбопластина на нормальной контрольной плазме.
Значение этого среднего должно
устанавливаться как перед началом работы с новым реагентом тромбопластина, так
и ежедневно перед началом исследований.
Следует помнить, что установленная
величина среднего может не совпадать со значением (в сек.), указанного для
используемой нормальной контрольной плазмы, но не должна отклоняться от него
более, чем на 6 – 10 %.
МНО – это математическая коррекция. При
помощи МНО производится стандартизация протромбинового времени, которое
измеряют при помощи тромбопластинов, имеющих разную чувствительность.
Нормальнее величины: 0,9 – 1,15; на фоне
применения антикоагулянтов непрямого действия: 2,0 – 3,0 и более. 5. Ручной метод определения
протромбинового времени капиллярной крови. Применяется в основном для контроля
при лечении непрямыми антикоагулянтами, поскольку этот тест может проводиться
довольно часто и не требует венопункции. 6.
В педиатрической практике целесообразно применять микрометод определения
протромбинового времени (Б. Ф. Архипов, 1982).
При выполнении этой методики 0,09 мл крови
набирают при проколе пальца, смешивают с 0,01 мл 3,8 % раствора цитрата натрия.
Затем к 0,1 мл стабилизированной крови добавляют 0,1 мл смеси, состоящей из
равного количества (по 0,05 мл) тромбопластина и 0,277 % раствора хлорида
кальция. Время регистрируют в секундах. Коагуляционную активность в процентах
определяют по таблице 1.
Таблица 1.
Таблица перевода
протромбинового времени в показатели протромбинового индекса (по кривым
разведения)
|
Протромбиновое
время, сек. |
Показатели
при следующей исходной активности тромбопластина (%) |
|||
|
14 с |
16 с |
18 с |
20 с |
|
|
14 |
100 |
114 |
- |
- |
|
15 |
87 |
106 |
- |
- |
|
16 |
76 |
100 |
- |
- |
|
17 |
66 |
90 |
- |
- |
|
18 |
59 |
78 |
100 |
- |
|
19 |
52 |
69 |
90 |
- |
|
20 |
47 |
62 |
80 |
100 |
|
21 |
42 |
56 |
72 |
92 |
|
22 |
38 |
50 |
65 |
83 |
|
23 |
35 |
46 |
60 |
76 |
|
24 |
32 |
42 |
54 |
69 |
|
25 |
29 |
38 |
49 |
62 |
|
26 |
27 |
35 |
45 |
58 |
|
27 |
24 |
32 |
42 |
53 |
|
28 |
22 |
29 |
38 |
48 |
|
29 |
21 |
27 |
35 |
45 |
|
30 |
19 |
25 |
33 |
41 |
|
31 |
17 |
24 |
30 |
39 |
|
32 |
15 |
22 |
29 |
37 |
|
33 |
13 |
20 |
27 |
34 |
|
34 |
11 |
19 |
25 |
31 |
|
35 |
10 |
17 |
23 |
30 |
|
36 |
- |
15 |
22 |
28 |
|
37 |
9 |
13 |
21 |
26 |
|
38 |
- |
11 |
19 |
24 |
|
39 |
8 |
10 |
18 |
22 |
|
40 |
- |
- |
16 |
21 |
|
41 |
- |
9 |
13 |
20 |
|
42 |
7 |
- |
12 |
19 |
|
43 |
- |
- |
11 |
17 |
|
44 |
- |
8 |
10 |
16 |
|
45 |
6 |
- |
- |
15 |
|
46 |
- |
7 |
9 |
14 |
Причины ошибок:
- неправильное или недостаточное
тестирование тромбопластина:
- использование тромбопластина активностью
более 20 сек.;
- плохая стабилизация крови (образование
микросгустков);
- неправильное соотношение крови и
стабилизатора;
- использование крови, полученной из вены
пуповины.
В настоящее время не рекомендуется в
рутинной лабораторной практике использовать протромбиновое время и
протромбиновый индекс, так как они не позволяют стандартизировать исследование
и сравнивать результаты, полученные в разных лабораториях.
Литература:
1. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и
контролируемая терапия нарушений гемостаза..
Москва.: Ньюдиамед, 2008, 289 с.
2. Под ред.
Меньшикова В.В. Методики клинических лабораторных исследований. Т. 1-3. М.
«Лабора». М. 2009, ĪĪĪ.
3. Б. И. Кузник. - Клеточные и молекулярные механизмы
регуляции системы гемостаза в норме и при патологии. -Чита, 2010. -с. 827.
4. В С. Камышников. – Методы клинических
лабораторных исследований. «Москва, Мед. пресс – информ» 2011,
- с. 751.
5. Б. И. Кузник. – Геморрагические и тромботические
заболевания и синдромы у детей: патогенез, клиника, диагностика, терапия и
профилактика / Б. И. Кузник, В. Г. Стуров, О. Г. Максимова. – Новосибирск:
Наука, 2012. – 456 с., [2,1] л.