Тржецинский С. Д., Мозуль В.И., Денисенко О.Н., Фурса Н.С.,

Киниченко А.А., Цыкало Т.А.

Запорожский государственный медицинский университет

Portulaca grandiflora Hook. – перспективный источник биологически активных веществ

 

Портулак крупноцветковый – Portulaca grandiflora Hook. относится к семейству портулаковые, включающему как многолетние, так и однолетние травы.

Растение с зелеными сочными цилиндрическими листьями длинной 12-35 мм и шириной 1-4 мм. Цветки крупные до 4 сантиметров в диаметре, самых разнообразных расцветок — красные, сиреневые, лиловые, фиолетовые, желтые, оранжевые, белые. Лепестки обратнояйцевидные, глубоковыемчатые. Плод – многосемянная коробочка 4-6 мм в диаметре. Семена мелкие, блестящие [2].

Растение широко культивируется в Филиппинах, Аргентине, Бразилии, странах Европы и Азии [3].

В народной медицине трава портулака применяется как мочегонное, антимикробное, гипохолестеринемическое, противогрибковое, гипогликемическое средство [2].

Химический состав портулака крупноцветкового недостаточно изучен. Поэтому целью нашей работы явилось изучение химического состава флавоноидов и карбоновых кислот в надземной части портулака крупноцветкового.

Карбоновые кислоты играют важную роль в обмене веществ организма человека, регулируют выделение желчи и панкреатического сока, улучшают аппетит и являются продуктами превращения белков, жиров и углеводов. Органические кислоты обладают антиоксидантной, противовоспалительной, жаропонижающей, потогонной, иммуномодулирующей активностью [1].

Учитывая, что флавоноиды обладают бактерицидным, спазмолитическим, гипотензивным действием, представляется перспективным вопрос изучениия качественного и количественного содержания флавоноидов в траве портулака крупноцветкового.

Материалы и методы исследования

Траву портулака крупноцветкового заготавливали в период массового цветения в городе Запорожье. Сушку проводили в сушильном шкафу при температуре 30-40°С. Сырье приобретало характерный сильный запах.

Идентификацию флавоноидов в траве портулака крупноцветкового определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Определение проводили с помощью прибора LC: Agilent 1260 Infinity HPLC System (дегазатор, бинарный насос, автосамплер, термостат колонки, диодно-матричный детектор). Колонка Zorbax SB C18 – 4,6х30 мм, 1,8 мкм з предколонкой. Объем инжекции 10 мкл. Температура термостата колонки 400С. Длинна волны на диодно-матричному детекторе – 340 нм. Скорость элюента 1 мл/мин. Элюент: А (H2O; 0,1% HCOOH); В (CH3CN; 0,1% HCOOH). Градиентный режим элюирования: 0 мин – 5 % B; 25 мин – 65% B.

Количественное определение суммы флавоноидов проводили спектрофотометрическим методом при длине волны 340 нм в пересчете на кверцетин.

Качественный состав и количественное содержание (мг/кг) органических кислот определяли методом хромато-масс-спектрометрическим методом на хроматографе Agilent Technologies 6890 с масс-спектрометрическим детектором 5973. Хроматографическая колонка – капиллярная DB-5 с внутренним диаметром 0,25 мм и длинной 30 м. Скорость введения пробы составляет 1,2 мл/мин на протяжении 0,2 минуты. Скорость газа-носителя (гелия) – 1,2 мл/мин. Температура нагревателя введения пробы - 250°С. Температура термостата программирована от 50°С до 320°С со скоростью 4град/мин. Для идентификации компонентов полученные спектры рассматривали путем сравнения полученных результатов с данными библиотек масс-спектров NIST05 и WILEY 2007 с общим количеством спектров более 470000 совместно с программами для идентификации AMDIS и NIST. Для количественных расчетов использовали метод внутреннего стандарта [4].

Результаты исследования

Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в траве портулака крупноцветкового идентифицировано кверцетин. Сумма флавоноидов в пересчете на кверцетин составляет 0,91±0,02%.

В результате хромато-масс-спектрометрического исследования в траве портулака крупноцветкового идентифицировано 18 органических кислот (таблица 1, рис. 1). В наибольшем количестве найдено лимонную (7515,93 мг/кг), щавелевую (5748,41 мг/кг), яблочную (4667,90 мг/кг) и левулиновую (4369,28 мг/кг) кислоты. В наименьшем количестве найдено фенилуксусную (12,07 мг/кг), бензойную (19,90 мг/кг)  и п-оксибензойную (36,17 мг/кг) кислоты.

Таблица 1. Содержание органических кислот в траве портулака крупноцветкового, мг/кг

№ п/п

Время удерживания

Название кислоты

Содержание компонента в мг/кг

1

6,035

капроновая кислота

38,84

2

22,174

2-окси-3-метилглютаровая кислота

29,44

3

11,302

щавелевая кислота

5748,41

4

13,156

малоновая кислота

420,26

5

14,032

фумаровая кислота

328,32

6

15,027

левулиновая кислота

4369,28

7

15,221

янтарная кислота

448,95

8

15,714

бензойная кислота

19,90

9

18,96

фенилуксусная кислота

12,07

10

19,127

салициловая кислота

53,13

11

23,953

яблочная кислота

4667,90

12

26,27

азелаиновая кислота

107,52

13

31,629

лимонная кислота

7515,93

14

34,121

ванилиновая кислота

93,88

15

39,22

п-оксибензойная кислота

36,17

16

39,546

сиреневая кислота

37,19

17

40,013

гентизиновая кислота

37,94

18

42,365

феруловая кислота

372,22

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


Рис. 1. Хроматограмма карбоновых кислот травы портулака крупноцветкового

         Выводы

         В траве портулака крупноцветкового методом высокоэффективной жидкостной хроматографии идентифицировано кверцетин       и методом хромато-масс-спектрометрии идентифицировано 18 органических кислот. В наибольшем количестве найдено лимонную, щавелевую и яблочную кислоты.

         Дальнейшее фитохимическое изучение биологически активных соединений портулака крупноцветкового открывает перспективы для создания новых лекарственных фитопрепаратов.

Литература:

1.     Идентификация органических кислот методом ТСХ в извлечениях из растительных объектов / О.В. Тринеева, И.И. Сафонова, Е.Ф. Сафонова, А.И. Сливкин // Сорбционные и хроматографические процессы. – 2013. – Т. 13. – Вып. 6. – С. 896-901.

2.     Польза и вред [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://polzaverd.ru/jagody/portulak-poleznye-svojstva.html

3.     Сообщество о мире растений и людей [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.botanichka.ru/blog/2010/03/31/portulaca/

4.     Bicchi C./ Direct resistively heated column gas chromatography (Ultrafast module-GC) for highspeed analysis of essential oils of differing complexities / C. Bicchi, C. Brunelli, C. Cordero [et al.] // J. Chromatogr. A. — 2004. — Vol. 1024, № 1-2. — P. 195-207.