В.П. Калиман

Харьковский национальный медицинский университет, Харьков, Украина

Молекулы средней массы

как показатель эндотоксикоза у больных сахарным диабетом

Определение уровня эндогенной интоксикации и его динамика имеет принципиальное значение для определения тактики лечения различных патофизиологических состояний. В настоящее время, в качестве диагностики эндогенной интоксикации используют показатель уровня среднемолекулярных пептидов (молекул средней массы). Повышение уровня молекул средней массы в крови обусловлено нарушением их элиминации из организма – усилением образования их в тканях, либо сочетанием обоих механизмов. Актуальным в этом аспекте представляется поиск новых высокоинформативных интегральных тестов диагностики эндогенной интоксикации у больных сахарным диабетом Ι и ΙΙ типов.

Цель работы. Изучить содержание молекул средней массы у больных сахарным диабетом Ι и ΙΙ типов.

Материалы и методы. Под наблюдением находилось 27 больных сахарным диабетом Ι и ΙΙ типов. В контрольную группу входило 10 практически здоровых людей аналогичного возраста и пола. Было установлено, что диагноз «Сахарный диабет» был поставлен всем обследованным больным более 9-ти лет назад. Помимо стандартного клинического обследования определялись молекулы средней массы путем обнаружения их в ультрафиолетовой области спектра (188-300 нм). Суть метода состоит в осаждении высокомолекулярных белков трихлоруксусной кислотой и регистрации спектральной характеристики супернатанта в зоне длин волн от 238 до 300 нм. В дальнейшем проводился анализ формы спектрофотометрической кривой и вычислялся суммарный индекс токсичности, представляющий собой площадь фигуры, ограниченной этой кривой и осью абсцисс.

Глюкоза крови определялась глюкозоксидазным методом на колориметрических наборах компании HUMAN GmbH. Суть метода заключается в том, что в ходе окисления глюкозы глюкозоксидазой образуется перекись водорода, которая взаимодействует с фенолом и 4-аминофеназоном (в присутствии пероксидазы) с образованием красно-фиолетового хинонимина, по количеству которого и судят о количестве глюкозы в образце.

Триглицериды определялись ферментным методом на колориметрических наборах компании HUMAN GmbH. Принцип метода состоял в том, что триглицериды определяются после их ферментативного гидролиза липазами по количеству хинонимина, образующегося из 4-аминоантипирина, 4-хлорфенола и перекиси водорода под влиянием пероксидазы.

Холестерин определялся колориметрическим ферментативным методом. Принцип метода заключался в том, что холестерин определяется после его ферментативного гидролиза и окисления. Индикаторное вещество, по которому определяется холестерин – хинонимин, он образуется из перекиси водорода и 4-аминофеназона в присутствии фенола и пероксидазы.

Липопротеиды высокой плотности определяли преципитирующим реагентом и стандартом пероксидазным методом. Принцип метода заключался в том, что хиломикроны (липопротеиды очень низкой плотности и липопротеиды низкой плотности) осаждаются добавлением фосфорномолибденовой кислоты и хлорида магния. После центрифугирования в супернатанте остаются липопротеиды высокой плотности, количество которых определяется с помощью набора CHOLESTEROL liquicolor.

Липопротеиды низкой плотности определялись ферментативным цветным тестом, который состоял из двух этапов. Первый этап – хиломикроны, липопротеиды высокой плотности и липопротеиды очень низкой плотности направленно удаляются с помощью ферментативных реакций. Второй этап – оставшиеся липопротеиды низкой плотности (LDL) определяются с помощью известных ферментативных реакций с применением LDL-специфических суфрактантов (поверхностно-активных веществ). Благодаря наличию этих двух этапов данный тест является более LDL-специфическим, чем другие методы.

Полученные результаты и их обсуждение. При анализе полученных результатов было обнаружено, что в группе больных сахарным диабетом Ι-го и ΙΙ-го типа фиксировалось значительное повышение содержания молекул средней массы (М = 0,490 ± 0,07) по сравнению с контрольной группой условно здоровых людей (М = 0,180 ± 0,016).

Особенно эта тенденция прослеживалась в группе больных сахарным диабетом Ι и ΙΙ типов с выраженными дислипидемическими нарушениями (М = 0,532 ± 0,022).

У больных сахарным диабетом только с повышенным уровнем глюкозы крови без значительных изменений в липопротеинограммах наблюдалось несколько сниженная концентрация молекул средней массы (М = 0,440 ± 0,017), но достоверно высокая по сравнению с контрольной группой условно здоровых людей (М = 0,180 ± 0,016).

После прохождения комплексной терапии у всех больных сахарным диабетом Ι-го и ΙΙ-го типа отмечалась тенденция по снижению концентрации молекул средней массы.

Особенно выражено и достоверно (Р<0,05) эта тенденция наблюдалась у больных сахарным диабетом, у которых показатели липидного и углеводного обмена, после проведенной комплексной терапии, приближались к целевым значениям. Содержание молекул средней массы у таких больных сахарным диабетом составляло (М = 0,310 ± 0,01).

Выводы. У больных сахарным диабетом Ι и ΙΙ типов определяется значительное повышение концентрации молекул средней массы, что может служить прогностически неблагоприятным показателем по развитию фенотипа заболевания, так как продукты деградации биополимеров и их комплексов могут оказывать выраженное мембранно-токсическое действие.

При нормализации углеводного и, особенно, липидного обменов у больных сахарным диабетом Ι и ΙΙ типов отмечается достоверное (Р<0,05) снижение концентрации молекул средней массы.