К.б.н. Погосян Г.П., Коновалова А.А., Царегородцева О.

Карагандинский государственный университета имени Е.А. Букетова

Определение вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска

Вирус папилломы человека (ВПЧ) относится к подгруппе А семейства паповирусов (Papoviridae). В настоящее время выявлено более 60 типов ВПЧ, специфичных по тропности к различным тканям [1]. Для аногенитальной области специфичны 14 типов ВПЧ высокой степени онкогенного риска [2]. ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 36, 39, 45, 52, 56, 58, 59, 66, проникая в переходную зону шейки матки, вызывают цервикальную интраэпителиальную неоплазию I, II, III степени и карциному. Учитывая высокую канцерогенную опасность вируса папилломы человека, задачей настоящей работы явилось определение распространенности указанного вируса у населения Карагандинской области. Для этого в период с 5.01.15 по 16.04.15 г. проводили скрининговые исследования. Из 246 образцов мазков и соскобов выделяли ДНК, ставили реакции амплификации с целью обнаружения типов ВПЧ ВКР. Тест-система «АмплиСенс ВПЧ генотип- EPh» выявляет 12 генотипов.

Все эксперименты проводили, используя следующие виды контролей: отрицательный контрольный образец (ОКО) для исключения ложноположительных результатов; внутренний контрольный образец (ВКО) для исключения ложноотрицательных результатов; положительный контрольный образец для ориентира положительных результатов.

Кроме того, при детекции продуктов амплификации с помощью флуоресцентного анализа, использовали пробирку «фон» для сравнения уровня свечения в контрольных и опытных образцах.

Протокол одного из экспериментов, включающий анализ 19 образцов, представлен на рисунке.

Рисунок. Протокол флуоресцентного анализа образцов на наличие вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска.

1 – фон.

2 – 21 – образцы ДНК.

22 – положительный контрольный образец «К+».

23 – отрицательный контрольный образец «К-».

Из рисунка видно, что в образцах №№ 2, 6, 7, 9, 11, 14, 15, 17, 18, 19, 21 выявляется вирус папилломы человека высокого канцерогенного риска. Флуоресценцию определяли по двум каналам, как рекомендовалось инструкцией. Это объясняется тем, что каждый из каналов выявлял различные генотипы ВПЧ ВКР. Из данного эксперимента следует, что в образцах № 2, 17 и 21 выявляется как минимум два генотипа, поскольку амплифицированные фрагменты ДНК ВПЧ обнаруживаются как в столбце под номером 1, так и 3.

Из 246 проб в 72 образцах была обнаружена ДНК вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска, что составило 29%.

Учитывая тот факт, что некоторые генотипы ВПЧ ВКР вызывают онкологические заболевания у женщин, не причиняя особого вреда мужчинам, задались целью определить процент носительства этого вируса в лиц различного пола.

При анализе распределения полученных результатов у представителей мужского и женского пола выявили, что из 141 обследованных женщин ДНК ВПЧ ВКР обнаружили у 42 (30 %). У лиц мужского пола данный показатель составил 20 из 105, что составило 19%.

Большая распространенность вируса папиллому человека у лиц мужского пола согласуется с литературными данными [3]. Однако можно отметить, что процент положительных результатов несколько ниже, чем обнаружен другими авторами. Так, в исследованиях Бурьяка Д.В., Михалевича С.И., этот показатель составил 40-50% [4]. Однако потенциальные последствия ВПЧ у лиц обоего пола различны. У мужчин папилломовирусная инфекция способствует образованию бородавок, папиллом и остроконечных кондилом кожных покровов и слизистых оболочек анальной и урогенитальной области, в то время как у женщин, помимо вышеперечисленного, серотипы высокого канцерогенного риска повышают возможность развития рака шейки матки (в 70% случаев) [2].

Мониторинг распространения ВПЧ ВКР среди женского населения имеет особое значение, поскольку позволит диагностировать субклинические и латентные формы инфекции и выявлять группы риска по онкозаболеваниям урогенитальных органов.

Таким образом, результаты настоящего исследования позволили определить распространенность вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска, методом ПЦР, составившая 29%, а также распределить распределение этого вируса у лиц обоего пола, проживающих в Карагандинской области.

Литература

1. Медицинская микробиология / под редакцией В.И. Покровского. М: ГОЭТАР МЕДИЦИНА, 1998, 1184 с.

2. Дмитриев Г.А., Биткина О. А. Папилломавирусная инфекция. М.: Медицинская книга, 2006. 76с

3. Дубинский В.В. Урогенитальная папилломавирусная инфекция (обзор литературы) // Российский журнал кожных и венерических болезней, 2000. № 5, С. 50-55.

4. Бурьяк Д.В., Михалевич С.И. Папилломавирусная инфекция в гинекологии: современное состояние проблемы // Медицинские новости, 2008, №2, С. 7-9.