Коновалова А.А., Погосян Г.П., Кабиева Д.К.

Карагандинский государственный университета имени Е.А. Букетова

Определение распространенности ДНК цитомегаловируса в Карагандинской области

Распространенность цитомегаловирусной инфекции вызывает тревогу в связи с серьезными негативными последствиями. Возбудитель вызывает инфекции урогенительного тракта, является причиной заболеваний, в том числе у пациентов младшего возраста. Проблема диагностики и лечения данного заболевания является актуальной в настоящее время [1].

Задачей настоящей работы было определение распространенности вирусного инфекционного агента у населения Карагандинской области цитомегаловируса. Клинический материал предоставлялся лабораторией ДНК-диагностики «Здравницы Дипнера».

Скрининговые исследования проводили с пробами мазков, соскобов влагалища, цервикального канала, уретры у женщин, сока простаты, мазков и соскобов уретры – у мужчин. С целью выявления указанного вируса выделяли ДНК из биологического материала с помощью набора реагентов «ДНК-сорб-АМ». С полученными образцами ставили реакции амплификации, используя специфические праймеры. По окончании полимеразой цепной реакции проводили детекцию полученных фрагментов ДНК флуоресцентным методом анализа, используя прибор «АЛА-1/4». Выявляли количество положительных образцов с помощью детекции амплифицированных фрагментов ДНК ЦМВ. В каждом эксперименте использовали три вида контролей:

- внутренний контрольный образец для исключения ложноотрицательных результатов;

- отрицательный контрольный образец для исключения ложноположительных результатов;

- положительный контрольный образец для ориентира положительных результатов;

Кроме того, при детекции продуктов амплификации с помощью флуоресцентного анализа использовали пробирку «фон» для сравнения уровня свечения в контрольных и опытных образцах.

Исследования проводили с 5 января по 17 апреля 2015 года. За время выполнения настоящего исследования изучили 353 проб биологического материала. ДНК цитомегаловируса была выявлена в 64 из них, что составило 18%.

Протокол одного из исследований, включающий анализ образцов, представлен на рисунке.

Как видно из данного протокола ни у одного из протестированных образцов ДНК цитомегаловируса не обнаружена. Использование всех видов контролей позволяет судить о достоверности исследований.

Результаты исследований, полученные в настоящей работе, согласуются с некоторыми литературными данными [2].

В целом распространенность цитомегаловируса умеренная. Процент положительных результатов от общего количества исследованных образцов ниже, чем в других странах по данным литературных источников, согласно которым носителями ЦМВ являются 25-95% населения [3].

1 – фон

2-30 – тестируемые образцы

31 – положительный контрольный образец (К+)

32 – отрицательный контрольный образец (К-)

После проведения скрининговых исследований выделили две возрастные группы для выяснения лиц, больше подверженных цитомегаловирусной инфекции: группу лиц репродуктивного возраста, включающую пациентов от 18 до 65 лет и группу детского возраста (от 1 года до 12 лет). Такое разделение объясняется тем, что данный инфекционный агент передается не только половым путем, но и в периоды беременности и кормления грудью, что и является причиной последствий этой инфекции в разных возрастных группах. Кроме того, руководствовались данными о большом количестве негативных явлений у пациентов детского возраста.

Результаты исследований определили, что 353 исследованных клинических образца распределились по возрасту следующим образом: 295 (83%) – взрослые, (в том числе 132 образцов – мужчины, что составляет 37%, 163 – женщины, 46%), 58 - дети (17%). Дети представляли самую малочисленную группу. Несмотря на это, количество выявленных положительных результатов у них оказалось значительно выше. Положительные результаты у детей встречаются в 4 раза чаще, чем у женщин и, практически в 8,5 раз чаще, чем у мужчин.

Исследование проводили с использованием тест-системы «АмплиСенс CMV - FL».

Таким образом, результаты скрининговых исследований показали достаточно высокую распространенность цитомегаловируса у населения Карагандинской области.

Литература

1. Шульженко, А. Е. Современные подходы к диагностике и лечению герпесвирусных инфекций // Лечащий врач, 2007, № 5, С. 52-55.

2. Ершов Ф.И., Касьянова Н.В. Цитомегаловирусная инфекция (современные данные об эпидемиологии, клинике, диагностике и терапии) // Инфекции и антимикробная терапия, 2002, Т. 4, № 4, С. 36-39.

3. Emery V.C. Cytomegalovirus infection. London: Current Medicine Group Ltd, 2006, 63 p.