Токсанбаев Р.Д¹., Карабалин. С.К²., Паренова Р.А¹., Елемес.П.Ж².

АО «Научный центр противоинфекционных препаратов» г. Алматы, Казахстан

Казахский медицинский университет непрерывного образования, г. Алматы, Казахстан

ВОПРОСЫ УПРАВЛЕНИЯ КАЧЕСТВОМ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ ПО ДАННЫМ ИФА

На сегодняшний момент в мире насчитывается более 300 млн. человек инфицированных вирусом гепатита В и около 200 млн. вирусом гепатита С. Данные особенности вирусных гепатитов обосновывают необходимость четкой и достоверной лабораторной диагностики.

В повседневной современной практике для выявления специфических маркеров вирусных гепатитов применяется метод ИФА.

С целью исключения некорректных результатов метода ИФА, была разработана цельная система контроля качества, охватывающая все этапы проведения исследования и включающая мероприятия по внутри лабораторному контролю качества, а также внешнюю оценку качества исследований [1 - 4].

Управление качеством и эффективностью лабораторной диагностики гепатита В может осуществляться двумя способами. Первый – контроль качества чувствительности и специфичности тест-систем с помощью стандартных образцов.

При постановке ИФА возможны неспецифические реакции в результате взаимодействия коньюгата с анализируемым антигеном (HBsAg). Для исключения таких неспецифических взаимодействий (ложноположительных результатов) используется конфирматорный тест. Данный тест, подтверждающий специфичность реакций, предусмотрен для тест-систем, предназначенных для выявления HBsAg.

Существующий подход позволяет управлять качеством достоверного выявления каждого исследуемого случая острого или хронического гепатита В. Однако, если учесть многоликий характер течения гепатита В от бессимптомного до острого, то возникает необходимость подключения второго пути управления качеством и эффективностью лабораторной диагностики гепатита В, который заключается в обеспечении максимально полного количественного обнаружения, учета и регистрации случаев любых проявлений гепатита В на данный момент или любой отрезок времени.

В настоящей работе рассмотрены возможности управления качеством и эффективностью маркерной диагностики случаев гепатита В.

Материалы и методы

В работе исследовали сыворотки здоровых людей, больных гепатитом В при острой, хронической, манифестной, субклинической и бессимптомной инфекции а также переболевших острым гепатитом В.

Исследование сывороток проводили методом ИФА на наличие маркеров: HBsAg, анти-HBc IgM, анти- HBc IgG. Использовали соответствующие тест – наборы для ИФА от фирмы «Ветор-Бест» (Новосибирск) и оборудование фирмы “Bio-Tech instruments Inc.” (США).

Постановку реакций ИФА, а также учет результатов, проводили согласно рекомендациям фирм-изготовителей.

Статистическую обработку результатов проводили по общепринятой методике [5]. При статистической обработке для всех серий результатов находили средние и их средние ошибки с помощью программного обеспечения Microsoft Excel (Microsoft Office 2007, США).

Результаты и обсуждение

Результаты исследования сывороток 528 здоровых взрослых лиц на наличие в них HBsAg приведены в таблице 1.

Таблица 1 – Выявление HBsAg в сыворотках здоровых лиц

Количество сывороток	Выявлено HBsAg (абс., M ± m%)
	Диагностический ИФА	Подтверждающий ИФА
528	26 (4,9 ± 1,65)	17 (3,2 ± 1,36)

Из данных представленных в таблице видно, что при проведении диагностического ИФА 528 сывороток, в 26 (5%) был обнаружен маркер HBsAg. При последующем исследовании этих 26 позитивных проб в конфирматорном (подтверждающем) ИФА-тесте HBsAg был выявлен в 17 (3,2%) сыворотках.

Полученный результат свидетельствует о том, что носителями вируса гепатита В (HBsAg) среди обследованных 528 человек являются лишь 17. Эти данные свидетельствуют о снижении HBsAg-носительства среди населения с 8% в 1997-1998 гг. [5] до 3,2 в 2014 г. за счет проводимой в республике вакцинации против вируса гепатита В.

Обычно на маркеры гепатита В исследуют сыворотки больных, направленных для подтверждения клинического диагноза. В то же время существует большая группа лиц со стертыми, субклиническими проявлениями вируса гепатита В, которые не обследуются, т.к. они не обращаются к врачам, или выявляются при случайном обследовании.

Нами проведены исследования на наличие HBsAg и анти HBc IgM, IgG в сыворотках 765 человек с субклиническими проявлениями гепатита (таблица 2).

Таблица 2 – Выявление случаев острого и хронического гепатита В у лиц с субклиническими проявлениями заболевания

Количество сывороток	Острый гепатит В, анти HBc IgM позитивные (абс., M ± m%)	Хронический гепатит В, HBsAg позитивные (абс., M ± m%)	Переболевшие, анти-HBc IgG позитивные (абс., M ± m%)
765	95 (12,4 ± 1,72)	124 (16,2 ± 1,9)	144 (18,8 ± 2,03)

Как следует из данных представленных в таблице 2, при исследовании 765 сывороток лиц с субклинической формой гепатита В у 95 лиц (12,4%) обнаружены случаи острого гепатита В, у 124 (16,2%) обследованных выявлен лишь HBsAg, что свидетельствует о хроническом гепатите В и у 144 (18,8%) лиц обнаружен HBc IgG – свидетельствующий о перенесенной инфекции гепатита В.

Результаты проведенных исследований указывают, что среди лиц со стертыми проявлениями гепатита имеется довольно солидная прослойка больных острым и хроническим гепатитом В. Данная группа больных в повседневной практике почти не выявляется, не регистрируется и как следствие не учитывается. Что в свою очередь снижает эффективность диагностики гепатита В и мониторинга за этой инфекцией.

Литература

1. Кучук Т.Э., Усманов Р.К., Кабыльников Н.В. и др. Обеспечение качества преаналитического этапа лабораторных исследований (правил получения, учета, хранения и транспортировки биоматериалов) – Методич. рекомендации. - Бишкек. - 2000.-30с.

2. Фаворов М.О., Калашникова Т.В. Контроль качества диагностических исследований – необходимое условие улучшения общественного здравоохранения. - СДС.-2001-50с.

3. Утегенова Э.С., Байжуманова Ж.А., Земен В.В., Калашникова Т.В., Шуратов И.Х. Обеспечение качества иммуноферментного анализа вирусных гепатитов. – Астана.-2007.-55с.

4. Утегенова Э.С., Аббасова Д.К., Нусупбаева О.Е., Нуркаскаева А.К., Шуратов И.Х., Джумагалиева А.Б. Иммуноферментный анализ вирусных инфекций. – Методич. рекомендации.- Астана.-2008.-16с.

5. Жданов В.М. Эволюция вирусов.-М.-1990.-373с.