Биологические науки/ 3. Микология и альгология

к.б.н. Беляева Л.Л., к.б.н. Тарасова Е.Ю., к.б.н. Танасева С.А., к.б.н. Семенов Э.И., к.б.н. Ермолаева О.К., к.б.н. Крючкова М.А., к.б.н. Валиуллин Л.Р.

Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности

МЕХАНИЗМ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ МИКОТОКСИНОВ

Сегодня вопросы этического, разумного и экономного использования животных в исследованиях в области медицины, биологии и ветеринарии привлекают все большее внимание специалистов и общественности. Кроме того, что эксперименты на животных дороги и негуманны – они не всегда обеспечивают результаты, которые можно соотнести к людям. В связи с этим ЕS к 2013–му году запретил повсеместные эксперименты на животных, что диктует глубокую потребность в создании эффективных альтернативных методов. В этом плане становятся все более и более важными in vitro функциональные модели клеток.

Обзорная статья посвящена одному из актуальных разделов токсикологии - альтернативным методам исследования микотоксинов in vitro. В статье обобщены результаты тестирования цитотоксичности микотоксинов, представляющих наибольшую опасность для здоровья человека и животных с использованием самых разнообразных клеточных культур.

Культуры клеток	Микотоксины	Эффект проявления
Клеточная культура хондроцитов человека СD44 , гепатоклеточная карцинома Hep G2 и фетальные легочные клетки MRC-5	Т-2, ДОН, энниатины	Токсин подавлял синтез аггрекана и коллагена 11, а также экспрессию соответствующих мРНК, что проявлялось в угнетении жизнеспособности клеток хондроцитов [1,2].
Клетки промиелоцитарного лейкоза человека HL -60	Т-2, НТ-2	Индукция апоптоза с дозы 3,1-6,25 нг/мл через 24 ч, а при дозе 12,5 нг/мл апоптоз клеток через 4-6 ч [3].
	Фузаренон Х	Вызывает развитие апоптоза при концентрации 0,1-0,5 мкг/мл [3].
Моноядерные моноциты индеек, in vitro на мышах	ДОН	В дозе 20, 40, 80, 160, 320, 640 мг/мкл снижает жизнедеятельность макрофагов, а при 50 мкг/мл их адгезию и фагоцитарную активность [4,5].
	Боверицин	При дозе 2,5-15 мкМ наблюдалась характерная для апоптоза фрагментация ДНК. При дозе 50 мкм, 3 часа индуцирует аппоптоз в трех клеточных линиях мышей [6].
Клетки человека JURKAT [Е-линия]	ДОН	В дозе 250-1000 нг/мл; 62,5-500 нг/мл наблюдается индукция каспазы -3 и апоптоза, а в концентрациях 62,5 -500 нг/мл стимуляция выработки IL 2 и IL -8 и выработка цитотоксинов [7].
Клеточная культура макрофагов RAW 264.7		При 100 нг/мл в течение 4-8 ч значительно повышается экспрессия мРНК [8].
Сасо-2 [ТС7]. Клетки карциномы человека Н5736	ДОН	В дозе 0,2-1 мкг/мл через 48 ч наблюдается торможение пролифирации клеток, а в дозе 2 мкг/мл в течение 5 мин повышение фосфорилирования киназ Erk1/ Erk2 и p38 [9].
На клетках Сасо	Охратоксин А	Инкубация клеток с токсином индуцирует разрывы ДНК. Наблюдается окисление токсина ферментами цитохрома Р450 до менее токсичных метаболитов гидроохратоксина А [10].
Клетки Hela и Сасо	Фузаренон Х и ниваленол	При экспозиции в течение 24-72 ч повреждение ДНК было значительным и дозозависимым. В диапозоне концентраций 0,01-0,05 мкМ в делящихся клетках повышалось число разрывов нитей ДНК [11].
Клетки Hela	Ниваленол	Токсин вызывает быстрый распад полисом [12,13].
Энтероцитоподобная клеточная линия кишечника человека Caco -2.	Aфлатоксин М1 [клеточная линияМКL5	В дозе 0,3-32 нг/мл через 48 часов в безсывороточ ной среде была детектирована дозозависимая абсорбция токсина. Влияния на жизнеспособность клеток не выявлялось [14].
Клеточные линии эпителиальной адено-карциномы человека Сасо-2, Нт-29, Нер-G2	Пролиферин, боверицин	Исследовали токсины в концентрации 0,6-30 цМ. Через 48 ч показана большая чувствительность этих клеточных линий к боверицину. Микотоксин пролиферин не был цитотоксичен для этих клеточных линий [15].
Эпителиальные клеточные линии человека LLCK1/MDR1 и MDCK11/MRP2 –	Ниваленол	Концентрация ниваленола значительно снижался в присутствии 3-гликопротеинового ингибитора валсподара. Показано, что токсин является субстратом как для 3-гликопротеина, так и для МRP2 [13].
Гемопоэтические предшественники клетки пуповинной крови человека СД34^+. Клетки мышей СД34^+МКL	ДОН, Т-2 токсин	Т-2 токсин в отличие от ДОН индуцирует апоптоз клеток пуповинной крови, что приводит к ингибированию гемопоэза. Механизм миелотоксичности ДОН еще не ясен [16,17].
Мышиные клетки Лейдига Клетки линии Hep G-2	Зеараленон, α-зеараленол	Воздействие токсинов существенно снижает секрецию тестостерона, вызывает уменьшение выживаемости клеток. Наблюдалась дозозависимое угнетение синтеза белка и индукция экспрессии белков теплового шока Н [18,19].
Иизолированные клеточные мембраны эритроцитов крыс.	Зеараленон, α-зеараленол, фузапролиферин	Наблюдалось угнетение синтеза белка и индукция экспрессии белков стресса и теплового шока, уменьшение выживаемости клеток [15].
Первичные культуры клеток тимуса и селезенки мышей С57В16, СВА, ДВА.	Фумонизин В1	Токсин дозозависимо влияет на активацию лимфоциотов, что приводит к снижению иммунного ответа. Наиболее выраженный эффект фумонизин В1 оказывает Т-лимфоциты селезенки [20,21].
Сфероидные и монослойные культуры гепатоцитов крыс		Токсин в дозе 300,5000 и 1000 мкМ оказывает цитотоксическое действие и морфологические изменения, включающие аккумуляцию липидных капелек, цитоплазматическую вакуолизацию в монослоях гепатоцитов. Наблюдается разбухание митохондрий и появление включений [22].
Лимфоциты человека и свиньи	Фумонизин В1, Охратоксин	Токсин в концентрациии 5,10,20 мкг/мл через 24-96 часов приводит к снижению жизнеспособности лимфоцитов на 16,3-23,5%. У ФВ1 по сравнению с ОТА цитотоксический эффект проявляется в меньшей степени, а лимфоциты свиней обладают большей чувствительностью к исследуемым токсинам [23].
Клетки гиабластомы U118MG человека	Фумонизин В1	Вызывает апоптоз и снижает выработку активных форм кислорода, что связано с изменением экспрессии протективного гена [24].
Культура тканей почек детенышей хомячка ВНК-21	Фумонизин А и В1	Доза токсина 50-60 мкг/мл проявляет выраженное токсическое действие на клетки ВНК-21. Токсин ингибировал эмбриональный синтез сфинголипидов [25,26].
Культура цельной крови свиней. Эпителиальная клеточная линия человека MRP2	Фумонизин В1, α-зеараленол, ниваленол, ДОН	Фумонизин не влияет на пролиферацию клеток, в то время как остальные микотоксины оказывают достоверный ингибиторный эффект. Наиболее токсичным является ниваленол, за ним-ДОН и α-зеараленол [27].
Клетки карциномы гепатоцитов печени человека Hep G-2, клетки РК-2, почки свиней РЛ-156	Энниатин В и В1	Ингибируют метаболическую активность клеток, подавляют образование эфиров холестерина и биосинтез триглицеридов [28,29,30].
Макрофаги кур	Вортманнин	В дозе 1-50 мкМ в течение 24 ч наблюдалась вакуолизация макрофагов, снижение их жизнеспособности, уменьшение содержания в них белка [31].
Культура клеток кроличьих ретикулоцитов, дрожжевые сферопласты, клетки HeLa	ВеррукаринА, ДАС,сцирпентриол, ниваленол,Т-2 токсин.	Заметное различие ингибирующего влияния различных концентраций трихотеценов дает основание предположить включение их в процессы повреждения клеточных мембран. Неко торые из них вызывают быстрый распад полисом [32].
Клетки карциномы гортани человека Нер-G2 и раковые клетки карциномы человека ENs1	Эннианитины, боверицин	Нарушают ионный гомеостаз, изменяя регуляторные системы клетки, одной из которых являются митохондрии, что становится причиной клеточной гибели. Подавляют синтез триглицеридов [16, 17,18].
Клетки лимфомы U-973, лейкозные клетки человека [ССRF-CEM], клетки лейкемии HL-60, Caco-2, Hт29	Боверицин, Т-2, НТ-2	Индуцирует окислительное повреждение липидов и протеинов мембран. При 50 мкМ, 3 часа вызывает аппоптоз [6,15].
СаСо – модель барьера на тонком кишечнике	Охратоксин А	Исследования показали участие изоформы АР белка в трансэпителиальном транспорте ОТА и участие в этом процессе пермеазы. Наблюдалась корреляция между метаболитами охратоксина внепеченочных тканей свиней и образованием ДНК-аддуктов [33,34].
Клетки культуры кишечника человека СаСо-2, ТС7		В присутствии красного вина токсин вызывает увеличение проницаемости TJ и нарушение клеточной локализации клаудина-4, а также глубокий апоптоз [35].
Белки надосадочной жидкости гомогената ткани коры почек человека и животных		Исследовали видовые и половые особенности связывания озратоксина с белками почек. Индометацин эффективно ингибировал связывание охратоксина с белками человека и крыс, но не влиял на связывание с белками мышей и свиней [37].
Клетки карциномы мочевого пузыря человека линии Н5736 и культуры клеток почек линии PHK	Охратоксин А	ОХА в концентрации более 0,1 мкМ в течение 3-х часов индуцировал разрыв ДНК. Отмечают дозозависимое увеличение экспрессии mPHK и белка, специфического для индуцибельной iNOS Угнетает синтез белка de nova, вызывает поражение ДНК [35,36].
Эпителиальные клетки почек МDСК и МDSK-C-7		Токсин влияет на клеточную адгезию, а. в концентрации 10 нМ- 1 мкМ приводит к развитию апоптоза, который оценивали по фрагментации ДНК и повышению активности каспазы-3 максимально до 90% [38,39,42].
Первичные уротеральные клетки человека		Токсин в концентрации 100 мкМ в течение 3-х часов оказывает генотоксическое действие [39].
Ко-культура клеток экспрессирующих CYP 450-2 CD и CYP 450 – 3A4. Макрофаги RAW264.7 – праймированные линии мышиных макрофагов		ОХА ингибирует TNF-α, а его метаболиты блокируют образование NO. Выработка TNF-α была значительно снижена в Ко-культурах по сравнению с макрофагами [40].
Клетки линии СV-1 и V79 – проксимальные канальцы почек крыс Первичные клетки почек и печени крыс №43		ОТА в дозе 1 мкМ в течение суток вызывает, поражение ДНК клеток не нарушая целостность мембран. В дозе 25-100 мкМ в течение часа оказывает оксидативное поражение ДНК [41].
Клетки эпителия тонкого кишечника человека линии НТ-29-09	Патулин	В дозах 10-6М изменяет барьерную функцию , резко снижает трансэпителиальную резистентность кишечника [44].
Моноцитарная клеточная линия человека MonoMac-6	Цитринин, глиотоксин	Под влияние токсина подавлялась выработка интерлейкина. Наблюдается увеличение апоптоза и угнетение жизнеспособности клеток [45].
Ткани печени крыс, мышей, золотистых хомячков, взрослой радужной форели, поросят	Афлатоксин В1	У всех животных повышалось образование [АфВ1- CSH] с увеличением концентрации АфВ1, причем у грызунов активность была выше чем у форели и свиней [46].
Клеточная культура мозга мышей		Ингибирует активность ацетилхолинэстеразы мозга, таким образом токсин блокирует доступ субстрата к активному центру [47].
Клональная клеточная линия эпителия молочных желез коров BME –UV1		В дозе 1,0-0,8 мкМ в течение 4 часов наблюдается снижение жизнеспособности клеток №8 [48].
Клеточная культура изолированных митохондрий печени крыс, cперматозоидов кабанов и поджелудочной железы мышей MIN-6В 3	Акребол [пептаибол]	В концентрации 1 мкг/мл ингибирует комплекс III дыхательной цепи митохондрий, а в дозе 350 мкг/мл вызывал немедленное и полное ингибирование. Нарушает проницаемость мембран для ионов и растворенных веществ митохондрий. Цитотоксическое действие проявляется ингибированием дыхательной цепи и истощением АТФ за счет активации олигомицин - Fo-F1 чувствительной –АТФазы. Микотоксин вызывал некрозоподобную гибель клеток [49].
Саркоплазматический ретикулум кролика	Дендродохин	Установлено активирующие действие токсина на Mg и Ca, что связано с повышением содержания липидов в результате нарушения белок-липидных взаимодействий [32].
Синергическое действие микотоксинов
Клеточная линия почек свиней LLC-PK	Охратоксина А, охратоксина В, патулина, цитринина	Интерактивное синергическое цитостатическое действие проявлялось только у цитрина и охратоксина А [50,51].
Клеточная культура лимфоцитов быка. Лейкемические Т-клетки линии Jurkat .	Охратоксин, зеараленон	Совместное генотоксическое действие микотоксинов приводило к значительному повышению числа хромосомных аббераций и снижению митотического индекса [52].
Изолированные лимфоциты человека и свиньи	Фумонизин В1 и охратоксин А.	Показано синергическое токсическое действие, что проявлялось дозозависимым угнетением жизнеспособности клеток. Лимфоциты свиней оказались более чувствительными, что позволяет заменить тест цитотоксичности, проводимый с использованием лимфоцитов человека на лимфоциты свиней [53,54].
Эпителиальные клетки бронхиол человека	охратоксин и цитринин.	Наблюдали взаимное усиление генотоксического воздействия по образованию ДНК-аддуктов обоих токсинов при дозе [ > 2 мкМ], а также индуцирующий эффект на систему арахидоновой кислоты и на Р-4501В4 [55].
Культура цельной крови свиней	фумонизина В1, α-зеараленола, ниваленола и дезоксиниваленола.	Только совместное действие фумонизина и α-зеараленола вызывало синергическое ингибирование пролиферации клеток крови [56].
Мононуклеарные клетки периферической крови человека	Цитринин,глиотоксин, охратоксин А и патулин по отдельности и в смеси.	Все микотоксины ингибировали дозозависимую выработку β-интерферона, . Сочетанное действие микотоксинов в этом плане оказывало более выраженный эффект [57,58].
Мононуклеарные клетки периферической крови крупного рогатого скота	Афлатоксин В1, фумонизин В1	При воздействии от 2-х до 7-ми дней в дозе 0,5 и 20 мг/мл АфВ1 и 0,35 и 70 мг/мл ФумВ1 цитотоксичность этих микотоксинов проявлялась изменением оксидативного статуса клеток [59].

Заключение. Таким образом, использование самых разнообразных клеточных культур для исследования цитотоксичности микотоксинов позволяет исследовать иммуномодулирующие, канцерогенные и гематологические нарушения, нефротоксическое действие, нарушения дыхательной цепи митохондрий и сперматогенеза, белок-липидных взаимодействий, процессов регуляции и активации лимфоцитов. Множество исследований in vitro подтверждают влияние микотоксинов на клеточный апоптоз. Проведенные исследования свидетельствуют, что альтернативные методы являются адекватными и соответствуют данным, полученным в опытах на животных.

Литература:

1. Зайченко А.М., Андриенко Е.В., Цыганенко Е. С. Макроциклические трихотеценовые микотоксины: механизм действия. // Современные проблемы токсикологии. – 2008. - №3. - C. 43-49.

2. Зайченко А.М., Андриенко Е.В., Цыганенко Е. С. Макроциклические трихотеценовые микотоксины: механизм действия // Современные проблемы токсикологии. – 2008. - №3. - C.43-49.

3. Mартынова Е.А. Успехи медицинской микологии: Материалы 5 Всероссийского конгресса по медицинской микологии. – Т. 9. – 2007. - С. 98-101.

4. Позялова А.А., Теплова В.В., Соловьева М.Е. и др. Индукция клеточной гибели микотоксинами семейства энниантинов // Международная конфе-ренция «Рецепция и внутриклеточная сигнализация», Пущино, 5-7 июня, 2007: Материалы конференции. – Пущино: 2007. – С. 267-271.

5. Соколова Г.Д. Энниатины и боверицин-биологически активные метаболиты фитопатогенных видов Fusarium. Микология и фитопатология, 2008. – Т. 42. - вып. 2. - C. 97-109.

6. Abeywickrama Krishanthi, Bean George. Cytotoxin effects of Fusarium moni-liforme extracts and fumonisin in a baby hamster kidney cell line // J. Nat. Sci. Couns. Sri. Lanka. – 1996. – V. 24. – № 3. – P. 211-216.

7. Berger V., Sergent -Engelen, et al. Interaction [permeability, biotrans – formation and gene modulation] of ochratocxin A in CaCo – 2 celles, in vitro model of intestinal barrier // MDO 2000. 13 International Symposium on Microsomes and Drug Oxidations, Stresa, July 10-14. – 2000. – P. 173.

8. Bone S., Oliver loiseau Z., Carcelen M., Devaux A. // Genotoxik potential associated with lov lewels of the Fusarium mycotoxins nivalenol and fusarenon X a human intestinal cell // Toxicol. In Vitro 2007. - V. 21. - №3. - P. 457-468.

9. Bumseok Kim. Sohail Ejaz, Chekarova Irina et al. Cytotoxicity of fumonisin B1 in spheroid and monolayer cultures of rat hepatocytes //Toxicol. - 2008. - V. 31. - №3. - P. 339-352.

10. Calo L., Fornelli F., Ramires et al. Cytotoxic effects of the mycotoxin beauverizin to human cell lines of myeloid origin // Pharmacol. Res. - 2004. - V. 49. - N 1. – P. 207-219.

11. Caloni F., Stsmmsti a., Frigge G et al. Aflatoxin M1 absorption and cytotoxicity on human intestinal in vitro model // Toxicon. – 2006. – V 47. - №4. – C.409.

12. Caruso M., Mariotti A. et al. A clonal cell line [ВМЕ- UV1] as a possible model to study bovine mammary epithelial metabolism: Metabolism and cytotoxicity of aflatoxin B1 // Toxicon. – 2009. – V. 53. - №4. – P. 400 – 408.

13. Chen Jing-hong, Cao Jun –ling et al. Study on the effect of T-2 tohin and selenium onCD44 expression in the cultured human fetal chondrocytes in vitro // J. South. Med. Univ. - 2006. - V. 26. - № 4. - Р. 381-385.

14. Cometa Maria Francesca, Lorenzini Paola et al. In vitro inhibitory effect of aflatoxin B1 on azetylcholinesterase activity in mouse brain. // Tohicologu. – 2005. - V. 206. - №1. - Р. 125-135.

15. Creppy E. E. Chiarappa P., Baudrimont I. Synergistik effects of fumonisin B1 and ochratoxin A: are in vitro cytotoxicity data predictive of an in vivo acute toxicity // Toxicology. – 2004. - №1. - V. 1. - P. 115.

16. Degen. G.H., Lebrun S., et al. Modulation of oxratochin A induzed DNA – damage in urothelial cell cultures. // Mycotoxin Res. – 2005. - V. 21. - № 1. – P. – 57-60.

17. El Adlouni Chakib, Pinelli Eric. Phenobarbital increases DNA adduct and metabolites formed by ochratoxin A: Role of CYP 2C9 and microsomal glutathione-S-transferase. //Environ. and Mol. Mutagens. – 2000. – V. 35. - №2. – P. 123-131.

18. Esaki H., Kumagai S. et al. Glutathione-S-transferase activity toward aflatoxin epoxide in livers of mastomys and other rodents // Toxicon. – 2002. – V. 40. - № 7. – P. 941-945.

19. Gekle Michael, Shwtrt Geral. Oxratochin A induces JNK activation and apoptosis in MDCK –C7 cells at nanomolar concentrations. // J. Pharmacol. And Exp. Ther. - 2000. –V. 293. - №3. - P. 837-844.

20. Guiiiermina G. Cytotoxicity of beauvericin an nd fusaproliferin mycotoxins in Caco-2, HT-29 and Hep-G2 cells // Altex. – 2010. - V. 27. – P. 47.

21. Hassen Waffa, Baudrimont Isabelle et al. Cytotoxicity, inhibition of protein synthesis and induction of stress protein expression in HEP GZ cell line in response to zearalenone //Toxicol. Lett. – 2003. – V. 144. - P. 64-65.

22. Heussner A.N., Dictrich., O΄Brien E. In vitro investigation of individual and combined cytotoxic effects of ochratoxin A and other selektefed mycotoxins on renal cells. // Toxicol in Vitro. - 2006. - V.20. – №3.

23. Heussner A.N., Dictrich., O΄Brien E. In vitro investigation of individual and combined cytotoxic effects of ochratoxin A and other selektefed mycotoxins on renal cells // Toxicol in Vitro. - 2006. - V.20. – №3.

24. Heussner Alehandra H., O΄Brien Evelyn et al. Species and sex-specific variations in bindung of ocratoxin A by renal proteins in vitro // Exp. And Toxicoi. Pathol. – 2002. – V. 54. - № 34. - P. 151-159.

25. Holme J., Morrison E. Mechanisms involved in the induction of apoptosis by T-2 and HT-2 toxins in HL-60 human promyclotic leukemia cells // Cell Biol. and Toxicol. - 2003. - V. 19. - № 1. - P. 53-68.

26. Holme J., Morrison E. Mechanisms involved in the induction of apoptosis by T-2 and HT-2 toxins in HL-60 human promyclotic leukemia cells // Cell Biol. and Toxicol. – 2003. – V. 19. - № 1. – P. 53-68.

27. Holzhauser D., Delatour M., Marin-Kuan s. et al/ Ochratoxin A toxicity and carcinogenicity // Toxicol.Lett. – 2003. – V. 144. прил. 1. – P. 65.

28. Ivanova Lada, Eystein Skjerve, Guillermina G. Eriksen. Cutotoxincitu of enniatins A, A1 B, B1, B2 and B3 from Fusarium avenaceum // Altex. - 2010. - V. 27. - P.47.

29. Johanessen L.N.,Nilsen A.M., The mycotoxins citrinin and cliotoxin differen-tial affect production of the proinflammatory cytokines tumour nekrosis factor-α and interleukin-6, and the anti-inflammatory cytokine interleukin-10 // Clin. And Exp. Allergy. – 2005. – V. 35 - № 6. –P. 782-789.

30. Kamp H.G., Turesky R., Schlatter J. et al. Oxidative DNA damage induced by the carcinogenic mycotoxin ochratoxin A in vitro and vivo // Toxicol. Lett. – 2003. – V. 144. - P. 65.

31. Kidd M.T. Deoxynivalenol is immunosuppressive in vitro in young turkeys // Poultry Science. - 1994. - V. 73. - № 1. - P. 130-137.

32. Kruglov Alexey G., Andersson Maria A., et al. // Novei mycotoxin from Acremonium is a powerful inhibitor of the mitochondrial respiratory chain complex 11. / Chem. Res. Toxicol. – 2009. - V. 22. - №3. - P. 565-573.

33. Le Drean G. Arnold F. Myelotoxicity of trichothecenes and apoptosis: An in vitro study on human cord blood CD34⁺ hematopoietic progenitor // Toxicol. in Vitro. – 2005. - № 8. – Р. 1015-1024.

34. Lebrun Stefan, Golka Klaus et al. Clutathione S – transferase polymorphisms and ochratoxin A toxicity in primary human urothelial cells // Toxicologu. – 2006. – V. 224. - №1-2. – P. 81-90.

35. Lee Hee-Seok, Sony Hyuk-Hwan et al. Сytotoxicities of ennatins H, 1 and МК 1688 from Fusarium oxysporum KFCC 11363HP //Toxicon. - 2008. -V. 5 - № 7. - P. 1178-1185.

36. Lioi. M. B., Santoro A,. et al. Ochratoxin A and zearalenone: A com parativ study on genotoxic effects and cell deatch induced in bovine lymphocytes // Res. Genet. Toxicol. and Environm. Mutagen. 2004. – №1. - V. 557. – P. 19-27.

37. Luongo D., De Luna R. Russo R. et al. Effects of four Fusarium to[ins [fumonisi B1, α –zearalenol, nivalenol and deoxynivalenol] on porzine whole- -blood cellular proliferation. //Toxicon. – blood. - 2008. – V. 52. - №1. – P. 156 – 162.

38. Luongo D., De Luna R. Russo R. et al. Effects of four Fusarium to [ins [fumonisi B1, α –zearalenol, nivalenol and deoxynivalenol] on porzine whole- -blood cellular proliferation. //Toxicon. – blood. - 2008. – V. 52. - №1. – P. 156 – 162.

39. Mahfond R., Maresca M. et al. The mycotoxin patulin alters the barrier function of the intestinal epithelium-mechanism of action of the toxin and protective effect of glutathione. // Toxicol. and Appl Pharmacol. – 2002. –V. 181. - № 3. – P. 209-218.

40. Mally Angela, Decker Martina et al. Ochratoxin A alters cell adhesion and dap iunetion intercellular communication in MDCK cells // Tohicolog. - 2006. -V.223. - №1. - P. 15-20.

41. Molinie Anne, Pfohl-Leszkowicz. Toxic effects of co contamination of ochratoxin A and citrinin // Drug Metab. Rev. – 2002. – V. 35. – P. 77.

42. Mulunda Mwanza, Melinda Kovacs΄ et. al. The cytotoxic effecs of fumonisin B1 and ochratoxin A and citrinin. Pfohl-Leszkowicz // Drug Meta. Rev. – 2002. –V. 35. – P.77.

43. Mulunda Mwanza, Melinda Kovacs΄ et. al. The cytotoxic effecs of fumonisin B1 and ochratoxin A and citrinin. Pfohl-Leszkowicz // Drug Meta. Rev. – 2002. –V. 35. – P. 77.

44. Pestka J. Toll-likerezeptorpriming sensitizes macrophages to proinfla-mmatory cytokine gene induction by deoxynivalenoi and ocher toxicants // Toxicoi. – 2006. – V. 92. -№ 2. - Р. 445-455.

45. Pestka J.J. Effects of the mycotoxin deoxyniwalenol on the immune system of the gut // Toxicol. Lett. - 2002. - V. 135. - Р. 15 -16.

46. Pestka J.J.,Rebbeka Uzarski L.et al. Zahidul Islam Induction of apoptosis and cytokine production in the Jurkat human T cells by deoxynivalenol. Role of mitogen activated protein kinases and comoarison to other 8- ketotrichotehecenes // Toxicology. - 2005. – V. 206. - №2. - P. 207-219.

47. Ranaldi G., Mancini E. et al. Effekts of red wine on ochratoxin A toxicity in intestinal CaCo -2/ TC7 cells // Toxicol. in Vitro.- 2007. - V.21. - № 2. - P. 204-210.

48. Sadler T. W., Alfred H. Prevention of fumonisin B1 – induzed neural. Tube defects by folic acid // Teratology. – 2002. – V. 66. - №4. - P. 169 – 176.

49. Sarah Bull, Simarro Doorten Yolanda et al. In vitro delection of ochratoxin A induced immunosuppression. //Drug Metab. Rev. – 2002. – V. 35. - P. 142.

50. Schneider Yves-Jacgues, Berger Valerie, 2002. - Тез. EURO-TOX 2002. Budapest. 15-18 Sept. 2002. // Toxicol/ Lett. – 2002. - P. 24.

51. Stockmann-Juvuala H., Savolainen K.M. Effekts of fumonisin B1 on human U118MG glioblastoma cells // Toxikol. Lett. – 2002. – V. 135. - P. 147.

52. Tammer Beate, Lehmann Irina. Combined effects of mycotoxin miktures on human T cell function. // Altenburger Rolf. Toxicol. Lett. - 2007. - V.170. - №2. - P. 124 -139.

53. Tammer Beate, Lehmann Irina. Combined effects of mycotoxin miktures on human T cell function. // Altenburger Rolf. Toxicol. Lett. - 2007. - V. 170. - №2. - P. 124 -139.

54. _{Ter Jonathan, Widermann Bernadette Mazallan Michele et al., Transepithelial transport of fusariotoxin nivalenol: Meditation of secretion bu ABC transport trs // Toxicol Lett. - 2007 – V. 170 - №3. - P. 248-258.}

55. Thérése Sergent, Parus Marie et al. Deoxynivalenol Transport across human intestinal Caco -2 cells and its effects on cellular metabolism at realistic intestinal concentrations // Toxicol Lett. - 2006. - V. 164. - №2. - Р. 167-176.

56. _{Umberto Benabucci, Luciana Colavecchia, Pier Paolo Danieli, Lorenda Basirico, Nicola Lacetera, Allesandro Nardone, Druno Ronchi. Aflatoxin B1 and fumonisin B1 affect the oхidative status of bovine peripheral blood mononuclear cells // Chem. Res. Toxicol. - 2009. - V. 22. - P. 565-573}.

57. Vahida, M.S.,Martynova E.A. Regulation of lymphocytyte activation fumonisin B1 // Immunopathology, Allergology, Infectology. - 2009. - № 2 – P. 8-9.

58. Wu W, Mirocha C.J. Decreased immunological responses by wormannin – containing rice culture of Fusarium oxysporum and by purified wormannin in avian species // Immuno-pharmacology and Immunotoxicology. – 1992. – V. 14. - № 4. – P. 913-923.

59. Yang Jianying, Yongta Zhang et al. Toxic effects et zearalenone and zearalenol on the regulation of steroidogenesis and testosterone production in mouse Leydig cell // Toxicol in vitro. - 2007. – V.21. –№ 4. – P. 558-565.