Таисова Л.В.
Хламидиоз. Методы диагностики
Группа заболеваний и синдромов, вызываемых Chlamydia trachomatis,
характеризуются непосредственными многоочаговыми
поражениями мочеполовой системы с
последствиями (влияние на репродуктивную функцию, потенциальная
опасность стать источником хламидийных инфекций
другой локализации, в том числе
перинатальных).
Возбудителем
мочеполовых хдамидиозов
являются Chlamydia trachomatis – неподвижные, коккоподобные,
грамотрицательные облигатные внутриклеточные микроорганизмы. Они не в состоянии
самостоятельно синтезировать АТФ и поэтому в клетке хозяина являются
энергетическими паразитами, но в отличии от вирусов,
содержат и ДНК, и РНК. Урогенитальные инфекции
вызываются Chlamydia trachomatis серотипов D –K.
Биологическое
своеобразие хламидий, состоящих в обязательном
внутриклеточном энергозависимом паразитизме и уникальном цикле развития,
которые проявляются на фоне комплекса бактериоподобных характеристик по единодушному мнению
специалистов, определяет самостоятельное положение этих микроорганизмов в
системе прокариотов.
В
большинстве случаев заражение хламидиозом происходит
половым путем. Вероятность заражения при незащищенном половом контакте
(вагинальном, анальном) с больным хламидиозом
составляет около 50%. При прохождении через родовые пути возможно инфицирование
новорожденного с развитием у него конъюктивита и
воспаления легких. Бытовое заражение маловероятно. Это обусловлено тем, что хламидии быстро погибают вне организма человека, кроме того для заражения необходимо, чтобы в организм попало достаточное количество хламидий. Поэтому причиной заражения не могут быть сидения
унитазов, плавательные бассейны, бани, общая посуда и полотенца.
Хламидиоз
у мужчин и женщин проявляется после
инкубационного периода, продолжительность которого составляет от 5 до 30 дней.
Симптомы.
Пациенты могут жаловаться на выделения
из уретры (мужчины), влагалища (женщины)
белого, желтого цвета или прозрачные. Иногда возникает болезненность,
жжение при мочеиспускании или половом
акте, покраснения и зуд у наружного отверстия мочеиспускательного канала. При развитии осложнений больные жалуются на
боли в области промежности, мошонки, прямой
кишки, женщин беспокоят боли внизу живота, в области поясницы. Как у мужчин, так и уженщин
возможны боли во время полового
контакта. Однако в 5% случаев хламидиоз протекает бессимптомно.
Стадии заболевания:
- острая, первичная;
- хроническая;
- реактивация или реинфекция;
- состояние после реконвалесценции
(остаточная серология).
Длительное бессимптомное течение и
множественные неспецифические клинические проявления затрудняют
симптоматическую диагностику хламидиоза, в связи с чем основное
значение приобретают лабораторные методы исследования.
Одним из самых ответственных этапов
диагностики хламидиоза является забор материала. Именно этот этап должен
проводиться в лечебных учреждениях широкого профиля, в то время как дальнейшая
обработка материала должна осуществляться в специализированных лабораториях.
Лабораторные методы диагностики хламидийной инфекции.
1. Цитоскопические методы обнаружения хламидий.
При цитоскопическом методе одновременно с поиском цитоплазмотических клеток-включений Гальбершедтера
– Провачека учитывается количество лейкоцитов как показателя
воспаления, а так же дополнительная информация о наличии сопутствующей
бактериальной микрофлоры, дрожжеподобных
грибов, трихомонад и т.д.
2. Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ). Этот метод предусматривает прямое
выявление антигенов хламидий. При
люминисцентной хламидийные включения определяются в
виде образований в клетке эпителия с зеленой или желто-зеленой флюоресценцией
на коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток. Включения могут иметь зернистую,
гомогенную или смешанную структуру.
3. Метод иммуноферментного анализа. Этот метод основан на обнаружении растворимого антигена хламидии в исследуемых пробах.
4. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Дороговизна, длительность и
трудоемкость микробиологического выделения хламидий в
культуре существенно затрудняет использование этой процедуры в рутинной лабораторной диагностике. Экстремально
высокие показатели чувствительности и специфичности ПЦР делают эту методику во
многом революционной в лабораторной диагностике. Основными мишенями при выявлении хламидии
трахоматис являются нуклеотидная последовательность видоспецифической криптической плазмиды, последовательность генома главного белка
внутренней мембраны, рибосомальные гены.
В Першотравенской центральной городской больнице подверглись
анализу 50 женских мазков из уретры и цервикального канала. Окраска
унифицированная по Романовскому – Гимзе. После
окраски препараты просматривались в световом микроскопе, используя
иммерсионный объектив (х90). Результаты
разделились на три группы:
1) лейкоцитоз в норме или
незначительно превышает норму, клетки эпителия поверхностного и
цилиндрического, бактериальная микрофлора.
2) лейкоцитоз
превышает норму, клетки цилиндрического эпителия не содержат элементарных
включений, отсутствуют элементарные тельца, наличие бактериальной флоры, в отдельных
- дрожжеподобные грибы.
3) лейкоцитоз значительно превышает
норму, в цилиндрическом эпителии наличие элементарных включений, окрашенных в
розовый цвет, бактериальная флора. Выставляется диагноз: хламидиоз.
Цитоскопический метод широко доступен, дешевый, но эффективен лишь при острых формах инфекции, значительно менее эффективен и информативен при хронических формах заболевания. При урогенитальном хламидиозе частота обнаружения телец Провачека в соскобах уретры и цервикального канала не превышает 10-12%. Наличие этих телец подтверждает диагноз хламидиоза, однако их отсутствие не исключает наличие инфекции.
Для
определения стадии заболевания, оценки эффективности лечения, установления хламидийной этиологии экстрагенитальных
поражений имеют место показания к выявлению антихламидийных
антител классов IgG, IgA, IgM
в сыворотке крови методом ИФА. Чувствительность и специфичность метода составляет 90-100%. В острой стадии
определяются IgM, IgA, IgG, хронической - IgA, IgG, реактивации и реинфекции - IgA, IgM, состояние после реконвалесценции – IgG.
Выводы: цитоскопический
метод является скрининговым методом, который
эффективен при диагностике острого хламидиоза
и не имеет информации при хронической
стадии. Поэтому для постановки клинического диагноза необходимо
применять иммуноферментный метод, который позволяет точно по иммуноглобулинам
М, А, G поставить диагноз.
Метод
ПЦР из-за своей дороговизны является
не всегда доступным пациентам, так как только крупные больницы областного характера
могут иметь специализированные лаборатории.
Литература:
1. Башмакова М.А., Бочкарев Е.Г., Говорун В.М., Савичева
А.М., Парфенова Т.М. // Хламидиоз.
Современные подходы
к диагностике и лечению.- М., 1999.-61 с.
2. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. // Вирусные, хламидийные и
микоплазменные заболевания генеталий. –М.: ИИД "Филинъ".-1997.-536
с.
3. Поздеев О.К., Покровский В.И., Внутриклеточные паразиты:
бактерии семейства Chlamydiae, Rickettsiacea
и Bartonellaceae// меицинская микробиология.- М.,: Гэотар Медицина. – 1999.-с.529-551.
4.Савичева А.М., Башмакова М.А., Шипицина Е.В., Шалепо К.В.,
Мартикайнен З.М., Зациорская С.Л.,
Рыбина Е.В., Новикова Л.Н., Тараскина
А.Е. Клиническая оценка генитальных инфекций // Полимеразная
цепная реакция в диагностике и контроле лечения
инфекционных заболеваний. Материалы 3 –ой
Всероссийской
научно-практической конференции.- М.- 2000.- с. 79-82.
5. Савичева А.М., Урогенитальный хламидиоз и репродуктивное
здоровье женщин.// Тез. Докл. VII Рес.
Съезда дерматологов-венерологов. Казань.- 1996. –ч.3.-с.121.
6. Савичева А.М. Хламидиоз – болезнь молодых. //
Материнство.- 1996.-N2.-с. 14-16.
7. Савичева А.М., Башмакова М.А. Урогенитальный хламидиоз у
женщин и его последствия. Под ред.
Фйламазяна Э.К. – Н.Новогород: Издательство НГМА.- 1998.- 182
с.: ил.
8. Серов В.Н., Краснопольский В.И., Делекторский В.В. и др.
Хламидиоз. Клиника, диагностика, лечение.
Методические рекомендации.- М.- 1997 г.-23 с.
9. Alaniz Sanchez A. Chl.
Trachomatis and displasia cervical.//Obsterrics.- 1995.-Sep.-vol.63.-p.377-381.
10.Dwyer
R. St.C. Chlamydial infection. Results of micro-immunofluorescence tests for
the delection of type-
specific
antibody in certain chlamydial infections // Brit. J.
Vener/ Dis/ - 1972/ - Vol.
48. -P. 452-459/
11. Everett K.D.E. Emended
description of the order Chlamydiales, proposal of Parachlamydiaceae fam. Nov.
and
Simkaniaceae fam. Nov., each
containing one mono-typic genus, revised taxonomy of the family Chlamydiaceae,
Including a new genus and five
new species, and standarts for the identification of organisms // Inter. J.
Syst.
Bacterial.-1999. – Vol. 49. -
P. 415-440.
12. Ridgway G.L. // FEMS worshop human chlamydial infictions.-Program de Bildiri ozelteri.-lzmir.-1997.-p.38-44.
13. Stephens R.S. Chlamydia. Intracellular Biology, Pathogenesis, and Immunity. -//
999/ - P. 143-146.
14. И.И Мавров "Половые болезни" // Руководство для
врачей, интернов и студентов. Харьков "Факт" 2003г.