Влияние протектора роговицы на репаративный процесс роговицы глаз

(экспериментальное исследование)

Адельшин А.И., Рахматуллин Р.Р., Бурлуцкая О.И., Бурцева Т.И.

По данным Всемирной организации здравоохранения заболевания роговицы являются причиной слепоты у 5% населения мира, при этом из 314 миллионов 45 миллионов пациентов абсолютно слепые, на 8 миллионов слепых приходится 1,5 миллиона детей. В силу своих топографических особенностей роговица постоянно подвержена воздействию физических, механических, химических факторов внешней среды [3, 5, 6].

По данным ряда исследований в поврежденных тканях глаза происходит снижение активности тканевого дыхания, уменьшение количества гликогена, мукополисахаридов, витаминов, АТФ, истощаются ресурсы антиоксидантов [2]. Совокупность взаимодействия физиологических и биохимических изменений при сухости роговицы глаз приводит к нарушению регенераторных процессов в роговице [1].

В последнее время внимание исследователей привлечено к поиску методов лечения с использованием нанотехнологий и клеточных технологий. В научно-производственной лаборатории клеточных технологий Оренбургского государственного университета разрабатывается протектор роговицы глаз. Для изготовления протектора роговицы глаз в качестве исходного терапевтического компонента используют 3 % раствора нативной гиалуроновой кислоты, после растворения вводят 1% пептидного комплекса, состоящий из короткоцепочных пептидов - олигопептидов, а стерилизацию проводят ионизирующем излучением в диапазоне радиационного излучения от 78 × 107 до 11 × 108.

Работами Зайнутдинова Г.Х. и др. было доказано, что гиалуроновая кислота, являясь основным межклеточным веществом организма, способствует активации макрофагов, стимулирует физиологические репарационные процессы и в определенной степени подавляет фиброгенез.

Целью настоящего исследования явилось изучение течения репаративного процесса восстановления эрозии роговицы глаза на фоне применения наноструктурированного протектора роговицы глаза совместно с при применением мягкой контактной линзы.

Работа носила экспериментальный характер и выполнена на 12 кроликах (24 глаз), посвящена изучению влияния протектора роговицы на неизмененную роговицу при эрозивном патологическом процессе. Объектом изучения был разработанный протектор роговицы глаза, который в качестве исходного терапевтического компонента включает в себя 3 % раствора нативной гиалуроновой кислоты, после растворения вводят 1% пептидного комплекса, состоящий из короткоцепочных пептидов - олигопептидов, при этом стерилизацию проводят ионизирующем излучением в диапазоне радиационного излучения от 78 × 107 до 11 × 108 .

В эксперименте изучали влияние протектора роговицы глаза на восстановления эрозии роговицы глаза по сравнению с лечебным действием МКЛ.

Гистологические методы

Все животные выведены из эксперимента путем декапитации под эфирным наркозом. При выполнении исследования соблюдались правила биоэтики, утвержденные приказом МЗ СССР № 755 от 12.08.1977.

Светооптическое, электронно-микроскопическое и иммуноцитохимическое исследования проводили по стандартной технологии.

В эксперименте формировали эрозию роговицы по методу С. Hanna, J.Е. O'Brien (1960). Под местной анестезией 0,4% Инокаином легким прижатием трепана с поршнем диаметром 8мм к роговице наносили метку, которую окрашивали 0,1% раствором флюоресцеина натрия. В пределах метки лезвием соскабливался эпителий роговицы. Дефект эпителия снова окрашивали для того, чтобы отчетливее были видны его форма и размер.

После формирования эрозии животные были разделены на две группы: опытную (12 правых глаз) и контрольную (12 левых глаз). В опытной группе проводили аппликацию биопластического материала по описанной выше методике. В контрольной группе надевали МКЛ. В обеих группах в течение всего времени, пока сохранялся дефект роговицы, проводили инстилляции Ципромеда × 4 раза в день.

Результаты

В первые сутки эксперимента на всех глазах отмечали инъекцию, которая проходила полностью в опытной группе к 3 суткам, в контрольной группе медленнее - к 5 суткам.

Биомикроскопия глаз экспериментальных животных опытной группы показала полное закрытие дефекта на 3-и сутки аппликации, что подтвердили результатом флюоресцеиновой пробы – прокрашивания роговицы не было, при этом отмечали восстановление прозрачности, сферичности, гладкости, блеска и высокой чувствительности роговицы. В то время как в контрольной группе сохранялся роговичный синдром и полное закрытие дефекта отмечали только на 4-е сутки.

При морфологическом и морфометрическом изучении препаратов глаз опытной группы в сроки 3-х суток было обнаружено, что в зоне механического дефекта роговицы активно происходила эпителизация дефекта эпителия. При этом клетки эпителия были дифференцированные, располагались в 3-4 ряда по периферии, ближе к центральной зоне в 2-3 ряда. Оценивая гистологические структуры глаз кроликов в контрольной группе, определяли большую активность фибропластических процессов, вызванных эрозией, включающих дистрофические изменения и остатки деструктивных. По истечении 7-и суток и далее роговица имела обычное строение, инфильтрацию в слоях роговицы не определяли как в опытной, так и в контрольной группах.

Выводы

Таким образом, аппликация наноструктурированного биополимера гиалуроновой кислоты не приводила к нарушению соединительнотканной структуры роговой оболочки и изменению стадийности физиологического ответа на травму роговицы. Асептическое воспаление при механическом воздействии на эпителий роговой оболочки завершалось в сроки 3-х суток в опытной группе и по данным морфологического исследования до 7-и суток в контрольной группе. Клиническое исследование явных отличий течения реактивного воспаления не выявило, но показало что закрытие эрозии в контрольной группе проходило быстрее, чем в опытной. Учитывая положительные результаты аппликации при механической травме, было принято решение применить биопластический материал при более агрессивном воздействии на роговицу.

Список литературы

1. Бурлуцкая О.И., Обзор современных средств используемых в офтальмологии для лечения синдрома сухого глаза / О.И. Бурлуцкая, А.И. Адельшин, Р.Р. Рахматуллин: Вестник ОГУ 6(155)/июнь – С. 4-5.

2. Бойко Э.В. О роли хламидной инфекции в развитии синдрома сухого глаза / Э.В. Бойко, В.Ф. Черныш, А.Л. Позняк , и др. М.: Вестник офтальмологии, 2008. №4. – С. 16-19.

3. Вит В.В. Строение зрительной системы человека / Вит В.В. – М.: Астропринт, 2003. – С. 727 с.

4. Зайнутдинова Г.Х. Содержание кортизола и гликозаминогликанов у пациентов с увеитом при ревматических заболеваниях / Г.Х. Зайнутдинова, В.Б. Мальханов, Н.Е. Шевчук и др. М.: Вестник офтальмологии, 2009. №6. – С. 25-28.

5. Сухинин М.В. Морфологическая характеристика переднего эпителия роговицы и сосудистого русла конъюнктивы глазного яблока в норме и при механическом повреждении перилимбальной зоны: (экспериментальное исследование): авт. реф. дис. на соиск. уч. степени канд. мед. наук: Санкт-Петербург: 2011. - 18 с.

6. Яхина О.М. Влияние наноструктурированного биополимера гиалуроновой кислоты на течение репаративного процесса роговицы авт. реф. дис. на соиск. уч. степени канд. мед. наук: Москва: 2013. - 20 с.

Работа выполнена при финансовой поддержки гранта РГНФ № 13-16-56004 и правительства Оренбургской области.