Машарипов С.М. Курбанова Н.Н.

Интенсивность генерации активных форм кислорода в митохондриальной фракции гепатоцитов на ранних сроках церебрального ишемического инсульта.

Ташкентская медицинская академия, Ургенчский филиал

Актуальность проблемы. Постинсультная инвалидизация занимает первое место среди всех возможных причин утраты трудоспособности, к прежней работе возвращаются лишь около 20 % лиц, перенесших инсульт, при этом одна треть больных - люди социально активного возраста, что подчёркивает актуальность проводимых исследований. При развитии ишемии тканей головного мозга накапливаются метаболиты взоимодействия активных форм кислорода с макромолекулами белковой и липидной природы.Основной задачей ликвидации ишемии тканей головного мозга является ликвидация лавинообразно образующихся токсических продуктов в кратчайшие сроки, с целью максимального ограничения зоны пенумбры, во избежание массивной гибели клеток головного мозга.

Исследования последних лет в основном посвящены гибели нервной ткани при ишемии и должного внимания не придаётся функциональному состоянию печени.

Целью настоящего исследования явилось изучить интенсивность генерации активных форм кислорода в митохондриальной фракции гепатоцитов на ранних сроках церебрального ишемического инсульта в эксперименте.

Материалы и методы исследования. В эксперименте воспроизводилось клипирование сонной артерии для создания механизма реперфузионного повреждения головного мозга. Все процедуры эксперимента соответствовали требованиям Международных правил гуманного отношения к животным, отраженным в Санитарных правилах по оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев). Выбор объекта эксперимента был обусловлен сходством ангиоархитектоники головного мозга лабораторных белых крыс породы Вистар и человека, а также близостью основных гемодинамических параметров.

Использованые животные массой 150-180 грамм в возрасте 4-7 месяцев были разделены на 2 группы: 1-ую группу составили 8 крыс, которым производили кожный разрез области шеи над сонной артерией с одной стороны (слева) с последующим ушиванием кожи (ложнооперированные), 2-ую группу составили 9 крыс, которым вскрывалась левая сонная артерия, производилось клипироване в течение 20 минут с последующей реперфузией и полным восстановлением мозгового кровотока.

Исследования проведены через 1, 3 и 7 дней после ишемии-реперфузии. Верификация ишемического инсульта подтверждалась на основании просмотра светооптических препаратов окрашенных по Нисслю. Гомогенат получали в гомогенизаторе Поттера с последующим дифференциальным центрифугированием. В ресуспензии митохондриальной фракции определяли содержание малонового диальдегида (МДА) по методу Стальной И.Т. и соавтора, содержание среднемолекулярных пептидов (СМП) по методу Габриэлян. Полученные результаты пересчитывались на количество общего белка (Lowry H.).

Полученные результаты и их обсуждение. В ранние сроки исследования в митохондриальной фракции гепатоцитов обнаружено значительное увеличение содержания МДА, превышавший уровень контроля в 2,3 раза. Видимо, данное увеличение МДА, связано с увеличением количества данного продукта расщепления молекул липидной природы вымываемого из тканей головного мозга и/или запуском увеличения активных форм кислорода (АФК) в результате реперфузии. В последующие сроки исследования накопление МДА в митохондриальной фракции гепатоцитов снижалось и не достигало уровня контроля. На ранних сроках экспериментального ишемического инсульта у крыс обнаруживают очаговые пролиферативные изменения внутри долек печени, чётко отграниченные инфильтраты из клеток, что явилось, видимо, пусковым механизмом генерации АФК.

Наряду с повреждением молекул липидной природы нами обнаружено увеличение содержания в митохондриальной фракции СМП, продуктов распада молекул белковой природы. Количество СМП было выше уровня контроля в 2,1- 3,2 раза. В последующие сроки исследования количество СМП снижалось, но не достигало уровня контроля. Состояние равновесия генерации АФК и мощности антиокислительной системы определяют исход патологического процесса. Выводы. При экспериментальной ишемии реперфузии головного мозга наблюдаются изменения в гепатоцитах, сопровождающиеся усилением генерации АФК, накоплением МДА и СМП.