Машарипов С.М. Курбанова Н.Н.

Ташкентская медицинская академия, Ургенчский филиал

Антиоксидантная система митохондриальной фракции гепатоцитов на ранних сроках экспериментального ишемичесого инсульта.

Актуальность проблемы. При развитии ишемии тканей головного мозга накапливаются метаболиты взоимодействия активных форм кислорода с макромолекулами белковой и липидной природы. Основной проблемой реабилитационных мероприятий является ликвидация последствий ишемии реперфузии тканей головного мозга, где наиболее важным направлением представляет ликвидирование воздействия токсических продуктов на органы и ткани всего организма. Исследования последних лет в основном посвящены гибели нервной ткани при ишемии и не придаётся должного внимания функциональному антиоксидантной системе.

Целью настоящего исследования явилось изучить биохимические особенности состояния антиоксидантной системы митохондрий гепатоцитов на ранних сроках ишемии-реперфузии головного мозга при экспериментальном ишемическом инсульте.

Материалы и методы исследования. В эксперименте воспроизводилось клипирование сонной артерии для создания механизма реперфузионного повреждения головного мозга. Все процедуры эксперимента соответствовали требованиям Международных правил гуманного отношения к животным, отраженным в Санитарных правилах по оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев).

Использованные животные массой 150-180 грамм в возрасте 4-7 месяцев были разделены на 2 группы: 1-ую группу составили 8 крыс, которым производили кожный разрез области шеи над сонной артерией с одной стороны (слева) с последующим ушиванием кожи (ложнооперированные), 2-ую группу составили 9 крыс, которым вскрывалась левая сонная артерия, производилось клипироване в течение 20 минут с последующей реперфузией и полным восстановлением мозгового кровотока.

Исследования проведены через 1, 3 и 7 дней после ишемии-реперфузии. Верификация ишемического инсульта подтверждалась на основании просмотра светооптических препаратов окрашенных по Нисслю. Гомогенат получали в гомогенизаторе Поттера с последующим дифференциальным центрифугированием. В ресуспензии митохондриальной фракции определяли активность каталазы по методу Королюк, активность супероксиддисмутазы по методу Брусова. Полученные результаты пересчитывались на количество общего белка (Lowry H.). Полученные результаты. Изучение активности каталазы в митохондриальной фракции гепатоцитов в ранние сроки ишемии – реперфузии оказало увеличение активности фермента относительно контроля в 1,8 раза. В последующие сроки исследования отмечено значительное снижение фермента антипероксидной защиты.

Активность СОД в митохондриальной фракции было снижено в ранние сроки исследования в 1,6 раза относительно уровня контроля. В последующие сроки исследования активность фермента оставалась на стабильно низком уровне. Многими авторами неоднократно подчёркивалось, что в патогенезе раннего периода церебрального ишемического инсульта существенную роль играют нарушения функций печени, нередко приводящие к гибели больного при прогрессировании положительной динамики неврологического статуса. Видимо в генезе летального исхода определенная роль принадлежит к сдвигам в биохимическом статусе печени, в частности митохондриальной фракции гепатоцитов. Выводы. В результате ишемии реперфузии головного мозга в митохондриальной фракции гепатоцитов активность каталазы увеличена, тогда как активность СОД снижена на всем протяжении эксперимента.

Выводы. Изучена антиокислительная активность митохондриальной фракции гепатоцитов в ранние сроки экспериментальной ишемии реперфузии головного мозга. В митохондриальной фракции печени после ишемии реперфузии головного мозга наблюдалось увеличение антипероксидной активности и снижение активности супероксиддисмутазы в раннае сроки эксперимента. В митохондриальной фракции печени активность ферментов антипероксидной системы увеличивалась и отмечалось снижение фермента антирадикальной защиты с наибольшим отклонением до 6 часов после реперфузии.

Литература.

1. Пирадов М.А. Интенсивная терапия инсульта: взгляд на проблему. //Анналы клин. и эксперим. неврологии, 2007.- 1(1).-с. 17–22.

2. Keir S.L., Wardlaw J.M. Systematic review of diffusion and perfusion imaging in acute ischemic stroke.// Stroke.-2000.- 31(11).-р. 2723–2731.

3. Saver J.L., Wilterdink J. Choline precursors in acute and subacute human stroke: a meta-analysis.// Stroke.-2002.- 33.-р.- 353-358.

4. Хайбуллина З.Р., Ибрагимов У.К. Известные молекулярные механизмы нейронального повреждения при гипоксии мозга плода, обзорная статья // Медицинский журнал Узбекистана.-2009.-№2.-с.64-72.

5. Клиническая детская неврология./Под ред. А.С. Петрухина: Руководство.-М.:ОАО «Издательство «Медицина»,2008.-1088 с.

6. Mirsa P.H., Fridovich I. The role of superoxide anion in the antioxidation of epinephrine and a simple assay for superoxide dismutase. // J. Biol. Chem. - 1972. - V. 247.- №10.- P.3170-3175.

7. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Ф. Метод определения каталазы.// Лаб. Дело.-1988.-С. 16-19.

8. Хайбуллина З.Р., Ибрагимов У.К., Салихова С.Р., Муфаздалов Ш.А. Реакция клеточных элементов крови на общую гипоксию организма.//Патология.-Ташкент.-2010.-№1.-с.27-36.

9. Ибрагимов К.У., Хайбуллина З.Р. Состояние микросомальной и митохондриальной фракций печени при экспериментальной ишемии мозга у крыс.// Вестник РГМУ. Журнал Всероссийского Государственного медицинского университета. 2009,-№3.-стр. 243.

10. Хайбуллина З.Р., Ибрагимов У.К., Аскарьянц В.П., Бабаджанова Ф.А., Хамраев У.А. Современные концепции механизма действия антиоксидантов и некоторые аспекты использования кислорода в живых клетках.//Вестник врача общей практики.-2010.-№ 3-4.-Самарканд.-с. 100-102.