Медицина/8.Морфология

К.мед.н. Ульянова Н.А.¹, д.мед.н. Венгер Л.В.¹, д.мед.н. Думброва Н.Е.², к.биол.н. Молчанюк Н.И.²

Одесский национальный медицинский университет, Украина¹, НИИ глазных болезней и тканевой терапии им. В.П. Филатова Украина²

Ультраструктурные изменения сетчатки при экспериментальной депривационной миопии

Цель: исследовать ультраструктурные перестройки сетчатки при моделировании депривационной миопии.

Материалы и методы. Экспериментальные исследования проведены на 24 крысах линии Вистар содержавшихся в стандартных условиях экспериментально-биологической клиники Одесского национального медицинского университета. Все экспериментальные исследования проведены с соблюдением принципов биоэтики, изложенных в Хельсинской декларации и Законе Украины «О защите животных от жестокого отношения» (№ 1759-VI от 15.12.2009).

У животных, по достижению возраста 14 дней, моделировали депривационную миопию, путем блефарорафии одного из глаз. Через 14 дней после блефарорафии, животных выводили из эксперимента. Возраст животных на момент выведения из эксперимента составил 30 дней.

Для электронно-микроскопического исследования кусочки ткани склеры фиксировались в 2,5 % растворе глютаральдегида на фосфатном буфере при значении рН - 7,4 с последующей дофиксацией 1 % раствором осмиевой кислоты при том же рН буферного раствора. Затем образцы обезвоживались в спиртах восходящей крепости. Пропитывание материала и его заключение производилось в смеси эпон-аралдит. Затем ультратонкие срезы контрастировали по методике Reynolds. Просматривались и фотографировались срезы в электронном микроскопе ПЭМ-100-01.

Результаты. В результате проведенных исследований дана ультраструктурная характеристика сетчатки интактных 30-ти дневных крыс. Клетки пигментного эпителия сетчатки содержат обильную цитоплазму, заполненную элементами мелковезикулярной гладкой эндоплазматической сети, крупными митохондриями и другими типичными для этих клеток органеллами. В них хорошо выражена базальная складчатость и апикальная область с микровиллами, формирующими фагосомы. Все отделы фоторецепторных клеток сформированы, имеют типичную ультраструктуру. Элементы внутренних слоёв сетчатки не изменены.

У животных с экспериментальной миопией выявлены дистрофические изменения в сетчатке. В экваториальной области клетки пигментного эпителия крупные с обильной цитоплазмой с большим количеством органелл. Встречаются двуядерные клетки. В цитоплазме отдельных клеток наблюдали довольно крупные, связанные друг с другом, электронно-прозрачные полости. В фоторецепторных клетках наружные сегменты сформированы не полностью: отмечается недоразвитие дисков в наружных сегментах, которые ещё находятся на стадии пузырьков. Во внутреннем слое содержится сравнительно мало митохондрий и много элементов гладкой эндоплазматической сети. Ядра фоторецепторных клеток расположены в виде столбиков, не изменены, однако, на отдельных участках встречается отёк ядерной области и атрофия других отделов фоторецепторных клеток. Отростки мюллеровских клеток содержат электронно-прозрачную цитоплазму с очень небольшим числом органелл. Слой биполярных клеток сформирован, здесь же располагаются ядра мюллеровских клеток с нормальной ультраструктурой. Сетчатые слои также сформированы, содержат микрососуды. Ганглиозные клетки крупные, с большим количеством белоксинтезирующих органелл. Отростки мюллеровских клеток в этой области довольно электронно-плотные и содержат мелкую вакуолизированную цитоплазму.

В свою очередь в сетчатке перипапиллярной зоны клетки пигментного эпителия содержат обильную цитоплазму с большим количеством органелл. В клетках хорошо выражены апикальная и центральная зоны, в то же время базальная складчатость укорочена. Складки рыхлые, местами совсем не выражены. В базальной области клеток встречаются очаги деструкции цитоплазматических органелл. Слои сетчатки, лежащие субэпителиально представляют собой массивы из внутренних сегментов и других отделов фоторецепторных клеток, расположенных беспорядочно. Здесь же встречаются отростки нейронов, синаптические окончания. Другие элементы внутренних слоёв сетчатки практически не встречаются, кроме отростков мюллеровских клеток.

Таким образом, по сравнению с интактной сетчаткой, у крыс с моделью миопии отмечаются признаки гидропических изменений цитоплазматических структур клеток пигментного эпителия. В фоторецепторных клетках отмечается недоразвитие части дисков в наружных сегментах, во внутренних сегментах содержится сравнительно меньшее количество митохондрий, основу составляет цитоплазма с небольшим количеством органелл. Ядерная область фоторецепторных клеток и остальные слои сетчатки практически не отличается от ультраструктуры сетчатки интактного животного. Следует отметить, что на отдельных участках наблюдаются отёчные изменения в области ядер и синапсов ганглиозных клеток.

Заключение. Моделирование депривационной миопии сопровождается дистрофическими изменениями в сетчатке, преимущественно пигментного эпителия и фоторецепторных клеток. Наблюдается внутриклеточный отек, разрушение органелл. Обнаруженные нарушения структуры наиболее выражены в перипапиллярных областях сетчатки и минимальны в экваториальной области.