УДК: 619:615.3+619:615.9

Тарасова Е.Ю., Тремасов М.Я.

Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности

Биохимические показатели белых крыс при Т-2 микотоксикозе на фоне лечения

При анализе кормов, растительности, различной сельскохозяйственной продукции, продуктов питания выявляется высокая (до 80-100%) загрязненность микроскопическими грибами, в 40-60% случаев – токсигенными, в 21% - выделялись микотоксины в опасных для здоровья концентрациях. Исследования отечественных и зарубежных ученых показывают, что животноводство несет серьезные экономические потери от снижения продуктивности и воспроизводства сельскохозяйственных животных, возникающих при микотоксикозах.

Одним из наиболее токсичных представителей трихотеценовых микотоксинов является Т-2 токсин.

Однако до сих пор не разработаны антидоты, не систематизирован подбор препаратов, повышающих устойчивость организма к микотоксинам. В связи с этим актуальным является изыскание новых лечебных препаратов при микотоксикозах.

На основании ранее проведенных исследований из целого ряда препаратов различных групп, в качестве потенциальных антидотов Т-2 токсина, были отобраны новый энтеросорбент - древесный уголь, представляющий собой нанопористый углеродный адсорбент, и антиоксидант (мексидол), как средства, показавшие самый высокий защитный эффект.

Поэтому целью наших исследований явилась возможность применения для лечения острого Т-2 микотоксикоза древесного угля марки БАУ-А (производство ООО НТЦ «Химинвест») и антиоксиданта мексидола.

Материалы и методы. Лечебную эффективность мексидола и древесного угля изучали на 192 белых нелинейных крысах, живой массой 150-170 г., обоего пола, разделенных по принципу аналогов на контрольную и опытные группы.

Первая группа служила биологическим контролем и получала соответствующее количество 5%-ного водно-спиртового раствора, не содержащего Т-2 токсин; животным третьей и четвертой групп внутрижелудочно вводили водно-спиртовой раствор Т-2 токсина в дозе ЛД₅₀, после этого задавали энтеросорбент (древесный уголь марки БАУ-А) в дозе 1000 мг/кг массы тела в болюсах и мексидол внутримышечно в дозе 10 мг/кг через определенные промежутки времени: 3 гр. – через 1 ч, 4 гр. – через 3 ч после введения Т-2 токсина. Животные второй группы получали аналогичное количество водно-спиртового раствора Т-2 токсина. Взятие крови для биохимических исследований проводили путем декапитации через 1, 3, 6, 24, 48, 72 часа.

Содержание общего белка устанавливали рефрактометрически, количественное соотношение белковых фракций - нефелометрически, активность холинэстеразы по методу Хестрина в модификации Панюкова П.Н.

Активность аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, креатинкиназы, лактатдегидрогеназы, щелочной фосфатазы определяли на анализаторе «EXPRESS PLUS».

Результаты исследований. Уровень общего белка, начиная с первых часов исследования, увеличивался. К 6 ч исследования на 12,3% (р<0,05) во второй группе животных, на 1,9% в третьей группе и на 8,6% в четвертой. Но по истечении первых суток данный показатель снижался, особенно в группе крыс без применения лекарственных средств. Так содержание общего белка к 72 ч снижалось в этих же группах на 8,9; 1,2 и 4,9% соответственно по сравнению с контролем.

Процентное содержание в белке альбуминов к 6 ч исследования во всех группах крыс было незначительно выше, чем в контрольной группе. Однако через 24 ч отмечалось резкое снижение этого показателя на 17,2% (р<0,05) во второй группе; 9,0 и 13,8% (р<0,05) соответственно в третьей и четвертой группах крыс. В течение последующих двух суток происходило дальнейшее уменьшение содержания альбуминов. Так на 2 и 3 сут данный показатель был ниже контрольных значений во всех группах на 25,8 (р<0,01), 18,3 (р<0,05), 21,4 (р<0,01) и 35,4 (р<0,001), 19,4 (р<0,05), 28,9% (р<0,01) соответственно.

Количество α-глобулинов в первые часы опыта снижалось, а затем к 24 ч увеличивалось во второй группе на 20,8% (р<0,01), третьей группе – 14,3% (р<0,05), четвертой группе – 19,2% (р<0,05). На 3 сут содержание α-глобулинов оставалось повышенным в этих же группах на 13,6 (р<0,05), 8,5 и 11,8% (р<0,05) соответственно.

В отношении β-глобулинов отмечалось значительное повышение в течение всего времени исследования, которое достигло своего максимума к 3 суткам. Так в группе крыс, получавшей Т-2 токсин без лечения оно составило 118,5% (р<0,001), в третьей группе – 68,3% (р<0,01), в группе крыс, в которой к лечению приступали через 3 ч – 98,2% (р<0,001) соответственно.

В содержании γ-глобулинов наблюдалось постепенное снижение во все сроки эксперимента. Данная фракция белка достоверно снизилась во второй и четвертой группах на 13,8 (р<0,05) и 11,3% (р<0,05) соответственно уже на вторые сутки исследования. Достоверное снижение этого показателя в группе крыс на фоне применения мексидола и древесного угля через час после затравки Т-2 токсином в среднесмертельной дозе произошло только на 3 сут и составило 12,5 % (р<0,05) против 18,4 (р<0,05) и 16,1% (р<0,05) соответственно во второй и четвертой группах.

В группе крыс, получавших только Т-2 токсин, активность АЛТ к 1 сут была выше контроля на 58,2% (р<0,001), к 2 сут – на 44,6% (р<0,001), к 3 сут – на 28,3% (р<0,01). В группе крыс, к лечению которых приступали через час после затравки Т-2 токсином, активность данного фермента к 1 сут исследования увеличилась на 32,6% (р<0,01), к 2 сут – на 19,3% (р<0,05) и к 3 сут была незначительно выше показателей первой группы крыс. В группе животных, к лечению которых приступали через 3 ч, активность АЛТ к 1 сут повысилась на 41,2% (р<0,001), к 2 сут – на 25,4% (р<0,01) и к 3 сут – на 16,1% (р<0,05) относительно контрольных значений.

Активность АСТ во второй группе животных в течение эксперимента была достоверно выше контрольных данных на 33,8 (р<0,001), 25,3 (р<0,01), 14,9% (р<0,05) соответственно на 1, 2 и 3 сутки. В третьей и четвертой группах крыс достоверное увеличение активности данного фермента на 17,9 (р<0,05) и 25,4% (р<0,01) соответственно происходило только на 1 сут исследования. В дальнейшем активность АСТ снижалась и на 3 сут была выше относительно показателей первой группы на 3,2 и 5,4% соответственно.

В группе крыс без лечения активность креатинкиназы увеличилась по сравнению с контролем к 1 сут – на 43,4% (р<0,001), к 2 сут – на 39,1% (р<0,001) и к 3 сут – на 25,2% (р<0,01). В четвертой группе содержание креатинкиназы на 1, 2 и 3 сут повысилось на 31,2 (р<0,01), 23,8 (р<0,05) и 18,9% соответственно. У крыс третьей группы уровень активности данного фермента к 3 сут исследования повысился на 10,6%.

Что касается активности щелочной фосфатазы, то во всех группах крыс она понижалась, причем наиболее сильно в первые сутки эксперимента на 45,6 (р<0,001), 29,6 (р<0,01), 33,5% (р<0,001) соответственно.

Активность фермента ЛДГ в крови крыс второй группы к 1 сут исследования увеличилась на 27,1% (р<0,01), к 2 сут – на 22,6% (р<0,01), к 3 сут – на 18,4% (р<0,05). У животных четвертой группы ЛДГ через 1 сут увеличилась на 20,5% (р<0,01), через 2 сут – на 16,2% (р<0,05), через 3 сут – на 9,5%. Достоверное увеличение данного показателя у крыс третьей группы произошло только на первые сутки опыта и составило 16,5% (р<0,05).

В крови крыс второй группы активность холинэстеразы к 1 сут опыта снизилась на 40,2% (р<0,01), к 2 сут – на 31,9% (р<0,01), к 3 сут – 23,8% (р<0,05) относительно показателей контроля. В группе крыс на фоне применения мексидола и древесного угля через час после затравки Т-2 токсином активность этого фермента в ходе эксперимента подверглась менее существенным колебаниям и к 3 сут была на уровне исходных данных. Достоверное понижение активности холинэстеразы, которое составило 23,2 (р<0,05) и 20,9% (р<0,05), в четвертой группе крыс отмечено только на 1 и 2 сут опыта соответственно.

Концентрация глюкозы в крови крыс второй, третьей и четвертой групп наиболее сильно повышалась через 3 ч после начала опыта на 42,0 (р<0,001), 18,0 (р<0,05) и 35,7% (р<0,001) соответственно. Затем происходило ее постепенное снижение и через 72 ч уровень ее во второй и четвертой группах был ниже контрольных показателей на 15,8 (р<0,05) и 8,4% соответственно. В третьей группе изменения этого показателя были менее значительными и к концу эксперимента наблюдалось его восстановление до исходных данных.

Заключение. Таким образом, проведённые биохимические исследования указывают на эффективность использования, в качестве средств лечения острого Т-2 микотоксикоза, мексидола и древесного угля марки БАУ-А, особенно через час после отравления.