Медицинские науки

Д.м.н. Павлюченко И.И., Шаблин Д.В., к.м.н. Федосов С.Р.

Кубанский государственный медицинский университет, Россия, г. Краснодар

Оценка антиоксидантной активности пектиновых пленок с аминофталгидразидом, применяемых для местного лечения ран в экспериментальных моделях in vivo.

Одним из частых осложнений варикозной и посттромботической болезней нижних конечностей являются трофические язвы. Частота заболевания в России и Западной Европе составляет от 1% до 4% населения и остается неизменной многие годы (Оболенский В.Н. и соавт., 2009; Седов В.М., 2009; Abbade LP, et al, 2005; Sasanka S., 2012). В 1992 г. итоговый доклад группы международных экспертов по венозным трофическим язвам (Alexander House Group) показал, что 85% трофических язв при ХВН можно закрыть с помощью консервативной терапии. В животном мире смоделировать трофические язвы не представляется возможным. Можно воспроизвести длительно незаживающую рану [Суисси Ю.Ю., 2006]. Возникает необходимость исследования и оценки в эксперименте новых препаратов, обладающих пролонгированным направленным ранозаживляющим и антимикробным действием.

Цель исследования: оценить антиоксидантную активность (АОА) пектиновых пленок с фиксированными на них иммуномодулятором аминофталгидразидом в эксперименте.

Материалы и методы: Оценку АОА пектиновых пленок производили на модели полнослойной кожной раны у лабораторных крыс (15 беспородных крысы мужского пола). Крысы были разделены на 3 группы: в контрольной группе лечение осуществлялось физиологическим раствором хлорида натрия, в группе №1 – «свекловичным пектином», в группе №2 – «подсолнечниковым пектином», в группе №3 - «пектином свекловичным с аминофталгидразидом». Экссудат полнослойной кожной раны забирался на 3, 7, и 10 сутки от формирования раны.

Результаты: об АОА применяемых мазей судили по изменению активности супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы (КАТ), интенсивности хемилюминесценции, способности окисляться под воздействием постоянного электрического тока. АОА экссудата раны, измеренная амперометрическим методом (таб. 1), в группе «свекловичный пектин» и в группе «подсолнечниковый пектин» уже ко 2 суткам характеризовалась статистически достоверным снижением в сравнении с группами «контроль» и «пектин с аминофталгидразидом». Это служит отражением снижения напряженности оксидативных процессов в ране, отражает усиливающиеся репаративные процессы. Длительное сохранение высоких показателей антиокислительной активности в группе «пектин свекловичный с аминофталгидразидом» определяется высокими антиоксидантными свойствами действующего агента этой комбинации — аминофталгидразида. К 4 суткам наименьшая антиокислительная активность зафиксирована в группе «пектин с аминофталгидразидом», что характеризует быстрое завершение гнойно-некротической фазы и переход в фазу грануляций. Статистически значимого отличия от групп «свекловичный пектин» и «подсолнечниковый пектин» к этому временному интервалу не наблюдалось.

Таблица 1

Динамика амперометрической антиокислительной активности раневого экссудата у животных различных групп в эксперименте (мг/л витамина С)

Временной интервал (сутки)

Свекловичный пектин

Подсолнечниковый пектин

Пектин с аминофтал-гидразидом

Контрольная группа

3-е

0.364

0.035

0.380

0.038

0.340

0.034

0.348

0.049

7-е

0.202

0.027*^

0.228

0.021^*

0.382

0.034^

0.382

0.034

10-е

0.140

0.025

0.144

0.022

0.160

0.029

0.182

0.026

14-е

0.064

0.022*

0.090

0.016*

0.036

0.021^

0.108

0.033

* - статистически значимые различия при сравнении с группой «пектин с аминофталгидразидом» (критерий Вилкоксона, p<0,05).

^ - статистически значимые различия при сравнении с контрольной группой (критерий Вилкоксона, p<0,05).

Динамика максимума быстрой вспышки хемилюминесценции (БВХЛ) экссудата раны (таб. 2) в группах «свекловичный пектин» и «подсолнечниковый пектин» характеризовалась монотонным снижением. Напротив, в группе «пектин с аминофталгидразидом» зарегистрирована двухфазная динамика: увеличение максимума быстрой вспышки хемилюминесценции на 2-е сутки сменялось быстрой убылью, которая к 3 суткам вывела эту группу в лидеры по скорости и абсолютным значениям этого показателя. Различия между группой «контроль» и группами «пектин» имели статистическую значимость только на 2-е сутки. Группа «пектин с аминофталгидразидом» имела статистически значимые различия со всеми группами со 2-х до 4-х суток

Таблица 2

Динамика максимума быстрой вспышки раневого экссудата у животных различных групп в эксперименте (% ингибирования)

Временной интервал (сутки)

Свекловичный пектин

Подсолнечниковый пектин

Пектин с аминофталгидразидом

Контрольная группа

3-е

23.94

2.12

26.34

1.62

26.34

2.32

25.30

2.57

7-е

18.50

2.15*^

18.14

2.93*^

31.32

3.28^

26.10

2.14

10-е

15.42

2.31*

14.00

2.46*

10.62

1.94^

16.98

3.38

14-е

10.68

2.45*

10.54

2.66*

5.48

1.66^

13.28

2.43

* - статистически значимые различия при сравнении с группой «пектин с тамеритом» (критерий Вилкоксона, p<0,05).

^ - статистически значимые различия при сравнении с контрольной группой (критерий Вилкоксона, p<0,05).

Активность КАТ экссудата (таб. 3) в группах «пектин» снижалась быстрее, чем в контрольной группе (статистически достоверно, p<0.05). Наибольшая скорость снижения активности каталазы зафиксирована на 3-е сутки в группе «пектин свекловичный с аминофталгидразидом».

Таблица 3

Динамика активности каталазы раневого экссудата у животных различных групп в эксперименте (ед. акт.)

Временной интервал (сутки)

Свекловичный пектин

Подсолнечниковый пектин

Пектин с аминофтал-

гидразидом

Контрольная группа

3-е

0.0870

0.0231

0.0902

0.0168

0.0838

0.0133

0.0870

0.0272

7-е

0.1170

0.0135^

0.1200

0.0096^

0.1124

0.0125^

0.1422

0.0079

10-е

0.1100

0.0121*^

0.1150

0.0132*^

0.0868

0.0158^

0.1588

0.0116

14-е

0.0850

0.0125

0.0788

0.0227

0.0566

0.0200

0.0784

0.0129

^ - статистически значимые различия при сравнении с контрольной группой (критерий Вилкоксона, p<0,05).

Активность супероксиддисмутазы экссудата (таб. 4) имела двухфазную динамику во всех группах: рост этого показателя после 2-х суток сменялся снижением. Наименьший рост и наибольшая скорость последующего снижения отмечена в группе «пектин с аминофталгидразидом» (p<0,05). С меньшей скоростью активность СОД снижалась в группах «свекловичный пектин» и «подсолнечниковый пектин» (p<0,05).

Таблица 4

Динамика активности супероксиддисмутазы раневого экссудата у животных различных групп в эксперименте (ед. акт.)

Временной интервал (сутки)

Свекловичный пектин

Подсолнечниковый пектин

Пектин с аминофталгидразидом

Контрольная группа

3-е

0.1322

0.0178

0.1366

0.0067

0.1360

0.0106

0.1378

0.0096

7-е

0.2132

0.0211*^

0.2342

0.0273*^

0.1884

0.0117^

0.3038

0.0167

10-е

0.1852

0.0123*^

0.1760

0.0269*^

0.1000

0.0096^

0.1280

0.0146

14-е

0.1138

0.0111*^

0.0980

0.0137*

0.0568

0.0141^

0.0856

0.0156

^ - статистически значимые различия при сравнении с контрольной группой (критерий Вилкоксона, p<0,05).

Выводы: Анализируя динамику активности основных ферментов системы антиоксидантной защиты, нельзя не отметить, что наиболее благоприятное комплексное действие на них оказал «пектин с аминофталгидразидом», который замедлял рост активности СОД в первые сутки раневого процесса, ускорял ее снижение в дальнейшем, что в сочетании с умеренным снижением активности КАТ отражает выраженное снижение оксидативных процессов в ране как проявление купирования воспалительной реакции. Использование препаратов пектина без действующего агента оказывало значительно меньшее влияние на активность указанных выше ферментов. По совокупности оцениваемых показателей АОА протестированных препаратов наибольшая оказалась у пектиновой пленки с аминофталгидразидом, что обусловлено наличием в ее составе вещества с высокой антиоксидантной активностью - аминофталгидразида. Несколько меньшая антиокислительная активность отмечена у свекловичного пектина и подсолнечникового пектина, которые к тому же не имели значимых различий между собой во всех выполненных методиках диагностики состояния антиоксидантной системы в модельных ранах.

Литература:

1. Оболенский В. Н. Трофические язвы нижних конечностей - обзор проблемы / В. Н. Оболенский, Г. В. Родоман, В. Г. Никитин, М. А. Карев // Рус. мед. журн. – 2009. - № 25. - С. 1647-1663.

2. Седов В. М. Новые отечественные раневые покрытия «Хитоскин-колл » в лечении трофических язв нижних конечностей / В. М Седов, Д. Ю. Андреев, Б. А. Парамонов, С. Ф. Антонов // Регионар. кровообращение и микроциркуляция. – 2011. – Т. 10, № 2(38). – С. 58-63.

3. Abbade L. P. Venous ulcer: epidemiology, physiopathology, diagnosis and treatment / L. P. Abbade, S. Lastoria // Int. J. Dermatol. – 2005. - N 44. - P. 449–56.

4. Sasanka S., Chatterjee SS. Venous ulcers of the lower limb: Where do we stand?/ S. Sasanka., SS. Chatterjee // Indian J Plast Surg. – 2012. - May- Aug 45(2), doi: 10.4103/0970-0358.101294

5. Суисси Ю. Ю. Обоснование и оценка эффективности применения сорбирующих лекарственных средств и раневых покрытий в местном лечении ран и трофических язв : автореф. дис. … канд. мед. наук. - СПб., 2006. - 20 с.