Медицина/ 1. Акушерство и гинекология

К.м.н. Дорофиенко Н.Н.

ФГБУ «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» СО РАМН, Благовещенск, Россия

Особенности процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у беременных с цитомегаловирусной инфекцией и их новорожденных

В последние годы в структуре инфекционной патологии новорожденных все большее значение приобретают инфекции вирусной этиологии [1, 8]. Так, среди новорожденных с внутриутробной инфекцией моноинфекция выявлена у 34% детей, смешанная – у 66%, причем значительную долю составляет сочетание таких ДНК-вирусных инфекций, как цитомегаловируса (ЦМВ), так и инфекции, вызванной вирусом простого герпеса [7].

Инфекция может явиться причиной широкого спектра перинатальной патологии: инфекционное заболевание плода и новорожденного, пороков его развития, мертворождений, недонашивания, развития фетоплацентарной недостаточности, задержки внутриутробного развития плода [3]. Считают, что новорожденные дети, внутриутробное развитие которых протекало в условиях хронической плацентарной недостаточности, подвержены высокому риску реализации токсического действия активных форм кислорода и продуктов их метаболизма [6]. В связи с этим представляет интерес изучение процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной защиты (АОЗ) в периферической крови беременной и крови пуповины новорожденных с цитомегаловирусной инфекцией (ЦМВИ).

Материалы и методы исследования

Изучены биохимические параметры, характеризующие процессы ПОЛ и АОЗ у 35 беременных с ЦМВИ в III триместре (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600) и их новорожденных – основная группа и 35 женщин и новорожденных без данной патологии – контрольная группа.

Симптоматически ЦМВИ проявлялась в виде острого респираторного заболевания, сопровождающегося ринофарингитом. Клинический диагноз – обострение ЦМВИ – устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgМ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также ДНК ЦМВ. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск). Выявление ДНК ЦМВ методами ПЦР выполняли на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

Материалом исследования служили мембраны эритроцитов и плазма периферической крови беременных и крови пуповины новорожденных. Интенсивность процессов ПОЛ оценивали по содержанию ТБК-активных продуктов (ТБК-АП), концентрацию которых определяли с применением тиобарбитуровой кислоты [4]. Содержание лизофосфатидидхолина (ЛФХ) в мембранах эритроцитов определяли методом тонкослойной хроматографии [5], концентрацию арахидоновой кислоты методом газожидкостной хроматографии. Об активности АОЗ судили по содержанию α-токоферола [10].

Все расчеты проводились с использованием программного обеспечения Statistica 6,0. Проверку нормальности распределения проводили по критерию Колмагорова-Смирнова, гипотезы о статистической значимости различных двух выборок – с помощью t-критерия Стьюдента. Показатели считали значимыми при p<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Анализ результатов исследования показал, что у беременных с ЦМВИ в мембранах эритроцитов периферической крови отмечалась активация процессов ПОЛ, о чем свидетельствовал рост концентрации ТБК-АП на 37% (p<0,001), по сравнению с показателями контрольной группы (табл. ). При этом в мембранах эритроцитов женщин основной группы выявлялось повышение содержания маркеров мембранодеструкции: арахидоновой кислоты и ЛФХ, на 63% и 67%, соответственно, по сравнению с показателями контрольной группы (табл. ).

Таблица

Показатели ПОЛ и АОЗ в периферической крови беременных и крови пуповины новорожденных с ЦМВИ

Показатель	Периферическая кровь матери		Кровь пуповины
	Контрольная группа	Основная группа	Контрольная группа	Основная группа
ТБК-АП, ммоль/л	10,40±0,11	14,25±0,20, p<0,001	11,40±0,45	24,20±0,60, p<0,001
Арахидоновая кислота,%	3,81±0,41	6,20±0,50, p<0,001	5,60±0,35	8,10±0,24, p<0,001
ЛФХ,%	7,20±1,20	11,30±0,80, p<0,001	6,70±0,10	13,80±0,12 p<0,001
α-токоферол, ммоль/л	1,93±0,07	1,46±0,05, p<0,001	1,84±0,04	1,35±0,03, p<0,01

Примечание: р – уровень значимости различия между показателями с контрольной группой.

В связи с тем, что арахидоновая кислота и ЛФХ являются медиаторами широкого спектра клеточных процессов провоспалительного характера и гемолитическим ядом [2], то избыточное образование данных липидов в крови беременных с ЦМВИ может приводить к тканевому воспалению, нарушению гемостаза и развитию анемии.

Активация процессов ПОЛ у беременных основной группы происходила на фоне угнетения АОЗ, что подтверждалось низкой по сравнению с контролем, концентрацией α-токоферола (табл. ).

Следует отметить, что в крови пуповины новорожденных основной группы концентрация ТБК-АП увеличивалась более чем в 2 раза (p<0,001), при одновременном повышении продуктов липопероксидации: арахидоновой кислоты и ЛФХ (p<0,001), (табл. ). Увеличение содержания ЛФХ способствует разрыхлению гидрофобной области липидного бислоя мембран эритроцитов, стимулирует образование активных форм кислорода. Он способен вызывать явления лизиса в мембране клеток, инициируя их гибель по типу апоптоза [9]. При этом в крови пуповины новорожденных основной группы содержание α-токоферола было снижено на 36% (p<0,01), по сравнению с контролем (табл. ). Результаты изучения динамики продуктов ПОЛ у беременных основной группы показывают высокую роль процессов липопероксидации в развитии окислительного стресса и являются обоснованием применения средств АОЗ.

Заключение: Обострение ЦМВИ в III триместре гестации ассоциируется с активацией процессов ПОЛ не только в периферической крови матери, но и в крови пуповины новорожденных, о чем свидетельствует рост конечных ТБК-АП, маркеров мембранодеструкции: арахидоновой кислоты и ЛФХ при угнетении АОЗ.

Литература

1. Белоусова Т.В., Маринкин И.О., Максутова А.К., Плюшкин В.А. Нарушение системы гемостаза у новорожденных с врожденной генерализованной инфекцией ДНК-вирусной этиологии // Сиб. мед. журнал (Томск). - 2010. -Т. 25, № 1.- С. 57-61.

2. Братусь В.В., Талаева Т.В. Воспаление и проатерогенные нарушения обмена липопротеинов: взаимосвязь и причинно-следственная зависимость (обзор литературы) // Укр. ревматол. журнал. - 2002. - Т. 7, № 1. - С. 13-22.

3. Габидулина Т.В., Тимошина Е.Л., Юрьев С.Ю., Махмутходжаев А.Ш. Влияние урогенитальных инфекций на течение беременности и состояние плода и новорожденного // Бюл. сиб. медицины.- 2002. - № 1.- С. 84-88.

4. Гаврилов В.Г., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Анализ методов определения продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой // Вопр. мед. химии. - 1987. - № 1.- С. 118-121.

5. Кирхер Ю. Тонкослойная хроматография (перевод с английского). - М.:Мир,1981. - С. 52-115.

6. Ковальчук-Ковалевская О.В., Прокопенко В.М., Арутюнян А.В. Особенности перекисного окисления липидов и антиокислительной системы тромбоцитов у детей с задержкой внутриутробного развития // Журнал акуш. и жен. болезней.- 2010.-Т. LIX, № 4.- С. 46-50.

7. Максутова А.К., Белоусова Т.В.. Самсонова Е.Н., Трунов А.Н. Клинико-иммунологические маркеры генерализованных инфекций у новорожденных в зависимости от степени зрелости организма // Бюл. сиб. медицины.- 2008. Т. 7, Прил. 2. - С. 72-78.

8. Ожегов А.М., Мякишева Л.С., Мальцева С.В. Влияние цитомегаловирусной и смешанной с ней хламидийной и микоплазменной инфекции на состояние детей раннего и дошкольного возраста // Рос. вестник перинатол. и педиатрии.- 2001.- № 5. - С. 61-64.

9. Титов В.Н. Диагностическое значение определения содержания фосфолипазы А₂ в липопротеинах плазмы крови и функциональные связи с С-реактивным белком // Клин. лаб. диагностика. 2010. - № 8. - С. 3-16.

10. Hansen L.G., Warwich W.I. Flurometric micromethod for serum tocoferol // Am. J. Chen Pathology. - 1966. - Vol. 46, № 1. - P. 137-138.

Дорофиенко Николай Николаевич – старший научный сотрудник, кандидат медицинских наук лаборатории «Механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при неспецифических заболеваниях легких», ФГБУ «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» СО РАМН, 675000 г. Благовещенск, ул. Калина, 22.