Санжаков М.А., Ипатова О.М., Медведева Н.В., Дружиловская О.С., Захарова Т.С., Тихонова Е.Г., Игнатов Д. В., Торховская Т.И.

Федеральное государственное бюджетное учреждение

“Научно-исследовательский институт биомедицинской химии

имени В.Н. Ореховича", Москва,

Рифампицин, включённый в фосфолипидные наночастицы: изменение фармакокинетических свойств при внутривенном введении

Рифампицин – макроциклический полусинтетический антибиотик, производное природного рифамицина SV – наиболее распространённый препарат современной противотуберкулёзной терапии. Его широкое использование обусловлено возросшей в последнее десятилетие заболеваемостью туберкулёзом. Механизм действия рифампицина заключается в блокировании ДНК-зависимой РНК-полимеразы в клетках возбудителя туберкулёза, Mycobacterium tuberculosis. Недостатком этого препарата являются его побочные действия, в частности, гепатотоксичность и гриппо-подобный синдром. В системном кровотоке основная доля рифампицина связывается с белками плазмы крови, что снижает количество свободного лекарства и, следовательно, его эффективность. Это, наряду с быстрым выведением лекарства, вынуждает прибегать к высоким дозам, повышая тем самым и побочные действия. Их проявление усугубляется необходимостью длительной терапии, более полугода. Поэтому, наряду с поиском новых противотуберкулёзных препаратов, проводятся разработки новых композиций рифампицина с использованием систем доставки, которые позволили бы добиться максимального эффекта при более низких дозировках.

Нами была разработана транспортная система из фосфолипидных наночастиц с размером менее 30 нм с включением рифампицина, на основе соевого фосфатидилхолина более 96 % чистоты (Липоид S-100), с добавлением олеата натрия. Система представляет собой водную эмульсию наночастиц, устойчивую при хранении в форме лиофилизированного порошка. В экспериментах in vitro она показала более выраженное ингибирование роста клеток M.tuberculosis, чем те же дозы свободного рифампицина, а после 6 недель перорального введения мышам, инфицированным штаммом M.tuberculosis Erdman, в лёгких наблюдалось более чем 20-кратное снижение числа колоние-образующих единиц (КОЕ) по сравнению с действием свободного лекарства. В экспериментах in vitro было показано также перераспределение рифампицина от белковой фракции плазмы к липопротеинам, с преимущественной ассоциацией с липопротеинами низкой плотности (ЛНП) (Sanzhakov et al., 2014). Целью настоящей работы было проследить за изменением уровня лекарства в плазме крови и тканях крысы при внутривенном введении .

Препараты рифампицина – свободный и в составе фосфолипидных наночастиц - вводили животным внутривенно в дозе 10 мг/кг. Через 30 минут животных забивали, образцы тканей и плазмы крови экстрагировали метанолом, и в экстрактах определяли уровень рифампицина методом LC/MS на хроматографе Agilent 1200 Series (“Agilent Technologies”, США) с масс-спектрометрическим детектором 6130 Quadrupole LC/MS, с ионизацией электрораспылением.

Через 30 минут после введения наблюдалось большее (на 62%) количество рифампицина в ткани лёгких животных, получивших рифампицин в наночастицах, по сравнению с инъекциями свободного лекарства, наряду с небольшим (на 15%) повышением его уровня в печени (рис. 1).

В этот временной период наблюдалось также большее количество рифампицина в плазме после введения в составе наночастиц, чем

Рис. 1. Содержание рифампицина в тканях крысы через 30 минут после инъекционного введения (НФ – нанофосфолипидные частицы).

после введением свободного лекарства. Через 24 часа показано отсутствие лекарства в плазме, для обоих способов введения (рис 2) .

Рис. 2. Содержание рифампицина в плазме крови

Наблюдаемое повышение поступление рифампицина в ткань лёгких при включении в фосфолипидные наночастицы (рис. 1) может быть следствием как его большей концентрации в плазме крови, так и показанного нами ранее перераспределения рифампицина к ЛНП, способствующего доставке в альвеолярные макрофаги. Это должно способствовать повышению его противотуберкулёзного действия.