Медицина/6. Экспериментальная и клиническая фармакология

Д.б.н. Беленичев И.Ф., д.ф.н. Кучеренко Л.И., Хромылева О.В.,

к.м.н. Бухтиярова Н.В., д.ф.н. Мазур И.А., к.б.н. Моргунцова С.А.

Запорожский государственный медицинский университет, Украина

НПО «Фарматрон» ,г.Запорожье, Украина

СОЗДАНИЕ КОМБИНИРОВАННОГО ПРЕПАРАТА ИЗОНИАЗИДА С ТИОТРИАЗОЛИНОМ (ТРИАТИОЗИД) - ПОВЫШЕНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ТЕРАПИИ

По данным ВОЗ, количество больных туберкулезом растет во всем мире.На планете 2 млрд. инфицированных и 10 млн. больных активными формами этого заболевания (WHO, 2010). С 1952 г. Наиболее активным противотуберкулезным средством I ряда является «Изониазид» [3]. Однако ,длительное применение Изониазида вызывает у больных ряд побочных эффектов со стороны гепатобиллиарной ,ЦНС и сердечно-сосудистой систем [3]. С целью уменьшения негативного влияния Изониазида были попытки включения разных витаминов и метаболитов в состав комбинированных лекарственных средств ,которые, однако, не оправдали возлагаемых надежд. В последнее время прослеживается создание лекарственных средств на основе фиксированных комбинаций, содержащих совместимых по физико-химическим и фармакологическим характеристикам антиоксидант и препарат базовой терапии, что определяет их более высокую , по сравнению с применением в виде отдельных компонентов комплексного лечения, терапевтическую эффективность и безопасность [2]. Нами определено, что наиболее перспективным антиоксидантным компонентом для создания фиксированных комбинаций является тиотриазолин, который обладает поистине уникальными антиоксидантными, гепатопротективными и антитоксическими свойствами, подтвержденными многочисленными экспериментальными и клиническими исследованиями [2].

Цель исследования: изучить общетоксическое действие комбинированной лекарственной формы изониазида и тиотриазолина (4:1) - таблеток «Триатиозид», проявляющих высокую противотуберкулезную активность.

Материалы и методы исследования

В эксперименте использовалось 120 белых беспородных крыс обоего пола массой 140-160 гр., полученных из питомника ГУ «Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины». Все манипуляции были проведены согласно положению об использовании животных в биомедицинских опытах (Страсбург, 1986 г., с изменениями, внесенными в 1998 г.) Определение острой токсичности Изониазида и Триатиозида проводили по методу Кербера в модификации А.О. Лойта и М.Ф. Савченкова при внутрижелудочном пути введения [1]. Также изучали влияние 3-месячного введения препаратов на показатели гепатобиллиарной системы животных. Препараты вводили 1 раз в сутки - изониазид в дозе 100 мг/кг, триатиозид – 100 мг/кг в пересчете на изониазид в виде водных растворов с помощью металлического зонда - 5 мл/кг. Животным контрольной группы вводили физиологоческий раствор . Функциональное состояние печени оценивали согласно рекомендациям ГФЦ МОЗ Украины [1]. Результаты исследования обработаны с применением статистического пакета лицензионной программы «STATISTICA^® for Windows 6.0» (StatSoft Inc., № AXXR712D833214FAN5), а также «SPSS 16.0», «Microsoft Excel 2003». Отдельные статистические процедуры и алгоритмы реализованы в виде специально написанных макросов в соответствующих программах. Для всех видов анализа статистически значимыми считали различия при р<0,05 по критериям Стьюдента и Уитни-Манна.

Результаты и их обсуждение

Результаты исследования острой токсичности показали, что ЛД₅₀ Изониазида при внутрижелудочном введении составляет 1500 ± 347 мг/кг, а Триатиозида - 6691 ± 275 мг/кг, что позволяет отнести его к VI классу токсичности (относительно безвредные вещества). Хроническое (3- месячное ) введение изониазида приводило к стойкой интоксикации , которая характеризовалась гиподинамией, снижением аппетита (уменьшением потребления корма и воды), заторможенностью, взъерошенностью шерсти. Наблюдалась некоторая желтушность слизистых оболочек и склер, увеличение размеров печени. Наблюдалась смертность животных. В группе животных, получавших чистый изониазид в течение 3 месяцев погибло 20% животных. При 90-суточном назначении Изониазида достоверно снижалась масса тела животных. Также во всех группах животных, получавших «Изониазид», наблюдалось снижение потребления воды. Введение комбинированного препарата «Триатиозид» оказывало менее токсическое действие. Биохимические показатели крови животных, получавших «Изониазид» на 90-день эксперимента свидетельствуют о явных нарушениях функции печени. Так, в  данной группе животных отмечалось выраженное повышение активности  ферментов   АЛТ, АСТ , ЛДГ, щелочной (ЩФ) и кислой фосфатазы (КФ) . Это свидетельствовало о нарушении функционального состояния печени и развитии токсического гепатита .

Биохимические показатели крови животных при хроническом введение Изониазида и Триатиозида на 90 день эксперимента

Показатели	контроль	изониазид	триатиозид
Общий билирубин, мкмоль/л	3,1 ± 0,2	6,8 ± 0,38*	3,9 ± 0,3
АЛТ, Ед/л	0,21 ± 0,02	1,89 ± 0,2*	0,77 ± 0,05
АСТ, Ед/л	0,50 ± 0,03	0,98 ± 0,11*	0,75 ± 0,03
ЩФ, Ед/л	0,71 ± 0,1	2,86 ± 0,11*	0,91 ± 0,02
КФ, мкмоль/л	0,71 ± 0,16	2,37 ± 0,19*	0,97 ± 0,06
ЛДГ, моль/ч/л	4,77 ± 0,38	15,11 ± 1,71*	8,34 ± 0,56

*- р ≤ 0,05 по отношению к группе контроля

Хроническое введение комбинированного препарата изониазида и тиотриазолна – «Триатиозида» в дозе 100 мг/кг в пересчете на изониазид не оказывал негативного действия на активность трансаминаз (АлТ и АсТ), Активность других ферментов в группе, получавшей «Триатиозид» также находилась в пределах физиологической нормы . В отличие от введения Изониазида назначение комбинированного препарата «Триатиозид» не вызывали явления холестаза , о чем свидетельствовали содержание билирубина и активность щелочной фосфатазы, которые не отличались от аналогичных , в группе контроля.   Щелочная фосфатаза  находится на поверхности клеточных мембран и особенно много ее находится в желчных протоках печени, что свидетельствует об отсутствие негативного действия «Триатиозида» на процессы фосфорилирования  мембранах клеток в отличие от изониазида. Таким образом, кобинирование изониазида с тиотриазолином и создание таблеток «Триатиозид» приводит к снижению показателей острой токсичности и гепатоксического действия Изониазида.

Литература

1. Стефанов А.В. Доклинические исследования лекарственных средств.- Киев: Авиценна, 2002.-568 с.

2. Мазур И.А. ,Чекман И.С., Беленичев И.Ф. Метаболитотропные препараты.-Запорожье,2007.-309 с.

3. Lee S., Chung L., Huang H. et al. Anti-tuberculosis drug-induced hepatitis // Int. J. Tuberc. Lung. Dis.- 2010. -V. 14, № 5. -P. 622–626.