Медицина/8. Морфология

УДК 591.446:615.37

К. мед. н. Петизина О. Н.

ГЗ «Луганский государственный медицинский университет», кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии, г. Луганск, Украина.

ОСОБЕННОСТИ ОРГАНОМЕТРИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПОДМЫШЕЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ ПОЛОВОЗРЕЛЫХ КРЫС В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Вступление. Научно-технический прогресс способствует развитию промышленности, это в свою очередь обусловливает загрязнение окружающей среды и как следствие негативное влияние на человека в целом и, в особенности на его иммунную систему [7]. По современным представлениям, любые структурно-функциональные изменения в большинстве своем являются компенсаторно-приспособительными и направлены на поддержание гомеостаза. Основная гомеостатическая роль в этих процессах принадлежит иммунной системе [9]. Лимфатические узлы, как периферические иммунные органы играют основную роль в формировании иммунного ответа. Они являются «биологическими фильтрами» и выполняют функцию периферического звена иммунной защиты организма [1]. Иммунный ответ по клеточному, гуморальному или смешанному типу формируется именно в лимфатических узлах. Поэтому изучение особенностей органометрических показателей лимфатических узлов в условиях иммуносупрессии, а также при коррекции данного состояния при помощи иммуномодулятора, является актуальным[8.

Связь роботы с научными программами, планами. Работа является частью научно-исследовательской темы кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии ГЗ «Луганский государственный медицинский университет» «Особливості будови органів імунної та ендокринної систем при імуностимуляції та імуносупресії», государственный регистрационный номер 0112U000096.

Материалы и методы. Исследование проведено на 54 белых беспородных крысах-самцах в гистологической лаборатории ГЗ «Луганский государственный медицинский университет». В эксперименте использовались половозрелые животные – 210 – 250 г. Для исключения влияния суточных колебаний на изучаемые показатели лимфатических узлов основные манипуляции проводились в утренние часы [5]. Исследование выполнялось в соответствии с принципами Хельсинской декларации, принятой Генеральной ассамблеей Всемирной медицинской ассоциации (2000), Конвенции Совета Европы о правах человека и биомедицины (1997), Международного совета медицинских научных обществ, Международного кодекса медицинской этики (1983), утвержденного I Национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2001). При работе с животными руководствовались Законом Украины «Про захист тварин від жорсткого поводження» от 21.02.2006 р. № 3447, положениями Европейского научного сообщества «Использование животных в исследованиях» (2000) [4]. В эксперименте были изучены подмышечные лимфатические узлы (ЛУ) интактных крыс (И), а так же в условиях иммуносупрессивного состояния (ЦФ) и при коррекции данного состояния с помощью имунофана (ЦФ/ИМ). Для создания иммуносупрессивного состояния использовали циклофосфан, он является алкилирующим цитостатическим препаратом. Эффект высоких доз препарата заключается в его способности останавливать пролиферацию любых клеток, способных к быстрому делению, в том числе иммунных [8]. Препарат вводили животным однократно, внутримышечно, в дозе 200 мг/кг. Ряд авторов, исследовавших действие циклофосфана на иммунные органы, пришли к выводу, что такая дозировка приводит к наиболее быстрым и выраженным изменениям [5]. По данным литературы однократное введение высокой дозы циклофосфана (200мг/кг) приводит к выраженной иммуносупрессии уже в течение первых 24 часов [6]. Имунофан представляет собой гексапептид, его структура соответствует аминокислотной последовательности тимического пептида тимопоэтина. Препарат сохраняет специфическую активность природного гормона и на фоне иммунодефицитных состояний способен восстанавливать продукцию тимического гормона – тимулина. Имунофан используют в терапии инфекционных и неинфекционных заболеваний, а также в комплексной терапии онкопатологии для снятия симптомов интоксикации после облучения и химиотерапии [3]. По этой причине схема введения имунофана, с целью коррекции иммуносупрессии, на 1, 3, 5, 7, 9 сутки после введения циклофосфана по 0,7 мкг/кг внутримышечно, является обоснованной [6].

Животных выводили из эксперимента при помощи ингаляционного наркоза хлороформом с последующей декапитацией. Затем выделяли из подмышечной области лимфатические узлы (рис.1) и отделяли их от подкожно-жировой клетчатки.

Рис.1. Лимфатический узел половозрелой крысы в правой подмышечной области.

После чего на торсионных весах WT – 1000 определяли абсолютную массу органа, с помощью штангенциркуля измеряли длину, ширину и толщину. Полученные данные заносили в программу Microsoft Office Excel для сохранения. Статистическую обработку данных исследования производили при помощи пакета прикладных статистических программ «Statistica 5.5».

Результаты исследования. Уже на 7 сутки после коррекции иммунодефицитного состояния с помощью имунофана все органометрические показатели лимфатического узла превышали данные интактных животных, наибольшее превышение параметров отмечалось в показателях толщины и массы органа – в 2,30 раза (рис. 2). Длина была больше значений интактных животных на 46,94%, ширина на 17,31%. На 30 сутки тенденция сохранялась: масса была больше – на 72,19%, длина – на 25,81%, ширина – на 14,71% и толщина – на 7,53%.

Рис. 2. Показатели массы подмышечных лимфатических узлов половозрелых крыс.

Данные полученные от животных, которым была проведена иммунокоррекция после введения циклофосфана (ЦФ/ИМ), значительно превышают показатели крыс с иммуносупрессией без иммунокоррекции (ЦФ). Таким образом, масса лимфатического узла на 7 и 30 сутки была больше в 2,41 и 2,77 раза соответственно. Линейные параметры группы ЦФ/ИМ так же превышали данные группы ЦФ на 7 и 30 сутки наблюдения, показатели длины были больше на 63,74% и 56,69%, ширины – на 13,72% и 31,72%, толщины – в 2,35 раза и на 11,12%. На 90 сутки все органометрические показатели обеих групп животных приближались к показателям интактных крыс (табл. 1).

Таблица 1

Органометрические показатели лимфатических узлов половозрелых крыс на 7, 30, 90 сутки в условия эксперимента (М±m, n=54)

Параметры	Сроки наблюдения (сутки)	Группы животных
		ЦФ/ИМ	ЦФ	И
Длина ЛУ (мм)	7	7,45±0,29* ٭	4,55±0,21*	5,10±0,20
	30	7,02±4,02* ٭	4,48±0,21*	5,60±0,30
	90	7,60±0,30	7,12±0,20	7,60±0,20
Ширина ЛУ (мм)	7	3,73±0,18* ٭	3,28±0,06*	3,40±0,10
	30	3,82±0,16* ٭	2,90±0,04*	3,30±0,10
	90	4,53±0,12	4,43±0,15	4,50±0,20
Толщина ЛУ (мм)	7	0,92±0,04* ٭	0,39±0,10*	0,40±0,10
	30	1,00±0,02* ٭	0,90±0,04	0,90±0,10
	90	0,93±0,90	0,90±0,04	0,90±0,10

Примечание: знаком * – отмечены достоверные различия (p<0,05) в сравнении с интактными животными, ٭ – отмечены достоверные различия (p<0,05) в сравнении с животными которым вводили циклофосфан.

Выводы. Полученные результаты указывают на то, что при коррекции циклофосфан-индуцированной иммуносупрессии с помощью имунофана наблюдается увеличение всех органометрических параметров подмышечных лимфатических узлов, что может свидетельствовать об эффективности данной схемы введения препаратов.

Литература.

1. Антипов Н. В. Морфологические особенности лимфатических узлов / Н. В. Антипов // Український морфологічний альманах. – 2012. – Т. 10, № 2. – С. 3–5.

2. Александрова Л. И. Планиметрическая характеристика лимфатических узлов при экспериментальном воздействии переменного электромагнитного поля промышленной частоты / Л. И. Александрова, М. Ю. Капитанова, Н. Г. Краюшкина // Морфология. – 2010. – Т. 137, № 4. – С. 14.

3. Арион В. Я. Иммунобиологические свойства и клиническое применение тимозинов и других препаратов тимуса / В. Я. Арион, И. В. Зимина, С. Н. Москвина // Иммунология, аллергология, инфектология. – 2008. – №1. – С. 26–40.

4. Закон України «Про захист тварин від жорстокого поводження» від 21.02.2006 р., № 3447.

5. Кащенко С. А. Экспериментальное изучение крыс после воздействия циклофосфаном / С. А. Кащенко // Проблеми остеології. – 2001. – Т. 4, № 1–2. – С. 69–70.

6. Михайлова М. Н. Морфофункциональные изменения тимуса и показатели крови после введения циклофосфана, имунофана и их комбинации: автореф. дис. на соиск. ученой степени канд. мед. наук, спец. 03.00.25 «гистология, цитология, клеточная биология» / М. Н. Михайлова. – Москва, 2004. – 28 с.

7. Трахтенберг И. М. Экологическая безопасность – глобальная социально-медицинская проблема / И. М. Трахтенберг // Гигиена и санитария. – 2009. – № 7 (63). – С. 32–37.

8. Allison A. C. Immunosuppressive drugs: the first 50 years and a glance forward / A. C. Allison // Immunopharmacology. – 2000. – Vol. 47, № 2–3. – P. 63–83.

9. Lymphatic system: morphofunctional considerations / G. Sallustio, C. Giangreogorij, L. Cannas [et al.] // Rays. – 2000. – Vol. 25, № 4. – P 413–427.