Ветеринария/1.Ветеринарная медицина

Д. вет. наук, профессор Гершун В.И., Кравченко А.В.

Костанайский государственного университета им. А.Байтурсынова, Казахстан

Воздействие молочнокислых бактерий на жизнеспособность листерий в обрате

Листериозом болеют как дикие, так и домашние животные. Возбудитель выделен от 103 видов животных и регистрируется в свыше чем, в 65 странах мира, в различных природных ареалах. Листерии весьма устойчивы к неблагоприятным факторам окружающей среды. Наряду с традиционными представлениями взаимосвязи листерий с животными, некоторые исследователи (Гершун В.И., 1981, Литвин В.Ю., 1996) рассматривают листериоз как типичную сапронозную инфекцию [1,2].

В.Гершун установил, что молочнокислые бактерий подавляют развитие листерий в кукурузном соке в результате понижения рН среды и образования антибиотических веществ [1].

Последние десятилетия во всех развитых странах уделяется очень большое внимание исследованию к практическому использованию молочнокислых бактерий в медицине и животноводстве.В связи с этим была поставлена цель изучить влияние молочнокислых бактерий на жизнеспособность листерий в обрате.

Для опыта использовали 36 проб стерилизованного и сырого обрата, полученный из коровьего молока. Обрат с рН 6,8-7,3 разливали во флаконы и вносили в них стандартную сухую заквасочную культуру «Бифидум» (Streptococcus thermophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum), в виде порошка при помощи бактериологической петли. Каждую пробу инфицировали листериями из расчета 0,15-0,21 тыс.КОЕ/мл и выдерживали в условиях холодильника 4^оС, при комнатной температуре 18⁰С, и в термостате 37⁰С в течение 7 суток. В первый день, а затем через каждые 2 дня определяли рН обрата и концентрацию в нем листерий. В качестве контроля использовали обрат инфицированный культурой только возбудителя листериоза.

В опыте использованы 3 музейных штамма Listeria monocytogenes из коллекции кафедры ветеринарной санитарии КГУ им. А. Байтурсынова, которые в соответствии с паспортными данными обладали типичными морфологическими, культуральными, биохимическими и патогенными свойствами. Для культивирования и выделения листерий из исследуемых объектов производили посевы на пластинки МПА с 0,004% налидиксовой кислотой. Результаты исследования влияния молочнокислых бактерий на жизнеспособность листерий в стерильном обрате отражены в табл. 1.

Таблица 1 - Влияние молочнокислых бактерий «Бифидум» на жизнеспособность листерий в стерильном обрате

t ^0 режим	пробы	0 сутки		1 сутки		3 сутки		5 сутки		7 сутки
		рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.
опыт
4 ^0С	3	6,8-6,9	0,15±0,003	6,6-6,7	12±0,7	6,6-6,7	75±3,5	6,5-6,6	300±6,2	6,6-6,7	420±7,2
18 ^0С	3	6,8-6,9	0,15±0,003	6,1-6,2	28,5±0,8	4,9-5,0	75±3,4	4,7-4,8	25±3,1	4,5-4,6	0,8±0,1
37 ^0С	3	6,8-6,9	0,15±0,003	4,5-4,7	85±3,8	3,8-3,9	110±20	3,6-3,7	-	3,3-3,4	-
контроль
4 ^0С	3	6,9-7,1	0,15±0,006	6,9-7,1	11±0,7	6,9-7,1	150±30,9	6,9-7,1	310±6,8	6,9-7,1	546,7±30,9
18 ^0С	3	6,9-7,1	0,15±0,006	6,9-7,1	37,5±1,6	6,9-7,1	750±35,9	6,9-7,1	4200±134,5	6,9-7,1	6200±154,5
37 ^0С	3	6,9-7,1	0,15±0,006	6,9-7,1	152±30,2	6,9-7,1	1750±154,5	6,9-7,1	8200±164,5	6,9-7,1	12200±174,5

В результате комплексного воздействия молочнокислой микрофлоры в пробах стерилизованного обрата при 4°C рН незначительно понижалась и колебалось в пределах 6,5-6,7. В этих пробах в течение опыта отмечалось незначительное размножение листерий (12±0,7-420±7,2) КОЕ/мл. Концентрация их незначительно отмечалась от контрольных проб при этом температурном режиме.

При 18°C под влиянием молочнокислых бактерий рН проб понижалась до 4,5-4,6, а концентрация после незначительного повышения понижалась до 0,8±0,1 КОЕ/мл. В аналогичных условиях в контрольных пробах обрата отмечалось интенсивное размножение листерий, концентрация которых достигала 6200±154,5 КОЕ/мл.

В условиях термостата при 37°C отмечалось значительное понижение рН проб до 3,3-3,7, при которой листерии погибали. В аналогичных контрольных пробах отмечалось интенсивное размножение листерий, концентрация которых достигала 12200±174,5 КОЕ/мл.

Исследования показали, что в стерилизованных пробах обрата молочнокислые бактерии значительно угнетали развитие листерий при комнатной температуре, а в условиях термостата вызывали их гибель в результате значительного понижения рН проб. В этих пробах в холодильнике молочнокислые бактерии не оказывают существенного воздействия на листерий.

Результаты исследования влияния молочнокислых бактерий на жизнеспособность листерий в сыром обрате отражены в табл. 2.

t ^0 режим	пробы	0 сутки		1 сутки		3 сутки		5 сутки		7 сутки
		рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.	рН	тыс. КОЕ/мл.
опыт
4 ^0С	3	7,2-7,3	0,2±0,006	7,1-7,2	7,5±0,3	6,7-6,9	95±3,1	5,6-5,8	125±14,5	3,0-3,9	51,7±4,7
18 ^0С	3	7,2-7,3	0,2±0,006	5,0-5,9	200±35,9	4,8-4,9	350±15,5	4,6-4,8	75±0,31	4,3-4,5	-
37 ^0С	3	7,2-7,3	0,2±0,006	4,1-4,3	250±30,9	3,6-3,8	150±17,5	3,4-3,6	-	3,0-3,2	-
контроль
4 ^0С	3	7,2-7,3	0,21±0,006	6,0-6,9	45±3,1	6,9-7,0	236,7±21,7	6,3-6,5	400±15,4	5,1-5,3	320±12,4
18 ^0С	3	7,2-7,3	0,21±0,006	5,1-5,3	150±30,9	5,1-5,2	200±34,9	5,0-5,1	1250±154,5	4,9-5,0	620±14,4
37 ^0С	3	7,2-7,3	0,21±0,006	4,5-4,6	1200±123,6	4,0-4,1	723,4±18,5	3,6-3,8	341,7±23,2	3,4-3,5	-

Таблица 2 - Влияние молочнокислых бактерий «Бифидум» на жизнеспособность листерий в сыром обрате

В сыром обрате молочнокислые бактерии угнетали развитие листерий, которое проявлялось значительно сильнее, чем в контрольных пробах в результате спонтанного скисания.

В опытных пробах сырого обрата при 4°C рН понижалась и составляла на 7 сутки 3,0-3,9, и в них отмечалось размножение листерий (51,7±4,7) КОЕ/мл. Концентрация их была значительно ниже, чем в контрольных пробах 320±12,4 КОЕ/мл.

В опытных пробах при 18°C отмечалось значительное понижение рН проб до 4,3-4,5, при которой листерии погибали. В аналогичных условиях в контрольных пробах обрата рН понижалась до 4,9-5,0 и отмечалось размножение листерий, концентрация которых была относительно высокой 620±14,4 КОЕ/мл.

В условиях термостата при 37°C отмечалось значительное понижение рН опытных проб до 3,0-3,6, при которой листерии на 5 сутки погибали. В контрольных пробах отмечалось понижение рН до 3,4-3,5, при которой листерии погибали на 7 сутки опыта.

Таким образом, заквасочная культура «Бифидум» вызывала в стерилизованном и сыром обрате угнетение листерий или их гибель.

Литература:

1. Гершун В.И. Листериоз сельскохозяйственных животных.- Алма-ата: Кайнар, 1981. -96 с.

2. Литвин В.Ю., Патогенные бактерии, общие для человека и растений:

проблемы и факты // Микробиология, 1996.- №2.-с.76