Толкачева Н.В.¹, Ежов В.Н.¹, Комаровская-Порохнявец Е.З.², Яремкевич Е.C.², Новиков В.П.²

1 - Никитский ботанический сад – Национальный научный центр НААНУ, 98648, Украина, АР Крым, г. Ялта, пгт. Никита. E-mail: tolkacheva_n@mail.ru

2 - Национальный университет “Львовская политехника”, кафедра технологии биологически активных веществ, фармации и биотехнологии, 79013, Украина, г. Львов, ул. С. Бандеры, 12. E-mail: vnovikov@polynet.lviv.ua

Основной стероидный гликозид из листьев Allium paniculatum

Стероидные гликозиды – один из перспективных классов биорегуляторов растительного происхождения. Они обладают противоопухолевой (Inoue et al., 1995), антимутагенной (Жакотэ и др., 1997), антимикробной (Лазурьевский, 1980), фунгицидной (Кинтя и др., 1987) активностями, являются природными стимуляторами роста растений (Hoagland et al., 1996), причем фуростаноловые сапонины проявляют более сильную рострегулирующую способность, чем спироаналоги (Зиновьева, 1995). Кроме того, обнаружено, что выделенные из растительных источников стероидные гликозиды обладают антиоксидантной активностью, при этом гликозиды ряда фуростана являются более активными по сравнению со спиростаноловыми сапонинами (Кинтя и др., 1982). Большой ценностью является экологическая безопасность и высокая биологическая активность соединений данного класса, что позволяет использовать их в очень малых концентрациях.

Среди перспективных сапониноносных растений флоры Украины особый интерес представляют дикорастущие виды рода Allium. В литературе данные о стероидных гликозидах большинства крымских луков отсутствуют. Именно поэтому изучение химической структуры и биологической активности стероидных гликозидов представителей семейства Alliaceae является актуальным.

Из листьев лука метельчатого Allium paniculatum L. с помощью ВЭЖХ нами был выделен основной гликозид. После кислотного гидролиза по хроматографической подвижности в тонком слое силикагеля в присутствии заведомо известных свидетелей была идентифицирована углеводная часть гликозида, которая представлена только D-глюкозой. Строение углеводной цепи и место ее присоединения к агликону установили на основании данных спектров ЯМР ¹Н и ¹³С. С помощью двумерной спектроскопии ЯМР, включая эксперименты ¹Н,¹Н-COSY, TOCSY, ROESY, ¹H,¹³C-HSQC и HMBC удалось однозначно отнести все сигналы в спектрах ЯМР ¹Н и ¹³С исследуемого соединения. Таким образом, было установлено, что основной гликозид, выделенный из листьев A. paniculatum, представляет собой 3-О-β-D-глюкопиранозил-(1→2)-О-β-D-глюкопиранозид-(25R)-5β-фуростан-3β,22α,26-триол-[26-О-β-D-глюкопиранозид].

В ходе изучения биологической активности было проведено исследование антимикробных, рострегулирующих, фунгицидных и антиоксидантных свойств гликозида. Стероидный гликозид в концентрации 10 мг/дм³ на 72 % по сравнению с контролем стимулировал рост корня овса и на 26 % – рост корня кресс-салата. Существенный угнетающий эффект на рост частей тест-растений наблюдался в концентрации сапонина 100 мг/дм³.

Кроме того, данное вещество проявляет слабую фунгицидную и бактерицидную активности, что полностью согласуется с литературными данными (Oleszek, 2000).

Также нами исследовалась антиоксидантная активность выделенного соединения. В работе была использована модель количественной оценки антиоксидантной активности стероидного гликозида путем сравнения с антиоксидантной активностью стандартного соединения тролокса – 6-гидрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-карбоновой кислоты (Ghiselli et al., 1995). Из анализа полученных данных следует, что гликозид обладает высокой антиоксидантной активностью – в 2,2 раза выше таковой для тролокса.

Вместе с тем, изучено влияние стероидного сапонина на процессы биологического окисления липидов зародышевых клеток пресноводной рыбы вьюна Misqurnus fossіlis L. в период раннего эмбриогенеза, являющихся адекватной тест-системой для исследования влияния различных фармакологических и химических факторов на живые организмы (Тимирбулатов и др., 1981). Наши исследования показали, что под действием гликозида в концентрации 10^-4 г/см³ наблюдается активация процессов перекисного окисления липидов; при этом содержание малонового диальдегида в гомогенате зародышей вьюна, инкубируемых в растворе исследуемого гликозида, составляет 0,412 мкмоль/мг белка, что на 11 % превышает контроль. В присутствии сапонина в концентрации 10^-6 г/см³ наблюдается очевидное уменьшение уровня малонового диальдегида на 12 % по сравнению с контролем, который составляет 0,329 мкмоль/мг белка, что свидетельствует о снижении интенсивности процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантных свойствах данного вещества. Анализ полученных данных показывает, что в зависимости от концентрации, стероидный гликозид может проявлять как антиоксидантные, так и прооксидантные свойства.