Окислительные процессы и уровень цитокинов при эхинококкозе печени

Зангинян А. В., Казарян Г. С.,Овсепян Л. М.

Лаборатория молекулярной мембранологии, института молекулярной биологии Национальной академии наук Армении.

Патогенез эхинококкоза печени связан с развитием воспалительной реакции,

что вызывает активацию ряда иммунопатологических защитних механизмов.

В настоящее время установлено, что ткани, пораженные воспалением, образуют

повышенные количества супероксидного радикала (О2) и NО, приводящие к активированию свободнорадикальных реакций, который рассматривается как

универсальный механизм повреждения клетки [ 2] .

В клетках продукты свободнорадикального окисления учавствуют в регуляции сигнальных путей и продукции цитокинов, влияют на фосфорилирование, транслокацию и связывание с ДНК факторов транскрипции [5].

Целью настоящего исследования явилось изучение активности процессов перекисного окисления липидов и окислительных модификаций белков, определение содержания оксида азота во взаимосвязи с содержанием цитокинов при эхинококкозе печени у людей до операции и после.

Материалы и методы исследования.

Содержание перекисей липидов определяли по реакции взаимодействия малонового диальдегида (МДА) с тиобарбитуровой кислотой, дающее цветное окрашивание, которое регистрировали при длине волны 535 нм [4].

Уровень окислительной модификации белков в сыворотке крови оценивали по содержанию карбонильных производных аминокислот в белках.

Содержание оксида азота определяли с помощью реактива Грисса (1 % сульфаниламида, 0,1 % нафтилендиамина, 2,5 % фосфорной кислоты), а абсорбцию раствора измеряли при длине волны 546 нм [1].Количество белка определяли по Лоури [6]. Определение концентраций интерлейкинов — IL-6, IL-8 и TNF- a в сыворотке крови проводили с помошью иммуноферментного анализа (ELISA) с использованием коммерческих тест-систем (Diaclone,France) по инструкции производителя.

Результаты исследования.

Исследование содержания продуктов перекисного окисления липидов у

больных эхинококкозом показало их увеличение.

Как показали результаты исследования, у пациентов с эхинококкозом печени наблюдается тенденция к повышению интенсивности окислительной модификации белков при длине волны 363нм. Если у здоровых людей содержание карбонильных продуктов состовляло 4,12 , то у больных эхинококкозом печени до операции 7,3, что проявляет тенденцию к уменьшению после операции.

Как показали результаты исследования , у больных эхинококкозом печени наблюдается повышенный уровень содержания оксида азота как до операции, так и на 6 день после операции. Активированные цитокинами и бактериальными эндотоксинами макрофаги усиливают синтез NO [7].

Исследование содержания TNF-a у больных показало, что почти в 4 раза увеличивается его содержание.

Исследование концентраций IL-6 и IL-8 позволило обнаружить их увеличение у пациентов при эхинококкозе печени до операции .

Таким образом, полученные нами данные позволяют заключить,что в развитии патогенеза эхиноккоза печени определенную роль играет активирование свободнорадикальных реакций , увеличение содержания оксида азота и цитокинов.

ЛитератураНравится

1. Голиков П.П., Николаева Н.Ю., Гавриленко И.А. и др. Оксид азота и перекисное окисление липидов как факторы эндогенной интоксикации при неотложных состояниях// Бюлл. экспер. Биол. мед. 2000. № 7. С. 6 - 9.

2. Зенков Н. К., Ланкин В. З., Меньшикова Е. Б. Окислительный стресс. Биохимические и паталого физиологические аспекты// МАИК.- 2001. С.-343

3. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К., Реутов В.П. Оксид азота и NO–синтазы в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях // Биохимия. 2000. Т. 65. Вып. 4. С. 485–503.

4. Орехович В.Н. (ред).Современные методы в биохимии., М. - 1977.

5. Circu M.L., Aw T.Y. 2010 Reactive oxygen species, cellular redox systems and apoptosis / Free Radic.Biol.Med. ,48, 749-7625. .

6. Lowry N.J., Rosenbogh, A.J., Farr et al Protein measurement with the folin phenol reagent. // J.Biol. Chem. – 1951 - Vol. 153(1) P.

7. Nathan C.T., Hibbs J.B. Jr. Role of nitric oxide synthesis in macrophage antimicrobial activity // Curr. Opin. Immunol. - 1991. - Vol.3. - P.65-70.