Исследование влияния дигидрокверцетина на уровень микроциркуляции и морфологические показатели при перитоните (экспериментальное исследование)

А.Н. Чмыхова, Е.Б. Артюшкова, Сеин О.Б., В.С. Барсуков

Перитонит остается хирургической, общеклинической и общепатологической проблемой, актуальность которой не снижается, несмотря на несомненные успехи клинической медицины, вооруженной новыми перспективными технологиями (И.А. Ерюхин и соавт., 2004). Приоритетные аспекты лечения перитонита связаны с внедрением новых медицинских препаратов.

Большое значение приобретает применение препаратов антиоксидантного действия, а именно биофлаваноидов, которые являются естественными защитниками от «оксидативного стресса». Дигидрокверцетин (ДГК) по своим химическим свойствам является активным антиоксидантом, т. е. веществом, связывающим свободные радикалы и лишающим их повреждающего действия (Шестакова М.В., 2006).

Показано, что включение ДГК в схемы стандартной терапии различных заболеваний приводило к достоверному улучшению показателей функций внешнего дыхания, центральной и периферической гемодинамики, оксигенации крови, улучшению микроциркуляции, к повышению толерантности к физической нагрузке, улучшению психоэмоционального состояния больных и повышению терапевтического и реабилитационного эффектов лечения, улучшению отдаленных результатов (Шакула А. В. И соавт., 2008; Плотников М. Б. И соавт., 2005).

В связи с вышеизложенным, целью нашего исследования являлась оценка эффективности использования ДГК путем анализа уровня микроциркуляции и морфологических показателей при моделировании распространенного перитонита.

Экспериментальное исследование выполнялось на крысах-самцах линии «Wistar» массой тела 200-250 г. В контрольную группу входили крысы, у которых моделировался перитонит. Распространенный перитонит вызывался путем внутрибрюшного введения 10% каловой взвеси, которая вводилась в разных направления в объеме 0,5 мл на 100 г массы тела животного.

В опытную группу вошли животные, которым моделировали перитонит и вводили в течении 10 суток ДГК перорально в дозе 7,7 мг/кг/сут. Через 48 часов от начала эксперимента в контрольной и опытной группах выполнялась санация брюшной полости антисептическим раствором (0,02% раствор фурациллина) (Суковатых Б.С. и соавт., 2010).

Для определения эффективности лечения ДГК использовали следующие критерии: динамика показателей уровня микроциркуляции в стенке тонкой кишки и гистологические исследования.

Животных выводили из эксперимента на 1, 2, 3, 4, 5, 7 и 10-е сутки, после моделирования патологии, передозировкой средства для наркоза – хлоралгидратом и осуществляли забор тканей из области повреждения для морфологического исследования.

Рисунок 1. Динамика микроциркуляции в стенке тонкой кишки крыс, получавших дигидрокверцетин в дозе 7,7 мг/кг/сут при экспериментальном перитоните, в абсолютных значениях.

Примечание: ^х – р < 0,05 по сравнению с интактной группой;

^у – р < 0,05 по сравнению с контрольной группой.

При оценке уровня микроциркуляции в опытной группе было выявлено, что введение экспериментальным животным ДГК в качестве монотерапии приводит к эффективному повышению уровня регионарного кровотока в стенке тонкой кишки (Рис. 1). На вторые сутки эксперимента уровень микроциркуляции был на 33,9 % выше по сравнению с контрольной группой животных. В дальнейшем на 3-и, 4-е, 5-е и 7-е сутки отмечалось прогрессирующее повышение показателей микроциркуляции на 48,3 %, 122,6%, 67,7 % и 103,7 %, соответственно (р < 0,05). К десятым суткам эксперимента у исследуемых животных, получавших ДГК, микроциркуляция в стенке тонкой кишки полностью восстановилась до уровня интактных животных, в то время как у крыс, не получавших лечения, оставалась на достоверно низком уровне (Рис. 1).

Анализируя динамику морфологических изменений выявили следующую картину. Париетальная брюшина – на 2-е сутки после моделирования перитонита на фоне введения ДГК в париетальной брюшине, как и при нелеченном перитоните, отмечается очаговая невыраженная воспалительная инфильтрация.

Тонкий и толстый кишечник – на 4-10-е сутки воспалительные изменения в слизистой и подслизистой оболочке выражены заметно слабее, чем у крыс контрольной группы. Помимо этого отмечается выраженная гиперплазия лимфоидного аппарата кишечника, что может быть обусловлено иммуномодулирующим действием ДГК. В толстом кишечнике на 10-е сутки патологические изменения не выявляются.

Печень – на 2-е сутки общая архитектоника долек аналогичная таковой у крыс контрольной группы, за исключением отсутствия колоний микробов в синусоидах. На 4-е сутки в гепатоцитах выявляется картина очаговой жировой дистрофии, но к 10-м суткам обнаруживается лишь зернистая дистрофия гепатоцитов. Воспалительные изменения и микробная инвазия в печени отсутствуют на всех этапах эксперимента.

Почки – на 2-4-е сутки изменения в клубочках почки и межканальцевой строме аналогичны таковым у крыс контрольной группы, однако на 10-е сутки патологические изменения в почках в виде дистрофических изменений эпителия канальцев и интерстициального нефрита уже не обнаруживаются.

Легкие – на 2-е сутки в альвеолярных перегородках выявляются нарушения микроциркуляции аналогичные описанным у крыс контрольной группы, однако к 4 суткам эксперимента они уже стихают и кровоизлияния в альвеолы не обнаруживаются. К 10-м суткам эксперимента у выживших крыс отмечаются отчетливые гиперпластические изменения перибронхиальной лимфоидной ткани, возможно, связанные с иммуномодулирующим действием ДГК.

Селезенка – на 10-е сутки эксперимента обнаруживается выраженная гиперплазия лимфоидных фолликулов с появлением в них реактивных центров.

Летальность в исследуемых группах изучалась у животных на всех сроках эксперимента. Процент летальности рассчитывался как отношение числа погибших животных за сутки к общему числу животных, взятых в эксперимент, с моделью экспериментального перитонита.

В контрольной группе из 50 животных за первые сутки погибло 10 крыс, что составило 20% летальности. На вторые сутки эксперимента летальность составила 14%. На 3-и сутки сохранялся высокий уровень летальности (10%), несмотря на выполненную через 48 часов после моделирования патологии лапаротомию с целью санации брюшной полости антисептическим раствором. Начиная с 4-х суток количество павших животных уменьшалось, так летальность на 8-е сутки составила 2%, а на 9-е и 10-е сутки летальность отсутствовала. К концу эксперимента на 10-е сутки общее количество павших животных составляло – 31 крыса. Таким образом, из представленных выше данных получено, что общая летальность в контрольной группе животных с распространенным перитонитом составила 62%.

В группе животных, получавших дигидрокверцетин в дозе 7,7 мг/кг/сут, за первые сутки погибло 6 крыс, что составило 12% летальности. На вторые сутки эксперимента летальность составила 8%. На 3-и сутки, после выполненной лапаротомии через 48 часов после моделирования патологии с целью санации брюшной полости антисептическим раствором, летальность снижалась до 4%. На 4-е сутки количество павших животных не изменилось, летальность составила также 4%. На 5-е и 6-е сутки количество павших животных уменьшилось, при этом летальность составила по 2%, а с 7-х по 10-е сутки полностью отсутствовала. К концу эксперимента на 10-е сутки общее количество павших животных составляло – 16 крыс. Таким образом, из представленных выше данных получено, что общая летальность в группе животных, получавших лечение дигидрокверцетином в дозе 7,7 мг/кг/сут на фоне моделирования распространенного перитонита, составила 32%.

Из полученных выше данных видим, что в группе получавшей ДГК летальность крыс на 30% ниже, чем в контрольной группе.

Нами экспериментально доказано, что введение антиоксиданта растительного происхождения – дигидрокверцетина прерывает каскад патологических процессов, формирующихся при распространенном перитоните. Полученные результаты по уровню микроциркуляции и патоморфологическим изменениям свидетельствуют о выраженном фармакологическом эффекте ДГК, что предполагает использование ДГК как дополнение к стандартному лечению больных с распространенным перитонитом.

Литература:

1.Ерюхин, И.А. Перитонит и абдоминальный сепсис / И.А. Ерюхин, С.А. Шляпников, И.С. Ефимова // Инфекции в хирургии. 2004. — №2(1).-С. 2-8.

2.Шестакова М.В. Многокомпонентный подход к лечению сахарного диабета и его осложнений // Терапевт. архив. - 2006. - №10. - С. 33-36.

3.Шакула А. В., Некрасов В. И., Щегольков А. М., Климко В. В., Ярошенко В. П., Дергачева Л. И. Применение дигидрокверцетина в комплексном лечении больных гипертонической болезнью // Врач. 2008. № 4. С. 42–46.

4.Плотников М. Б., Тюкавкина Н. А., Плотникова Т. М. Лекарственные препараты на основе диквертина. Издательство Томского университета. 2005. 222 с.

5. Суковатых Б.С., Артюшкова Е.Б., Фролова О.Г. и др. Влияние мексикора на течение синдрома интраабдоминальной гипертензии при экспериментальном распространенном перитоните // Вестник экспериментальной и клинической хирургии. 2010 – Т.3, №3 – С. 222-226.

Сведения об авторах:

Чмыхова Анастасия Николаевна – ветеринарный врач I категории ОБУ «Курская городская СББЖ»

Артюшкова Елена Борисовна – д.б.н., директор НИИ экологической медицины ГБОУ ВПО КГМУ Минздрава России

Сеин Олег Борисович – Член корреспондент Российской академии естественных наук, заслуженный ветеринарный врач РФ, доктор биологических наук, профессор

Барсуков Владимир Сергеевич – д.м.н., профессор, заведующий кафедрой общей патологии и физиологии Медицинского института Орловского государственного университета