Медицина / 6.Экспериментальная и клиническая фармакология
Д-р мед. н. Маркова Е. В., Княжева М. А.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «НИИ клинической иммунологии» СО РАМН, г. Новосибирск,
Россия
Психомодулирующее влияние трансплантации
иммунокомпетентных клеток, прекультивированных с нейролептиком.
Введение. Нейролептики достаточно эффективны и широко применяются в психиатрической практике, благодаря своей способности купировать психомоторное возбуждение различного генеза, а также ослаблять расстройства восприятия, мышления и социального поведения в рамках психоза. Однако, помимо специфического воздействия на функциональную активность нервной системы, они обладают рядом побочных эффектов, которые проявляются в виде дистонии, акатазии, лекарственного паркинсонизма, медленной дискинезии, депрессии и сонливости. Некоторые из них, в частности препараты фенотиазинового ряда, могут вызывать нарушения атриовентрикулярной и внутрижелудочковой проводимости, угнетение дыхательного центра, обладают гепатотоксичностью; что в ряде случаев ограничивает возможности применения указанных препаратов [1]. Известно, что нервная и иммунная системы тесно взаимодействуют в процессе своего функционирования [3, 8, 10, 12]. Существование интеграционных взаимоотношений указанных систем, клеточные элементы которых характеризуются выраженным фенотипическим и функциональным сходством, подразумевает, в частности, возможность участия иммунокомпетентных клеток в регуляции процессов высшей нервной деятельности. Как показали наши предыдущие исследования, функциональная активность иммунной системы и, в частности, ее клеточных элементов, связана с уровнем ориентировочно – исследовательского поведения (ОИП) [3, 7, 10]; и параметры данной поведенческой реакции могут быть направленно изменены путем трансплантации иммунокомпетентных клеток [6, 9, 10, 11].
Целью настоящей работы было исследование
возможности получения нейролептического эффекта у экспериментальных животных
путем трансплантации иммунокомпетентных клеток, функциональная активность
которых была экстракорпорально изменена обработкой препаратом фенотиазинового ряда - аминазином.
Материалы и
методы. В экспериментах использовались мыши-самцы (CBAxC57Bl/6)F1, в возрасте 3 месяцев и
средним весом 20-25 г. Животных содержали
в условиях лабораторного вивария в клетках по 10 особей в каждой, не менее 2-х
недель до начала эксперимента на стандартной диете, при свободном доступе к
воде и нормальном световом режиме.
Исследования проводились в соответствии с правилами принятыми
Европейской конвенцией по защите позвоночных животных используемых для
экспериментальных и иных научных целей (Страсбург, 1986) и правилами лабораторной практики (приказ Министерства
здравоохранения Российской Федерации от 19.06.2003 N 267).
Двигательную активность животных оценивали в тесте ”открытое поле» [2]. Учитывая специфический эффект аминазина,
направленный на купирование гиперактивности, в экспериментах использовались
исключительно животные с активным типом
поведения, характеризующиеся высокими показателями двигательной активности.
Иммунокомпетентные
клетки для трансплантации получали из суспензии спленоцитов.
Выделенные спленоциты обрабатывали in vitro миназином из расчета 15х10 6 клеток / 150
мкг препарата в течение 25 минут. Концентрация препарата, применяемая для
обработки клеток, определялась путем перерасчета терапевтической дозы, с учетом
веса и особенностей метаболизма животных. Затем, после 3-кратного
отмывания, прекультивированные с
аминазином спленоциты внутривенно вводили сингенным реципиентам в концентрации
15х10 6 клеток в объеме 0,3 мл физиологического раствора на одно животное. В
контрольной группе животных подготовка
и трансплантация спленоцитов проводилась в аналогичных условиях эксперимента,
за исключением того, что последние культивировались без присутствия аминазина.
Пролиферативный ответ
трансплантируемых клеток оценивали общепринятым методом реакции бластной трансформации лимфоцитов. У
мышей - реципиентов регистрировали параметры ОИП, содержание цитокинов в лизатах
головного мозга, интенсивность клеточного иммунного ответа на Т-зависимый антиген – эритроциты
барана.
Основные результаты. Культивирование донорских
спленоцитов с аминазином изменяет их
функциональную активность,
проявляющуюся в снижении спонтанной пролиферативной активности (628,9±204
имп/ мин и 144,0±47,6 имп / мин в контрольной и опытной группах соответственно;
p
< 0,05). Трансплантация
указанных клеток мышам-реципиентам с высоким уровнем ОИП вызывала у последних достоверное снижение параметров
горизонтальной и вертикальной двигательной активности в тесте «открытое поле»,
что свидетельствует о подавлении как моторного, так и исследовательского
компонентов ориентировочно-исследовательского поведения. Снижение показателей двигательной активности
после трансплантации обработанных аминазином спленоцитов регистрировалось на
фоне повышения уровня цитокинов ИЛ-1β, ИЛ-6, ФНОα в клетках головного мозга реципинтов. Изменение цитокинового фона ЦНС может, по нашему мнению, являться
одним из механизмов
продемонстрированного нейролептического эффекта трансплантированных
иммунокомпетентных клеток.
Со стороны
иммунной системы животных-реципиентов наблюдается модуляция активности ее
клеточного звена, проявляющаяся в снижение
высоты реакции гиперчувствительности замедленного типа (индекс реакции в
контрольной и опытной группах соответственно 50,7±25,0 и 23,9±16,4; р <
0,05). Тот факт, что изменения
выраженности реакции ГЗТ у реципиентов сопровождают соответствующие изменения
параметров их ориентировочно-исследовательского поведения, подтверждает
сделанный ранее нами, а впоследствии и
другими авторами, вывод о существовании прямой зависимости между этими
показателями у различных видов экспериментальных животных [3, 4, 5, 10, 13].
Заключение. В настоящем
исследовании показана возможность получения нейролептического эффекта у
экспериментальных животных путем трансплантации иммунокомпетентных клеток, экстракорпорально
обработанных аминазином. Данный подход, исключает нежелательные побочные
эффекты, возникающие при непосредственном приеме соответствующих
препаратов, что расширяет возможности использования последних; равно как и возможности применения клеточной
терапии.
Литература:
1.
Арена Д., Розенбаум Д.
Фармакотерапия психических расстройств. М.: БИНОМ, 2004.
2.
Буреш Я., Бурешова О.,
Хьюстон Д.П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения.
М.,1991.
3.
Абрамов В.В., Абрамова
Т.Я., Гонтова И.А., Козлов В.А., Маркова Е.В., Повещенко А.Ф., Ребенко Н.М.,
Соловьева И.А., Сорокин О.В. Основы нейроиммунологии. М., 2004.- 100 c.
4.
Маркова Е.В., В.А. Козлов, Н.А. Трофимова, Н.Г. Колосова. Стимуляция
клеточного звена иммунного ответа активизирует исследовательское поведение
преждевременно стареющих крыс OXYS // Бюлл. экспер. биол. и мед. – 2005. – Т. 140. – № 9. – С. 332–334.
5.
Маркова Е.В., Короткова
Н.А., Гольдина И.А., Абрамов В.В., Козлов В.А. Модуляция исследовательского
поведения у мышей при активации клеточного звена иммунного ответа // Бюлл.
экспер. биол. и мед. - 2001. - Т.132. -
№ 10. - С.424-426.
6.
Маркова Е.В., Абрамов В.В. Козлов В.А. Иммунокомпетентные клетки и
регуляция поведения у животных // Бюллетень Сибирского отделения РАМН. – 2007.
– № 2 (124). – С. 6–9.
7.
Маркова Е.В., Чернова
Т.Г., Филлимонов П.Н., Короткова Н.А., Абрамов В.В., Козлов В.А. Иммуноморфологические особенности животных с
разным уровнем ориентировочно-исследовательского поведения // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2004. - Т.138. - № 10. -
С.466-469.
8.
Ader R.
Psychoneuroimmunology. /
University of Chicago Press, 2007.-
V.1.- 1269 p.
9. Markova E.V., Abramov
V.V., Kozlov V.A.. Regulation of the Behavior Reactions by the Immune Cell
Transplantation. / Proceedings of the 2nd
European Congress of Immunology. Free Papers. Editors Reinhold E. Schmidt. MEDIMOND S.r.l., Bolonga, Italy, 2009.- P. 551-555,
11. Markova EV, Abramov VV, T
RyabichevaG, Kozlov VA, Effect of transplantation of splenic lymphoid cells on
functional activity of the immune and nervous system in experimental
animals. //Bull Exp Biol Med, 2009.-
V.147.- N.4.- P.453-457,
12. Siegel A., Zalcman S. S. The Neuroimmunological Basis of Behavior and Mental
Disorders./ Springer Science and Business Media LLC, 2009. - 438 p.
13. Viveros M.P., Fernandes B.,
Guayerbas N., Fluente M. // J.
Neuroimmunology. 2001. - V. 144. - P. 80-88.