Медицина/7. Клиническая медицина
Лопатин
З.В.1, Хремкина А.И.1, Кочмарева А.И.1,
Феськова Д.В.2
1)ГБОУ ВПО
«Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И.Мечникова»
2)
ФГБУ «НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова»
Возможности коррекции экспериментального острого повреждения почки у
крысы
Ишемическая
нефропатия – это группа заболеваний, в основе которых лежит ишемия почек,
развившаяся вследствие первичного поражения почечных сосудов различного
диаметра с нарушением их проходимости и выраженным диффузным обеднением
почечного кровотока, приводящим к снижению фильтрационной функции и
прогрессирующему нефросклерозу. Лечение таких больных преследует две главные
цели – максимально возможную нефропротекцию и профилактику фатальных
сердечно-сосудистых осложнений. Основными моментами в лечении является
ликвидация ишемии почек, нормализация или улучшение контроля АД и
улучшение/стабилизация функции почек, замедление прогрессирования нефросклероза.
Одним из распространенных методов лечения является гемодиализ. Лечение ишемии трудозатратно и занимает
очень много времени. Медицина заинтересована в появлении альтернативных методов
лечения нефропатии. Одним из возможных
методов является применение Перфторана.
Перфторан
– кровезаменитель с газотранспортной функцией, обладающий гемодинамическими,
реологическими, мембраностабилизирующими, кардиопротекторными, диуретическими и
сорбционными свойствами. Препарат применяется в качестве противошокового и
противоишемического средства. Мы решили изучить влияние препарата на
ишемизированную почку и выявить основные недостатки применения.
Цель:
создание биологической экспериментальной модели острого ишемического
повреждения почки у крысы и изучение влияния Перфторана на ишемизированную
почку.
Задачи:
смоделировать острое почечное повреждение у крысы, ввести Перфторан в расчетной
дозировке, провести наблюдение в течение 4-ех суток после оперативного
вмешательства и провести гистологическое исследование ишемизированной почки
после однократного введения препарата.
Материалы
и методы.
Основные
этапы исследования:
·
подготовительный
этап;
·
предоперационный
период;
·
первое
оперативное вмешательство с целью левосторонней нефрэктомии и создания
экспериментальной ишемии единственной почки у крысы;
·
послеоперационное
наблюдение;
·
второе
оперативное вмешательство с целью нефрэктомии единственной почки;
·
эвтаназия
крысы под общим наркозом;
·
гистологическое
исследование ишемизированной почки.
Ход первого оперативного
вмешательства.
Операция: Левосторонняя нефрэктомия.
Правосторонняя ишемизация почки лигатурой с экспозицией 60 минут.
Интраоперационное введение 2,8 мл Перфторана.
Материалы: общехирургический инструментарий
(хирургический пинцет, остроконечные прямые ножницы, скальпель одноразовый,
ранорасширитель), диссектор, латексные лигатуры, атравматичный шовный материал
(пролен, викрил), зажимы типа москит, бритва одноразовая, стерильные
одноразовые перчатки, перевязочный материал.
Обезболивание: общий наркоз.
Положение находящегося под общим наркозом
животного (крысы) – на спине с закрепленными конечностями – для облегчения
доступа к почке. Проведено сбривание волосяного покрова в области
предполагаемого разреза.
Доступ: продольная лапаротомия в модификации
«полумерседес».
После рассечения передней брюшной
стенки разрезан листок почечной фасции, под которой обнаружена жировая капсула
почки. Края раны взяты на лигатурные держалки, приступили к выделению правой
почки из жировой капсулы.
Выделив почку со всех сторон ее
плавно вывели в рану, наложена латексную лигатуру на почечную артерию (с
последующей экспозицией 60 минут, затем снята). Аналогичным образом
мобилизирована левая почка, отдельно прошита, перевязаны почечные артерии, вены
и мочеточник. Выполнена левосторонняя нефрэктомия. (После внутривенного
введения 3 мл Перфторана включена в кровоток правая почка)
Проведены осмотр почечного ложа,
гемостаз, послойное ушивание раны, спирт, асептическая повязка.
Итоги операции:
Длительность оперативного
вмешательства: 2 часа 30 минут.
Интраоперционная кровопотеря
составила – 3 мл.
Осложнения: отсутствуют.
Результат: макропрепарат левой почки
крысы.
Ход второго оперативного
вмешательства.
Операция:
Правосторонняя нефрэктомия. Эвтаназия под наркозом передозировкой анестетика.
Ход
операции:
Обезболивание:
общий наркоз.
Положение
крысы – на спине с закрепленными конечностями – для облегчения доступа к почке.
Доступ:
продольная лапаротомия.
После
рассечения передней брюшной стенки разрезан листок почечной фасции. Края раны
взяты на лигатурные держалки, выделена правая почка, на почечную ножку наложены
две лигатуры на расстоянии 3 мм. Осуществлен забор крови из правой почечной
вены, с последующим её лигированием. Выполнена правосторонняя нефрэктомия.
Увеличена
доза анестетика.
Длительность
оперативного вмешательства 30 минут, после чего констатирована биологическая
смерть в результате остановки дыхательной и сердечной деятельности от передозировки
анестетиком.
Результаты.
Описание макропрепаратов почек крысы.
Ишемизированная
почка увеличена в размерах, ткань белая (бледная), неоднородная. Здоровая почка
– более мелкая, ткань коричневого и темно-алого цветов, что свидетельствует о
хорошем кровоснабжении коркового вещества, до ишемии.
Микроскопические
изменения.
При
гистологическом исследовании микропрепарата здоровой почки структурных
изменений не выявлено; при исследовании микропрепарата почки, подвергшейся ОПП,
наблюдаются явные морфологические изменения в виде тубулярного некроза, что
свидетельствует об ишемическом повреждении нефронов из-за достаточно долгого
снижения почечного кровотока. Следует отметить, что поражены не все нефроны,
часть нефронов сохранила свою функцию.
Вывод.
Моделирование острого повреждения почек является важной частью научного
исследования. Данный тип работы позволяет прогнозировать течение болезни, что
делает ее пригодной для использования.
В
процессе исследования обнаружено нефропротекторное действие, однако, необходимо
увеличить количество экспериментов для получения статистической достоверности.
В настоящее время действие Перфторана на организм находится на стадии изучения.
Возможно, применение препарата будет актуальным не только в экстренных состояниях,
но и для превентивного лечения острых почечных повреждений различной этиологии.
Список
литературы.
1.
Кутырина
И. М., Швецов М. Ю., Мартынов С. А. Ишемическая нефропатия / Журнал «Нефрология
и диализ» Т. 5, 2003 г., №1
2.
Сигитова
О.Н., Щербакова А.Н. Ишемическая болезнь почек / Журнал «Земский врач» г.
Казань, 2010г. Выпуск № 4
3.
Приказ
№755 Министерства Здравоохранения СССР от
12 августа 1977 г. «О мерах по дальнейшему совершенствованию
организационных форм работы с использованием экспериментальных животных»
4.
Богданова
Л.А., Маевский Е.И., Сенина Р.Я., Пушкин С.Ю., Аксенова О.Г., Иваницкий Г.Р.
Краткий обзор клинического применения Перфторана / Институт теоретической и
экспериментальной биофизики РАН, ОАО НПФ «Перфторан» г. Пущино Московской
области, Февраль, 2001 г. / стр. 30-36
5.
Багненко
С.Ф., Мойсюк Я. Г., Резник О.Н. Противоишемическая защита почек у
асистолических доноров с применением перфторана «in situ»
/ НИИ скорой помощи им. И.И.Джанелидзе, г. Санкт-Петербург, НИИ
трансплантологии и искусственных органов, г. Москва
6.
Иваницкий
Г.Р. Биофизика на пороге нового тысячелетия: перфторуглеродные среды и
газотранспортные кровезаменители/ Институт теоретической и экспериментальной
биофизики РАН, 2000г. / Том 1, СТ. 1 стр. 1-24
7.
Рагимова
А.А., Еременко А.А., Никифоров Ю.В. Трансфузиология в реаниматологии / ГОУВПО
ММА им. И. М. Сеченова г. Москва, 2005г. / стр. 183-189
8.
Островский
А.Г., Карашуров Е.С. Переливание крови, препаратов крови и кровезаменителей /
г. Петрозаводск, 2000г. / стр. 105-109