Панченко С.В., Корнієвська В.Г., Литвиненко Т.М., Коломієць Д.А.

Запорізький державний медичний університет

ХРОМАТО-МАС-СПЕКТРОМЕТРИЧНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ ЕФІРНОЇ ОЛІЇ ВАЛЕРІАНИ ЛІКАРСЬКОЇ АР КРИМ

Valeriana officinalis L.s.l. – це збірний вид, який під цією назвою об’єднує близько 15 видів валеріан, що зустрічаються на території України.

Центральне місце в дослідженнях валеріани лікарської належить ефірнїй олії, з вмістом якої і в наші дні пов’язують її біологічну активність [2,9,16].

Ефірні олії валеріани лікарської є складні багатокомпоненті суміші легких, духмяних та різних за структурою органічних речовин, які утворюються в рослинах у процесі життя. Серед них найбільш поширеними є терпени та їх кисневмісні похідні (монотерпеноїди, сесквітерпеноїди ароматичні та аліфатичні сполуки) [3-7].

Хімічний склад її, за сучасними даними, дуже складний [19-22]. З використанням газорідинної хроматографії в ефірних оліях валеріани ідентифіковано 69 компонентів [10-18].

При вивченні їх фармакологічної активності, знайдено, що основними речовинами, що проявляють седативну і спазмолітичну дію є сесквітерпеноїди і ароматичні речовини, особливо валерон і його похідні, евгенол і ізоевгенілізовалерат, похідні кесану [2,14,16].

У ефірної олії валеріани лікарської європейського походження переважають складні ефіри борнеолу і миртенолу, валеренова кислота, валеранон, валеренол; азіатського – похідні кесану, фауринону, криптофауринолу, що можливо, вказує на особливості терапевтичної дії валеріани залежно від географічного місця заготівлі.

МЕТА РОБОТИ: за допомогою газорідинної хроматографії дати порівняльну характеристику складу ефірної олії валеріани Гросгейма (Valeriana grosshemii Worosch.) ендемік АР Крим та ефірної олії валеріани виготовленої фірмою «Царство ароматів» м.Судак АР Крим [8].

МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ

Зразки сировини були заготовлені у жовтні 2011 року: в. Гросгейма (АР Крим, Кримський заповідник. Альмінське лісництво) та ефірної олії валеріани виготовленої фірмою «Царство ароматів» м.Судак АР Крим.

Ефірна олія із сировини в.Гросгейма отримана методом перегонки з водяною парою згідно ДФУ 1,2 [1]. В колбу місткістю 2000 мл, додавали 500 мл очищеної води та 40 г свіжеподрібненої на порошок сировини. Дистиляцію проводили зі швидкістю від 3 мл/хв. до 4 мл/хв. протягом 4 годин. Отриману ефірну олію розчинили у 5 мл гексану, зневоднювали безводним сульфатом натрію.

Дослідження проводили на газовому хромато-мас-спектрографі фірми «Хьюлет-Паккард» (НР), США, що складається з хроматографа марки НР6890 GC та мас-селективного детектора 5973N. Компоненти розділяли на кварцовій капілярній колонці фірми НР(НР 19091J-433 YP-5) 30 м довжиною та внутрішнім діаметром 0.25 мм, заповненій 5% фенілметилсилоксаном. Об’єм проби складав 0,3 мкл при коефіцієнті розділу потоку 1:5 та тиску на вході в колонку 40 кПа; газ-носій – гелій. Спектри розглядали як на основі загальних закономірностей фрагментації молекул органічних сполук під дією електронного удару, так і шляхом пошуку у мас-спектральній бібліотеці баз даних «Flavor2.L.» та «NIST98 L.». Ідентифікацію сполук проводили шляхом

порівняння одержаних мас-спектрів хроматографічного піку з мас-спектрами еталонних сполук з найбільшою вірогідністю ідентифікованих програмою розпізнавання на масиві спектрів баз даних.

Таблиця 1

Ідентифіковані речовини ефірної олії валеріан (% від загальної суми)

№ п/п	Час утриман ня	Назва компонен- та	V.x	V.g	№ п/п	Час утриман ня	Назва компонента	V.x.
								V.g
1.	5.25	Етил 3-метилбутірат	-	0.34	30	19.84	Пінокарвіл- ацетат	-
								0.14
2	5.28	Ізовалеріанова кислота	0.190	0.978	31	21.13	α-Терпеніл- ацетат	-
								0.37
3.	5.30	Етил 2-метилбутірат	-	0.71	32	21.29	Евгенол	0.365
								-
4.	7.27	Трициклен	0.490	-	33	21.82	Миртаніл- ацетат	0.22
								12.54
5.	7.59	α-Пінен	4.152	0.24	34	22.12	β –Елемен	-
								0.26
6.	8.14	Камфен	9.196	3.99	35	22.53	Діметиловий ефір тімогідро- хінона	-
								0.50
7.	8.85	Сабінен	0.179	-	36	23.07	α –Гвайен	-
								0.43
8.	9.03- 9.06	β-Пінен	0.831	0.35	37	23.54	Гумулен	-
								0.51
9.	9.35	Мірцен	0.510	-	38	23.67	Дегідроаро- мадендрен	-
								0.41
10.	10.02	α- Феландрен	3.362	-	39	23.92	Аr-куркумен	-
								0.58
11.	10.35	α-Терпінен	0.288	-	40	24.17	Зінгіберен	-
								0.54
12.	10.65	п-Цимен	1.791	0.12	41	24.36	α – Булнезен	0.251
								-
13.	10.78	Лимонен	5.092	0.82	42	24.41	β –Бісаболен	-
								0.15
14.	12.94	Фенхон	0.612	-	43	24.62	Борнілізо- валерат	6.117
								-
15.	13.60	α –Туйон	2.304	-	44	24.63	δ –Кадинен	-
								0.12
16	13.79	Ізоамілвале-рат	-	0.19	45	25.08	4-ізопропіл-4а,5-діметилокта- гідро-2(1н)-нафталенон	-
								0.52
17.	13.98	β – Туйон	0.283	-	4	25.16	Елемол	0.194
								-
18.	14.62	Терпінен-1-ол	0.231	-	47	25.31	Миртенілізо-валерат	-
								1.56
19.	15.13	Транс-β -терпінеол	0.536	-	48	25.69	1,6-гермакрадіен-5-ол	-
								0.10
20.	15.69	Ізоборнеол	0.776	-	49	26.04	Гвайол	5.700
								-
21.	15.81	Цис-β –терпінеол	0.161		50	26.20	Ізогвайол	0.430
								-
22.	16.00	Борнеол	2.742	4.576	51	26.34	Епі-β –евдесмол	0.316
								-
23.	16.26	Терпінен-4-ол	0.146	0.280	52	26.48	7-епі-γ- евдесмол	0.439
								-
24.	16.84	Міртенол	-	0.59	53	26.60	10-епі-β –евдесмол	0.773
								-
25.	17.88	Метилкарвакрол	-	0.10	54	27.00	α –Евдесмол	2.094
								-
26.	17.89	Метил- тимол	-	0.20	55	27.16	Булнгезол	8.593
								-
27	18.60	Метилізокарвакрол	-	0,11	56	27.35	Валеранон	-
								22.15
28.	19.63	Терпінен-4-ол	11.692	13.07	57	28.74	Бензил- бензоат	22.834
29	19.70	Ізоборніл- ацетат	0.423	-	58	29.94		-
								13.47
30.	19.84	Пінокарвілацетат		0,14	59	30.01		-
								0.14
31	21.13	α –Терпеніл- ацетат		0.37	60	32.05		-
								2.03
32	21.29	Евгенол	0.365	0.14				-

Примітка: Vx – Ефірна олія валеріани в флаконах по 5 мл «Царство аромата» АР Крим м. Судак, одержана із кореневищ з коренями валеріани перегонкою з водяною парою. Vg – Ефірна олія одержана з кореневищ з коренями валеріани Гросгейма зібрана в АР Крим.

РЕЗУЛЬТАТИ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ

В результаті проведеної роботи методом газорідинної хроматографії в досліджених зразках ефірної олії валеріани Гросгейма виявлено 60 компонентів із яких ідентифіковано 36 і ефірної олії валеріани фірми «Царство ароматів» м. Судак АР Крим виявлено 40 компонентів із яких ідентифіковано 36 (таблиця 1.). Аналізуючи табл.1 нами встановлено, що для всіх зразків характерні одинакові 10 компонентів: ізовалеріанова кислота Vx 0.190 – Vg 0.978; α – пінен Vx 4.152 – Vg 0.24 ;камфен Vx 9,196 – Vg 3,99; β –пінен Vx 0,831 – Vg 0.35; n-цимен Vx 1,791 – Vg 0,12; лимонен Vx 5,092 – Vg 0.82; борнеол Vx 2.742 – Vg 4.576; терпінен-4-ол Vx 11.692 – Vg 13.07; евгенол Vx 0.365 – Vg 0.14; миртанілацетат Vx 0.22 – Vg 12.54. Аналізуючи ці компоненти видно, що більше всього знаходится у в. Гросгейма ізовалеріанової кислоти, борнеола та миртанілацетата які і обумовлюють седативний ефект валеріани. Головні компоненти в. Гросгейма: -валеранон -22,15; терпінен-4-ол -13,07; миртанілацетат – 12,54; борнеол - 4.576.

Головні компоненти ефірної олії валеріани в флаконах по 5 мл «Царство аромата» АР Крим м.Судак –Бензилбензоат -22.834; терпінен-4-ол – 11,692; камфен 9.196; булнгезол 8.593; гвайол 5.700; лимонен - 5.092; α – пінен -4.152. З головних компонентів досліджуваних ефірних олій співпадає тільки терпінен-4-ол. Всі ці показники ефірної олії валеріани фірми «Царство ароматів» м. Судак АР Крим відрізняються від складу ефірної олії в. Гросгейма.

ВИСНОВКИ

1. Методом порівняльної газово-рідинної хроматографіїї в досліджених зразках ефірної олії виявлено 60 характерних складових для V. Grossheimii Worosch. та ефірної олії валеріани фірми «Царство ароматів» м. Судак АР Крим виявлено 40 характерних складових.

2. За допомогою хромато-мас-спектроскопії в зразках ефірних олій V.Grossheimii Worosch.та ефірної олії валеріани фірми «Царство ароматів» м. Судак – ідентифіковано 36 хімічних сполук.

3. Для всіх зразків ефірних олій валеріан характерні одинакові 10 компонентів; головні компоненти всіх двох досліджуваних зразків ефірних олій валеріани дуже різняться.

4. В результаті проведених досліджень ефірна олія валеріани фірми «Царство ароматів» м. Судак АР Крим відрізняється від складу ефірної олії в. Гросгейма.

ЛІТЕРАТУРА

1. Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». -1-е вид. - Харків: РІРЕГ, 2001. - С 556 с, Доповнення 1. - Харків: РІРЕГ. - 2004. - 520с, Доповнення 2. - Харків: РІРЕГ. - 2008. - 608с.

2. Валерианотерапия нервно-психических болезней/Н.С.Фурса, В.Г.Корниевская, Е.А.Григорьева, С.Н.Соленникова, И.Н.Каграманян, Ю.И.Корниевский//. – Запорожье, 2000.- 348 с.

3. Корнієвська В.Г.,Сур С.В., Лесик І.П. Ефірна олія валеріани лікарської// Фармац. журн.-2000.-№3.-С.95-97.

4. Склад ефірної олії – діагностична ознака сировини валеріани / В.Г.Корнієвська, С.В. Сур, Ю.І.Корнієвський, М.С.Фурса // «Научные направления в созданнии лекарственных средств в фармацевтическом секторе Украины»: Тез. доп. наук. конф.-Харків,2000.-С.154-156.

5. Сур С.В. Состав эфирных масел лекарственных растений// Растительные ресурсы.- 1993.- № 1.- С.98-117.

6. Порівняльна характеристика ефірної олії валеріани лікарської /В.Г.Корнієвська, Ю.І.Корнієвський, М.С.Фурса, С.В. Сур, О.Г.Макаренко, Є.В.Доля //Запорожский мед.ж. 2003.-№1.-С.107-110

7. Порівняльна характеристика компонентів ефірної олії валеріани лікарської //Ю.І.Корнієвський, В.Г.Корнієвська, О.Г.Макаренко, С.В.Панченко, Д.В.Кутова//Запорожский мед.ж. 2009.-№1(52).-С.91-94

8. Флора УРСР. К., 1961.- 491 с.

9. American Herbal Pharmacopoeia Valerian Root April 1999, 25s

10. Bos, R., Hendriks, H., Pras, N., Stojanova, A. S. & Georgiev, E. V. Essential oil composition of Valeriana officinalis ssp. collina cultivated in Bulgaria. J. Essent. Oil Res., 2000, 12, 313–316.

11. Bicchi, C., Drigo, S. & Rubiolo, P. Influence of fibre coating in headspace solid-phase microextraction–gas chromatographic analysis of aromatic and medicinal plants. J. Chromatogr. A, 2000, 892, 469–485.

12. Bicchi, C., Cordero, C., Iori, C., Rubiolo, P. & Sandra, P. Headspace sorptive extraction (HSSE) in the headspace analysis of aromatic and medicinal parts. J. High Res. Chromatogr., 2000, 23, 539–546.

13. Chmical Iformacion Review Document for Valerian (Valeriana officinalis) [CAS No. 8057-49-6] and Oils [CAS No. 8008-88-6] Supporting Nomination for Toxicological Evaluation by the National Toxicology Program U.S November 2009,61.

14. Davies, N. W. Gas chromatographic retention indices of monoterpenes and sesquiterpenes on methyl silicone and Carbowax 20M phases. J. Chromatogr., 1990, 503, 1–25.

15. ESCOP Monographs. ESCOP, Thieme, London, 2003, 539–546.

16. European Pharmacopoeia. 5th ed. Vol. 2. Council of Europe, Strasbourg, 2005, 2667–2668.

17. Fokialakis, N., Magiatis, P. and Mitaku, S. Essential Oil Constituents of Valeriana italica and Valeriana tuberosa. Stereochemical and Conformational Study of 15-Acetoxyvaleranone Z. Naturforsch. 57c, 791D796 (2002); received May 16/June 28, 2002

18. Georgiev, E. V., Stojanova, A. S. & Tchapkanov, V. A. On the Bulgarian valerian essential oil. J. Essent. Oil Res., 1999, 11, 352–354.

19. Letchamo, W., Ward, W., Heard, B. & Heard, D. Essential oil of Valeriana officinalis L. cultivars and their antimicrobial activity as influenced by harvesting time under commercial organic cultivation. J. Agric. Food Chem., 2004, 52, 3915–3919.

20. Paul, C., König, A. W. & Muhle, H. Paciforgianes and tamariscene as constituents of Frullania tamarisci and Valeriana officinalis. Phytochemistry, 2001, 57, 307–313.

21. Pavlovic, M., Kovacevic, N., Tzakou, O. & Couladis, M. The essential oil of Valeriana officinalis L. s.l. growing wild in Western Serbia. J. Essent. Oil Res., 2004, 16, 397–399.

22. Raal, A., Orav, A., Arak,E., Kailas, T., and Mati Müürisepp. Variation in the composition of the essential oil of Valeriana officinalis L. roots from Estonia Proc. Estonian Acad. Sci. Chem., 2007, 56, 2, 67–74

Відомості про авторів:

Панченко С.В. – старший лаборант кафедри біохімії ЗДМУ;

Корнієвська В.Г. – к. фарм. н., старший викладач курсу ботаніки ЗДМУ;

Литвиненко Т.М. - к. фарм. н., старший викладач кафедри технології ліків ЗДМУ;

Коломієць Д.А. – студентка 3 курсу фармацевтичного факультету ЗДМУ.

Адреса для листування: Корнієвська Валентина Григорівна, 69032 м.Запоріжжя, проїзд Дружний 9А кв 22,тел.(061) 236-93-75; м.т. 067 750 19 52