Казимирко Н.К., Максименко А.Н., Татаренко Д.П.

ГЗ «Луганский государственный медицинский университет»

Методика препарирования диафрагмы у белых лабораторних крыс

В настоящее время эксперименты на белых лабораторных крысах не теряют своей актуальности и распространённости. Крысы являются одними из основных экспериментальных систем в биологических и медицинских исследованиях. За долгие годы были выведены специальные лабораторные крысы. Благодаря быстрому метаболизму, неприхотливости, неагрессивности они до сих пор остаются одним из основных объектов во многих отраслях биологии. Исследования этих грызунов дало человечеству медицинские и научные прорывы в таких областях, как лечение рака, эволюционная психология, кибернетика и даже исследование космоса! Многое, что человек сейчас знает о себе самом – заслуга именно крыс. Причина полезности крыс в лаборатории состоит в том, что они фактически похожи на человека: мы делим с ними примерно 70%-ое генетическое сходство. Ученые утверждают, что если экспериментальный препарат положительно действует на крысу, он также вылечит человека [1].

Наше внимание привлекло отпрепарирование диафрагмы от окружающих тканей целиком у белых лабораторных крыс. Данный орган выполняет функции главной дыхательной мышцы. Уплощаясь при сокращении, она увеличивает объем грудной клетки, способствуя вдоху. К тому же, у крыс она очень тонкая, и хорошо кровоснабжается кровеносными сосудами, которые хорошо визуализируются. Это даёт возможность изучать и состояние диафрагмальных соудов. Также следует отметить, что в настоящее время большую распространённость имеет такая патология как диафрагмальные грыжи. Это обусловлено наличием слабых мест в диафрагме, которые требуют изучения и у данных животных. Отпрепарировав диафрагму целиком от окружающих тканей, появляется возможность хорошо визуализировать и изучить данные образования [5].

Целью нашего исследования послужила разработка специальной методики препарирования диафрагмы целиком у белых лаборатоных крыс, поскольку в литературе таковой методики нами не найдено [2].

Препарирование диафрагмы у крыс с помощью нами разработанной методики осуществляется следующим образом. Подопытное животное тщательно осматривают, после чего ингаляционно вводят в эфирный наркоз и удобно фиксируют на препаровальном столике с помощью ремней передней брюшной стенкой вверх. Все манипуляции выполняют в соответствии с принципами Хельсинской декларации, которая была принята Генеральной ассамблеей Всемирной медицинской ассоциации (1964 г.), «Общими этичными принципами экспериментов над животными», утверждённым І Национальным конгрессом по биоэтике, согласованными с положениями «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, которые используются в экспериментальных и других научных целях», Международного совета медицинских научных обществ, Международного кодекса медицинской этики, Конвенции Совета Европы о правах человека и биомедицины [4]. После фиксирования животного делают поперечный разрез острыми ножницами брюшной полости послойно вдоль правой и левой реберных дуг. С помощью анатомического пинцета поднимают переднюю стенку грудной клетки за мечевидный отросток грудины. Затем отделяют печень, осторожно пересекая венечную связи ближе к печени и воротную вену, предварительно наложив на неё лигатуру. Пересекают все остальные связки печени, лигируют собственную печеночную артерию, пересекают сосуды и желчные протоки у ворот печени и извлекают печень из брюшной полости. После этого с помощью анатомического пинцета прижимают все органы брюшной полости вниз, чтобы обеспечить хорошую визуализацию диафрагмы. С помощью тампонов промокают кровь на дне брюшной полости. Препарируют диафрагму с помощью острого офтальмологического скальпеля, отрезая диафрагму сначала от позвоночника, затем по краям реберных дуг сзади наперёд. После этого отделяют плевру от диафрагмы. Диафрагму с помощью анатомического пинцета вытягивают наружу и раскладывают её на белой бумаге, предварительно смоченной физиологическим раствором, чтоб диафрагма не прилипла к поверхности бумаги [3]. На фоне белой бумаги хорошо визуализируются кровеносные сосуды и слабые места диафрагмы.

Разработанный способ позволяет рационально и атравматично препарировать диафрагму, осторожно отпрепаровывая ее от окружающих тканей, что позволяет выделить ее целиком; способствует оптимизации техники манипуляций над данным органом у крыс. Это даёт возможность в дальнейшем проводить исследования над этим органом, изучать его слабые места и кровеносные сосуды.

Литература:

1. Губарева Е.А. Морфологическая оценка качества децеллюляризации сердца и диафрагмы крыс / Губарева Е.А., Сотниченко А.С., Гилевич И.В., Маккиарини П. // Клеточная трансплантация и тканевая инженерия. М. - 2012 . - VII (4). – С. 38-45

2. Каркищенко Н.Н. Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских технологиях. – М. - 2010. – С. 26-40.

3. Кочеткова Т.А. Техника патологоанатомического вскрытия лабораторных животных / Елизарова Е.Н., Жукова Л.В., Кочеткова Т.А. // Пособие по токсикологии для лаборантов. – 1974, - 169 с.

4. Пат. 82264 Украина, МПК А61 В17/00. Способ препарирования диафрагмы у крыс / Казимирко Н.К., Татаренко Д.П., Перцова Ю.Г. — № u2013 01944; заявл. 18.02.13; опубл. 25.07.13, Бюл. №14.

5. Ричард Райдер. «История этики защиты животных и её современный этап», 2000 – С. 121-125.