Медицина/Экспериментальная и клиническая фарма­кология

 

Аспирант Копалеишвили Т.Г.

К.т.н. Кириани А.В.

Д.т.н. Хведелидзе В.Г.

Государственный университет Акакия Церетели, Грузия

 

РЕЗУЛЬТАТЫ  ИССЛЕДОВАНИЙ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЭКСТРАКЦИОННОГО МАСЛА ЧАЙНОГО ЛИСТА И ПЕРСПЕКТИВЫ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ

 

Несмотрия на многовековую историю культуры чая, практически вне поля зрения ученых остались жирорастворимые липидные фракции чайного листа, анализ которых показывает, что они содержат значительно больше необходимых и ценных для организма физиологически активных компонентов, чем "классические" чайные экстракты.

 В департаменте химической технологии Государственного университета Акакия Церетели из грубого чайного сырья с помощью органических растворителей выделена липидная фракция - экстракционное масло чайного листа (ЭМ ЧЛ). 

Предварительно следует отметить следующее: при изучении острой токсичности ЭМ ЧЛ выявлено, что оно относится к группе практически нетоксических веществ. При изучении хронической токсичности основные показатели обмена веществ подопытных животных находились в пределах физиологических колебаний.

Анализ ЭМ ЧЛ производили современными хроматографическими и спектрофотометрическими методами. Содержание кофеина в сырьё и масле определяли модифицированным нами фотометрическим методом. Тяжёлые металлы в ЭМ ЧЛ определяли по ГФ XI, вып. 2.

Одной из отличительной особенностью ЭМ ЧЛ по сравнению с другими растительными липидами является содержание в нем значительного количества кофеина. Установлено, что с увеличением доли нежной фракции  в чайном сырьё суммарное содержание липидов уменьшается, а содержание кофеина увеличивается. Анализ содержания в чае липидов и кофеина показывает, что они значительно отличаются, например, от культивируемого в Японии чая. В Грузинском чае содержание кофеина в максимально благоприятных условиях не превишает 3%, когда в Японском чае эта величина составляет 4-4,5%. Суммарное содержание липидов в Грузинском чае 2,5-3 раза больше, чем в Японском, соответственно 9-10,5% и 3,3-4%, что вероятно обусловлено климатическими факторами.

Жирные кислоты, которые составляют основную массу ЭМ ЧЛ, малочисленны. К ним относятся насыщенная пальмитиновая и ненасыщенные олейновая, линолевая и линоленовая жирные кислоты. Насыщенные кислоты, такие как лауриновая, миристиновая, стеариновая и арахиновая в ЭМ ЧЛ незначительны и их можно отнести к минорным жирным кислотам.

Из ненасыщенных жирных кислот ЭМ ЧЛ особое значение имеют линолевая и линоленовая кислоты. Они и родственные им ненасыщенные жирные кислоты определяют процессы обмена липидов в организме и известны под названием витамина F. Установлено, что этот витамин намного больше в ЭМ ЧЛ воздушносухого чайного  сырья (до 60%), чем в липидах полуфабриката черного чая (до 40%).

ЭМ ЧЛ имеет зеленовато-бурый, темный  цвет, что указывает на наличие в них различных красящих веществ. Действительно, анализ образцов ЭМ ЧЛ показывает, что в них в значительных количествах содержатся каротиноиды, хлорофиллы, феофитины. Суммарное содержание хлорофиллов в ЭМ ЧЛ  воздушносухого чайного  сырья (17,5 мг/г), значительно больше, чем  чем в липидах полуфабриката черного чая  (5,5 мг/г). В процессе переработки чайного сырья количество хлорофиллов уменьшается, но увеличивается количество феофитинов. Однако, суммарное содержание хлорофиллов и феофитинов в процессе переработки также уменьшается от 42,5 мг/г до 35,3 мг/г.

Известно, что повышенное содержание хлорофиллов отрицательно влияет на вкусовые показатели чайного настоя. Однако содержание хлорофиллов совместно с токоферолами в ЭМ ЧЛ придаёт ему антисептические свойства. Этим обясняется тот факт, что ЭМ ЧЛ  в процессе длительного хранения не подвергается прогоркиванию.

Результаты исследований показывают, что ЭМ ЧЛ представляет интерес как богатый природный источник токоферолов и каротиноидов. В месте с тем, их содержание в экстракционном масле воздушносухого сырья (соответственно, 17,5мг/г и 1,8мг/г) значительно выше, чем в экстракционном масле полуфабриката черного чая (7,7 мг/г и 1,2 мг/г). Следует отметить сравнительно низкое содержание β-каротина (до 10%) в общем количестве каротиноидов в чайном масле.

Из токоферолов выделены α, (β+γ) и δ- токоферолы. При этом оказалось, что токоферолы в ЭМ ЧЛ представлены, в основном, α- токоферолом (до 80 % от общего количества).

Таким образом, при разработке технологических схем переработки чайного сырья в экстракционное масло целесообразно использовать воздушносухой чайный лист.

Характеристика экстракционного масла воздушносухого чайного листаприведено в табл1.

Таблица 1

Физико-химическая характеристика ЭМ ЧЛ

Наименование показателей

Характеристика

Внешный вид

Зеленовато-бурая высыхающая

жидкость с характерным запахом

Выход, %

5,0-6,0

Плотность, ρ, г/см3 (200С)

0,920-0,925

Кислотное число, мг КОН/г

0,40-0,45

Йодное число, г Ј2/100г

80-95

Показатель преломления, п20в

1,470-1,475

Сумма каротиноидов, мг/г

β -каротин

16,5-17,5

1,80-1,85

Сумма токофероллов, мг/г

В том числе:α-токоферол

                      β+γ – токофероллы

                      δ – токоферолл

1,70-1,80

1,30-1,40

0,06-0,07

0,30-0,35

Хлорофиллы, мг/г

17,0-18,0

Феофитины, мг/г

25-26

Содержание основных жирных

kислот, % от суммы:

- пальмитиновая

- олейновая

- линолевая

- линоленовая

 

 

23-24

6,0-6,5

15,5-16,0

43-45

Групповой состав липидного

комплекса, в среднем, % :

- полярные липиды

- стерины

- высшие спирты

- свободние жирные кислоты

- триглицериды

- воски

- стерины эфиров

- углеводороды

 

 

19,4

4,5

0,7

2,5

35,8

3,0

33,5

0,6

Тяжёлые металлы, n*10-4 %

0,3

 

Богатый витаминный состав ЭМ ЧЛ, высокое содержание ненасыщенных жирных кислот и других биологически активных компонентов предопределяют использование его в качестве компонента пищевых добавок, лекарственных и косметических средств.

Для установления противовоспалительного действия зубной пасты с ЭМ ЧЛ Экспе­ри­менты про­ве­дены на белых бес­по­родных крысах  с ис­ход­ной мас­сой 100-170г  за 2 ча­са суб­плак­тар­ной ин­ъек­ции  в пра­вую зад­нюю лап­ку 0,1 мл 2% рас­тво­ра фор­ма­ли­на вво­ди­ли внут­ри­же­лу­доч­но 1 мл вод­но­го рас­тво­ра зуб­ной пасты из рас­че­та 4г - су­точ­ной дозы для здо­ро­во­го че­ло­ве­ка сог­лас­но нор­ма­тив­но­му до­ку­мен­ту   [1,2].  Че­рез 5 и 18 ча­сов пос­ле ин­ъек­ции фло­го­ген­но­го аген­та зуб­ную пас­ту  вво­ди­ли  пов­тор­но. Кон­трол­ьной  груп­пе жи­вотных  вво­ди­ли в

рав­ном об­ъе­ме дис­тил­ли­ро­ван­ную во­ду. Че­рез 24 ча­са жи­вотных умер­щвля­ли мгно­вен­ной де­ка­пи­та­ци­ей и про­во­ди­ли оцен­ку ан­тиэ­кссу­да­тив­но­го дей­ствия по фор­му­ле :

% уг­не­те­ния = (РК-Р) / РК х 100%,

где РК -от­но­си­тельный при­рост массы ла­пок с оте­ком и без оте­ка у жи­вотных кон­трол­ьной группы;

 Р   -от­но­си­тельный при­рост массы ла­пок с оте­ком и без оте­ка у жи­вотных, по­лу­чав­ших со­от­вет­ству­ю­щие дозы зуб­ной пасты.

По­лу­чен­ные  ре­зул­ьтаты по­ка­за­ли (табл.2), что в ис­пол­ьзу­е­мой до­зе зуб­ная пас­та, со­дер­жа­щая 1%, 3% и 5% экстракционнон масло чайного листа оказ­ыва­ет уме­рен­ное ан­тиэ­кссу­да­тив­ное дей­ствие, т.е. уг­не­та­ет раз­ви­тие оте­ка на 25%, 29%, 41% со­от­вет­ствен­но ис­сле­ду­е­мой кон­цен­тра­ции экстрак­та.

С цел­ью оп­ре­де­ле­ния вли­я­ния зуб­ной пасты, со­дер­жа­щей маслоконцентрат чая на про­цессы ал­ьте­ра­ции при вос­па­ле­нии экспе­ри­менты про­ве­дены на белых бес­по­родных  крысах  мас­сой  180-190г. Зуб­ную  пас­ту  вво­ди­ли  из  рас­че­та  4г     су­точ­ной  дозы  для  че­ло­ве­ка.  У  жи­вотных  на  бо­ку  выстри­га­ли  шерсть  и  подкож­но  вво­ди­ли  0,5 мл  9%  рас­тво­ра  ук­сус­ной  кис­лоты.  Однов­ре­мен­но

внут­риб­рю­шин­но вво­ди­ли по 0,4 м  рас­тво­ра дек­стри­на в до­зе 300 мг/кг. 

Иссле­ду­ем­ые пасты вво­ди­ли в об­ъе­ме 1мл в ви­де вод­но­го рас­тво­ра за 1 час  до вве­де­ния ук­сус­ной кис­лоты и за­тем ежед­нев­но в те­че­нии 24 су­ток. Кон­трол­ьной груп­пе  жи­вотных  вво­ди­ли  в  рав­ном  ко­ли­чес­тве  дис­тил­ли­ро­ван­ную  во­ду.      Выра­жен­ность ал­ьте­ра­ции (нек­роз) учит­ыва­ли на ос­но­ве вычис­ле­ния сред­ней пло­ща­ди  нек­ро­ти­зи­ро­ван­ной  тка­ни. Изме­ре­ния  про­во­ди­ли  на  2, 7, 14 и 25  

 сут­ки. Ре­зул­ьтаты ис­сле­до­ва­ний пред­став­лены в таб.3.

 

                                                                                                     Таб­ли­ца 2

Вли­я­ние зуб­ной пасты с экстракционным маслом чайного листа на

экссу­да­тив­ную фа­зу вос­па­ле­ния при фор­ма­ли­но­вом оте­ке ла­пок у белых крыс

Кон­цен­тра­ция чай­но­го масла в пас­те, %

От­но­си­тельный при­рост массы ла­пок с оте­ком и без оте­ка, мг

% уг­не­те­ния оте­ка

1

3

5

Дис­тил­ли­ро­ван­ная во­да

103,4±11,3*

98,0±12,9*

81,7±13,9*

137,2±10,6

25

29

41

0

При­ме­ча­ние:  ко­ли­чес­тво жи­вотных рав­но 6. * - раз­ли­чие дос­то­вер­но по

от­но­ше­нию к кон­тро­лю при   0,05.

 

Таб­ли­ца 3

Вли­я­ние зуб­ной пасты с экстракционным маслом чайного листа

на про­цесс ал­ьте­ра­ции у белых крыс

кон­цен­тра­ция  мас­локон­цен­тра­та чая в зуб­ной пас­те, %

 

Сред­няя пло­щадь нек­ро­за, мм

 

 

2 сут.

7 сут.

14 сут.

25 сут.

1

171,5±15,4

198,0±22,5*

102,3±13,7*

За­живл.

3

183,0±21,8

265,5±16,0*

119,0±19,8*

34,5±6,9*

5

175,0±14,5

269,0±34,7*

128,0±20,5*

29,5±7,6*

Дис­тил­ли­ро­ван­ная во­да

194,0±17,3

415,0±44,3

173,5±10,5*

78,5±9,9

Примечание: ко­ли­чес­тво жи­вотных рав­но 6.  *- раз­ли­чие дос­то­вер­но по

от­но­ше­нию к кон­тро­лю при 0,05.

 

Из при­ве­денных данных сле­ду­ет, что зуб­ная пас­та, со­дер­жа­щее экстракционное масло  чайного листа , умен­ьша­ет раз­ви­тие нек­ро­за и

спо­соб­ству­ет ак­тив­но­му ра­но­за­жив­ле­нию.

С цел­ью изу­че­ния воз­мож­но­го мес­тно раз­дра­жа­ю­ще­го дей­ствия зуб­ной пасты,  со­дер­жа­щее   экстракционное масло    чайного   листа,      ис­сле­до­ва­ния

про­ве­дены на белых крысах мас­сой 160±10 г. Зуб­ную пас­ту   из   рас­че­та   4г  

вво­ди­ли в ви­де вод­но­го рас­тво­ра в пря­мую киш­ку. Иссле­до­ва­ния про­во­ди­ли

че­рез 24 ча­са пос­ле вве­де­ния пасты.  При мик­рос­ко­пи­чес­ком ос­мот­ре за­метных приз­на­ков раз­дра­же­ния сли­зис­той обо­лоч­ки пря­мой киш­ки не наб­лю­да­ли.

      Сли­зис­тая  пря­мой  киш­ки  была  нор­мал­ьной  ок­рас­ки,  без то­чечных

кро­во­из­ли­я­ний  и  оте­ков.   Наб­лю­да­е­мая   кар­ти­на   ха­рак­тер­на   для   всех

кон­цен­тра­ций чайного масла чая в зуб­ной пас­те.

Та­ким об­ра­зом, по­лу­чен­ные дан­ные сви­де­тел­ьству­ют о на­ли­чии выра­жен­ной спо­соб­нос­ти зуб­ной пасты, со­дер­жа­щей 1%, 3%.,  5% масла чайного листа,

ог­ра­ни­чи­вать  экссу­да­тивный  ком­по­нент  вос­па­ле­ния и  вос­па­ли­тел­ьное

пов­реж­де­ние тка­ни, уме­ре­но вли­я­ет на про­цессы ал­ьте­ра­ции и про­ли­фе­ра­ции. Это поз­во­ля­ет ре­ко­мен­до­вать ис­сле­ду­ем­ые пасты к при­ме­не­нию.