Доля В.С., Мозуль В.И., Вертий И.Н.

Запорожский государственный медицинский университет, Украина

Лаконос американский - перспективный источник биологически активных соединений

Род лаконос (Phytolacca) насчитывает 35 видов, распространенных в тропических и субтропических регионах земного шара [6,9] В культуре выращивают лишь один вид – лаконос американский (Phytolacca americana) [6,10]. Лаконос распространен на равнинах и в горных районах Кавказа, а в Украине – на черноморском побережье, в Крыму [6]. В официнальной медицине лаконос используется в Англии, Америке, Германии, Японии [9]. Препараты из корней лаконоса используются как слабительные, противоцинготные, противоопухолевые, противовоспалительные, антибактериальные средства [4,6,8]. В эксперименте алкалоид фитолакцин проявляет желчегонное, болеутоляющее, угнетающее ЦНС, антиревматическое, иммуностимулирующее действие [6]. Его назначают для лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, при заболеваниях почек [6,8,10]. Отвар из ягод лаконоса способствует снижению артериального давления на начальных стадиях гипертонии, улучшению обмена веществ [6,9,10]. Настойка корня лаконоса обладает противовоспалительным, рассасывающим действием. Она применяется при отеках, остеохондрозе, радикулите, артрите, вывихах и ушибах в виде растираний и компрессов [6,8,9,10].

Растение изучено недостаточно. Поэтому целью работы явилось изучение качественного состава и количественного содержания биологически активных веществ лаконоса американского.

Материалы и методы Исследовались листья, плоды, корни и семена лаконоса американского, собранные в различные фазы вегетации в Запорожской, Днепропетровской и Николаевской областях. Количественное определение жирных масел определяли в аппарате Сокслета. Числовые показатели жирного масла определялись общепринятыми методами [2,3]. Липиды из семян лаконоса американского извлекали петролейным эфиром. Ацилглицериды переэтерифицированы метилирующей смесью, представляющей собой 0,5% раствор метилата натрия в метаноле. Полученные метиловые эфиры жирных кислот анализировали на газожидкостном хроматографе «Цвет -4» с пламенно-ионизационным детектором ДИП-1.

Условия хроматографирования: колонки стальные, длиной 2,5 м; твердый носитель хроматон N-AV (0,25-0,31 мм); жидкостная фаза – полиэтиленгликольсукцинат (19%); газ-носитель – азот. Температура: термостатирующих колонок - 185°С, детектора - 220°С, инжектора - 250°С. Идентификацию компонентов жирного масла проводили по относительным величинам удерживания методом добавки чистых веществ. Количественное содержание компонентов жирного масла определяли методом внутренней нормализации[3].

Идентификацию флавоноидов проводили, используя цветные реакции, тонкослойную хроматографию, УФ-спектроскопию. Исследование количественного содержания флавоноидов проводили спектрофотометрическим методом на основании реакции с алюминия хлоридом в пересчете на рутин [1], полифенолов – перманганатометрическим методом в пересчете на танин [2], аскорбиновой кислоты – титриметрическим методом [2]. Определение содержания аминокислот в траве лаконоса американского проводили с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии и по реакции взаимодействия с раствором нингидрина. Статистическую обработку полученных данных проводили, используя критерий Стьюдента[5].

Анатомическое строение изучали на поверхностных препаратах листьев по общепринятым методикам [7]. Для микродиагностики использовали микроскоп МБР-1. Полученные данные фиксировали цифровой фотокамерой Canon Digital Ixus 120 IS.

Результаты и их обсуждение Количественное содержание жирного масла в семенах лаконоса американского составило 12±0,12%. Физико-химические показатели жирного масла представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Физико-химические показатели жирного масла лаконоса американского

Показатель	Значение
Показатель преломления,	1,4740
Кислотное число, мг KOH	3,26±0,08
Число омыления, мг КОН	188,94±0,15
Йодное число, % йода	85,01±0,09
Число Рейхерта-Мейссля, %	1,05±0,03
Число Поленске, %	0,36±0,01
Неомыляемые вещества	1,89±0,12
Фосфатиды, %	0,51±0,03

Методом газожидкостной хроматографи в жирном масле лаконоса американского идентифицированы семь жирных кислот. Как показали исследования, основными компонентами жирного масла являются олеиновая (44,80±0,01%), линолевая (43,67±0,01%), пальмитиновая (8,3±0,03%) кислоты. Значительно меньше обнаружено линоленовой (2,50±0,01%), стеариновой (0,83±0,01%) кислот, в незначительном количестве - эйкозеновая и пальмитолеиновая кислоты.

Методом тонкослойной хроматографии в листьях и корнях установлены флавоноиды: рутин, кверцетин, изокверцетин, астрагалин. Количественное содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в листьях лаконоса составляет 2,18±0,11%, в корнях – 2,87±0,12%.

Дубильные соединения представлены коденсированными и гидролизуемыми группами. Содержание дубильных веществ в листьях составило 4,34±0,03%, в плодах – 3,5±0,15%.

Содержание аскорбиновой кислоты в листьях лаконоса составляет 0,92±0,02 мг%.

Методом высокоэффективной жидкостной хроматографи установлено, что листя и корень лаконоса содержат до 17 аминокислот. В наибольшем количестве идентифицированы метионин (1,43 мг%), аланин (0,98 мг%), аспарагин (3,74 мг%).

При определении анатомо-диагностических признаков установлено: клетки нижнего и верхнего эпидермиса многоугольные. Устьица немногочисленные, овальные, с широко раскрытой устьичной щелью, окружены 4-5 околоустьичными клетками. Волоски простые, двух-, трехклеточные, мелкие. Характерно наличие кристаллов оксалата кальция.

Выводы

1. Методом газожидкостной хроматографии в жирном масле лаконоса американского идентифицировано 7 компонентов. В наибольшем количестве определены олеиновая (44,80±0,09%), линолевая (43,67±0,3%) и пальмитиновая (8,3±0,03%) кислоты.

2. Установлен качественный состав и количественное содержание флавоноидов, полифенольных соединений, аминокислот, витаминов.

3. При анатомическом исследовании выявлены волоски и друзы оксалата кальция.

Литература

1. Блажен А. Фенольные соединения растительного происхождения/ А.Блажен, А.Шутый. – М.: Мир, 1977. – 240 с.

2. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. – 11-е изд., доп. – М.: Медицина, 1989. – 295 с.

3. Державна фармакопея України.- 1-е вид. – Х.: PIPER, 2001. – 556 с.

4. Кьосев П.А. Полный справочник лекарственных растений / П.А. Кьосев. – М.: Изд-во Эксмо, 2004. – 992 с.

5. Лапач С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Exсel / С.Н. Лапач, А.В. Чубенко, П.Н.Бабич. – Киев: Марион, 2000. – 320 с.

6. Мазнев Н. И.Большая энциклопедия высокоэффективных лекарственных растений: энциклопедия / Н.И. Мазнев. - М. : Эксмо, 2008. - 608 с.

7. Справочник по ботанической микротехнике: основы и методы / Р.П. Барыкина, Т. Д. Веселова, А.Г.Девятов. – М.: МГУ, 2004. – 311 с.

8. fitoapteka.org/herbs-l/3785-101020-americana

9. ru.wikipedia.org/wiki/Лаконос

10. www.refine.org.ua