Старавойтов В.А., Рогова Л.Н.

Волгоградский государственный медицинский университет, Россия

Способы оценки деструктивно-регенераторных процессов в зоне язвенного дефекта желудка

В последние годы существенно изменились представления о механизмах регуляции регенераторных процессов в зоне деструкции. Основными составляющим этого процесса являются: клеточная пролиферация и дифференцировка, миграция клеток, а также реструктуризация стромы и ангиогенез. Все эти изменения не возможны без адекватного энергетического обеспечения регенерирующих тканей, что сопряжено с поддержанием целостности клеточных мембран [5].

Целью настоящей работы был поиск косвенных методов оценки интенсивности детруктивно-регенераторных процессов в зоне экспериментальной ацетатной язвы желудка (ЭАЯЖ).

Для решения поставленной цели была произведена оценка состояния энергетического метаболизма в зоне язвенного дефекта путем измерения активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ), а так же оценка состояния целостности клеточных мембран путем измерения концентрации калия (К+) в оттекающей от зоны изяъвления лимфе [2].

Эксперименты выполнены на 56 крысах линии Вистар обоего пола, которые составили 4 экспериментальные серии. Крысы 1 и 3 серии составили контрольные группы, крысы 2 и 4 серии – подопытные группы у которых моделировалась ЭАЯЖ по методу Окабе С. [4]. Животные 1 и 2 серии выводились из эксперимента на 7-е сутки, животные 3 и 4 серии – на 14-е сутки.

Площадь язвенного дефекта оценивалась по его размерам, СДГ в тканях по методу Павлюк В.М. и др., концентрация калия (К+) в лимфе нефелометрическим методом без депротеинизации стандартным набором фирмы “Ольвекс”. Статистическая обработка результатов выполнялась с использованием пакета анализа Excel с применением методов сравнительной (t-критерий Стьюдента) и корреляционной статистики (коэффициент Пирсона, r) [3].

Контроль размеров язвенного дефекта –традиционный способ оценки интенсивности деструктивно-регенераторного процесса в зоне язвы. На 7-е сутки с момента моделирования ЭАЯЖ площадь язвенного дефекта составила 54,43±3,62 мм2. На 14-е сутки площадь язвенного дефекта была меньше на 53,8% и составила 25,13±0,91 мм2 (p<0,001). Такая динамика изменения площади свидетельствует об активации пролиферации в зоне язвенного дефекта.

Процесс регенерации сопровождается восстановлением структуры клеточных мембран и межклеточных взаимодействий, что должно приводить к компартменизации основных внутриклеточных катионов. Одним из таких внутриклеточных катионов является калий. Мы исследовали уровень К+ в лимфе из tr.intestinalis, который является коллектором дренирующим ткани верхнего отдела ЖКТ и, таким образом, отражает концентрационные изменения макроэлементов в межклеточном матриксе.

На 7-е сутки концентрация К+ в лимфе tr.intestinalis значимо не изменялась и составила 3,69±0,34 ммоль/л по отношению к 4,30±0,10 ммоль/л в контроле. На 14-е сутки, отмечалось уменьшении концентрации К+ в лимфе до 2,54±0,17 ммоль/л по сравнению с 4,29±0,15 ммоль/л в контроле (p<0,001). Данная динамика может свидетельствовать о накоплении К+ регенерирующими клетками в зоне язвенного дефекта на 14-е сутки, что приводит к снижению его концентрации в интерстиции и, следовательно, в лимфе [2]. Таким образом, к 14-м суткам ЭАЯЖ происходит задержка К+ клетками регенерирующих тканей.

Изменение пролиферативной активности в тканях связано с изменением энергетики в них. Полноценная пролиферация требует интенсивного клеточного деления, которое может происходить только в аэробных условиях. Мы исследовали активность СДГ - важнейшего фермента цикла Кребса в зоне изъязвления, который в достаточном количестве представлен во многих клетках слизистой оболочки желудка.

На 7-е сутки ЭАЯЖ активность СДГ в зоне изъязвления возрастала до 4,20±0,27 ед/г по сравнению с 3,41±0,21 ед/г в контроле (p<0,05). При ЭАЯЖ на 14-е сутки активность СДГ в зоне изъязвления значимо не изменялась и составила 3,24±0,24 ед/г по отношению к 3,55±0,62 ед/г в контроле.

Таким образом, на фоне уменьшения площади язвенного дефекта от 7-х к 14-ым суткам имеет место снижение активности СДГ с исходно высоких значений до уровня контрольных. Такая динамика может свидетельствовать о снижении интенсивности регенераторных процессов, т.к. полная эпителизация язвенного дефекта еще не достигнута, а интенсивность аэробных процессов снижается.

В работах Chávez et al. показано, что ионы К+ усиливают торможение окисления сукцината, по-видимому, вследствие замедления активации СДГ своим субстратом [1]. Данный механизм объясняет снижение активности СДГ до уровня контрольных значений на 14-е сутки по причине внутриклеточной задержки К+. В пользу ингибирующего влияния К+ на активность СДГ свидетельствует отрицательная средняя по силе корреляционная взаимосвязь между уровнем активности СДГ в тканях и концентрацией К+ в лимфе tr.intestinalis как на 7-е (r=-0,56), так и на 14-е сутки (r=-0,60) эксперимента.

Таким образом, на 7-е сутки формирования язвенного дефекта в зоне изъязвления сохраняются деструктивные процессы на фоне значительного усиления аэробного окисления, в то время как на 14-е сутки, при накоплении калия в тканях, интенсивность аэробного окисления снижается.

Литература:

1. А. Г. Шугаев и др. Влияние КС1-среды на окисление сукцината и генерацию перекиси водорода в митохондриях корнеплода сахарной свеклы. Т.57, № 2, 2010, с 200-208.

2. Комплексные антигомотоксические препараты / Справочник.— К.: Каскад-Медикал, 2004. – 279с.

3. Лапач С.Н. Статистика в науке и бизнесе/С.Н. Лапач, А.В. Чубенко, П.Н. Бабич. - Киев: Морион, 2002. – 640 с.

4. Okabe S. An Overview of acetic acid ulcer models. The history and state of the art of peptic ulcer research/S. Okabe, K. Amagase.//Biol.pharm.bull. - 2005. – Vol.28, №8. – P.1321-1341.

5. Tarnawski A. Cellular and molecular mechanisms of ulcer healing 2005/A. Tarnawski//Lessons from gastrointestinal ulcers. – California, 2005. – Р. 2-17.