Рогова JI.H., Поветкина В.Н., Шестернина Н.В., Шепелева Т.И.
Волгоградский государственный медицинский университет Активность протеолитических ферментов в разных зонах слизистой препилорической области у крыс с экспериментальной ацетатной язвой желудка
В основополагающих положениях классической гастроэнтерологии одним из ведущих агрессивных факторов в желудочно-кишечном тракте обозначен пепсин. Дальнейшее изучение этой проблемы показало, что наряду с пепсином, не менее агрессивными свойствами обладают пепсиногены слизистой, активность которых выявляется как в резко кислой среде, так и значениях pH, приближающихся к нейтральным величинам. Эти пепсиногены имеют лизосомальное происхождению [1]. В патогенезе геликобактерной язвы ведущую роль играет хроническое воспаление, углубление которого связано с высвобождением лизосомальных гидролаз.
Целью исследования было определение активности протеолитических ферментов в тканях язвенного дефекта и тканях, прилежащих к нему, в препилорической области у крыс с экспериментальной ацетатной язвой желудка.
Материал и методы: Исследование
было выполнено на 12 белых крысах линии Вистар под нембуталовым наркозом (40мг/кг).
В экспериментальной серии моделировали ацетатную язву по Окабэ С. [3]. В
качестве контроля использовали показатели, полученные от животных, которым
выполняли все манипуляции, что и экспериментальным, только не моделировали
язву. Пробы тканей получали через трое суток с момента моделирования язвы из
зоны изъязвления и прилежащих к дефекту тканей из препилорической зоны на малой
кривизне желудка. Протеолитичекую активность определяли по методу Anson М., Minsky А. в
модификации Амирова А.Ш. (1988) и измеряли в единицах экстинции. Статистическая
обработка данных производилась с помощью пакета программ OfficeXP и Statistica
6.0.
Результаты
и обсуждение: У крыс контрольной серии по
отношению к исходному состоянию протеолитическая активность слизистой из края
язвы и тканей, прилежащих к ней, при pH 6,5 практически не отличаются:
0,04±0,007 и 0,04±0,004, соответственно, (Р>0,1). При pH 4,5 в зоне дефекта
изучаемый показатель 0,09±0,007 , в прилежащей зоне - 0,07±0,007, ( Р>0,1).
При pH 3,5 и 1,5 также не выявляются значимые различия: при pH 3,5 - 0,06±0,04
и 0,57±0,037, (Р>0,1); при pH 1,5 - 0,45±0,05 и 0,42±0,03, соответственно
(Р>0,1).
При ацетатной язве через 3 сут с момента моделирования в тканях язвенного дефекта по отношению к контролю при pH 6,5 пептическая активность несколько уменьшалась: с 0,04±0,004 до 0,025±0,003 ед. экст. (Р<0,05). Также незначительно изменялись изучаемые свойства при pH 1,5 - с 0,42±0,03 до 0,33±0,03 ед. экст., (Р>0,1). Значимо снижалась протеолитическая активность при pH 4,5: с 0,07±0,007 до 0,058±0,006 ед. экст. (Р<0,05), при pH 3,5 – с 0,57±0,037 до 0,38±0,05 ед. экст. (Р<0,05). При сравнительном исследовании протеолитической активности слизистой, полученной из зоны язвенного дефекта ацетатной природы, по отношению к показателям в исходном состоянии выявлено их уменьшение при pH 6,5 на 37,5%, (Р>0,1), при pH 4,5 на 35,6%, (Р<0,01), при pH 3,5 на 26,7%, (Р<0,01), pH 1,5 на 26,7%,(Р>0,1).
В тканях желудка, прилежащих к зоне изъязвления, протеолитическая активность при pH 6,5 практически не изменялась: и 0,03 5±0,004 ед. экст. в контрольной серии и 0,036±0,005 ед. экст . после моделирования (Р>0,1). При pH 4,5 ; 3,5; 1,5 значение изучаемого показателя значимо не изменялись: при pH 4,5 - 0,08±0,008 ед. экст. в контроле против 0,062±0,004 ед. экст. при изъязвлении слизистой, (Р>0,1) , при pH 3,5 - 0,53±0,036 ед. экст у контрольных животных, 0,46±0,07 ед. экст у крыс с ацетатной язвой, (Р>0,1). В резко кислой среде при pH 1,5 значение протеолитической активности практически не изменяется: 0,41±0,06 ед. экст. против 0,38±0,04 ед. экст., (Р>0,1). При сравнительном исследовании протеолитической активности слизистой, полученной из тканей, прилежащих к зоне язвенного дефекта, по отношению к показателям в исходном состоянии выявлено их уменьшение при pH 4,5на 31,1%, (Р>0,1), при pH 3,5 на 23,3%, (Р<0,05), pH 1,5 на 13,6%,(Р>0,1). Значимых различий в интенсивности протеолиза при pH 6,5 в исходном состоянии и при изучаемой патологии не выявлено (Р>0,1).
На фоне сформировавшейся ацетатной язвы в слизистой препилорической области выявляется уменьшение протеолитической активности практически при всех изучаемых значениях pH, связанное, очевидно, с «опустошением» клеток. Воспалительная деструкция тканей, видимо, приводит к выходу лизосомальных ферментов из клеток. Максимальное повреждение с «опустошением» клеток выявляется в тканях зоны изъязвления при pH 6,5; 4,5; 3,5. Известно, что катепсины лизосомального происхождения преимущественно активируются при pH от 3,0 до 4,5, а пепсин - при pH ниже 2,0 [2]. Это даёт основание полагать что, в тканях зоны изъязвления снижение пептический активности происходит в основном за счёт катепсинов на фоне небольшого снижения образования пепсиногена.
Вывод: На фоне сформировавшейся ацетатной язвы в тканях зоны изъязвления и в тканях, прилежащих к язве, отмечается уменьшение протеолитической активности при pH 6,5; 4,5; 3,5 наиболее выраженное в зоне изъязвления.
Литература.
1. Никольский В.И., Сергатскйй К.И. Этиология и патогенез острых гастродуаденальных изъязвлений, осложненных кровотечением //Вестник хирургической гатроэнтерологии. -2009.- N. 4. - с. 54
2. Титова Н.М., Савченко А. А., Замай Т. Н. и др. Биохимия и молекулярная биология. Версия 1.0 [Электронный ресурс]: конспект лекций. - Электрон, дан. (10 Мб). - Красноярск: ИПК СФУ. -2008. - с. 131-147.
3. Okabe S., Amagase K. An overview of acetic acid ulcer models. The history and state of the art of peptic ulcer research // Biol. Pharm. Bull.-2005.-V.28, №8.-P.1321-1341.