МОДЕЛИРОВАНИЕ СЕПТИЧЕСКОГО ШОКА У КРЫС

асп. Струков Д.В., д.м.н. Александрович Ю.С., д.м.н. Васильев А.Г., к.м.н, к.м.н. Трашков А.П., к.м.н. Кравцова А.А., к.м.н. Балашов Л.Д.

Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет, г. Санкт-Петербург, Россия

Введение.

Целью данной работы было создать эффективную модель септического шока у грызунов. Данная модель была получена методом внутривенного введения крысам живой культуры бифидобактерий. Проанализированы показатели центральной гемодинамики, измеренные прямым методом. Оценено состояние эндотелия кровеносных сосудов путем определения содержания оксида азота (II) (NO), эндотелиального фактора роста сосудов – А (VEGF-A) и тканевого активатора плазминогена (tPA) плазмы. Параметры гемостаза оценивали по уровню фибриногена и растворимых комплексов мономерного фибрина (РКМФ). Полученная модель полностью безопасна для исследователя, может быть легко воспроизведена в условиях научной или учебной лаборатории и применяться для фундаментальных исследований проблемы септического шока, доклинических испытаний лекарственных средств и в учебных целях.

Материалы и методы. В исследование включены 32 самца альбиноса серых крыс массой тела 280 – 310 г., разведения ГП «Рапполово» РАМН (Ленинградская область). Подопытные крысы были разделены на две группы, «контроль» и «шок» по 16 особей в каждой. В группу «контроль» вошли здоровые животные без признаков соматической и инфекционной патологии, для исследований показателей гемодинамики, состояния эндотелия сосудов и активности системы гемостаза в норме (Рис. 1.). Группу «шок» составили здоровые животные, которым производили моделирование септического шока путем внутривенного введения живой культуры бифидобактерий (Рис.2.).

Всем крысам под наркозом (внутримышечное введение смеси – кетамин (50 мг/кг) + реланиум (5 мг/кг)) производили катетеризацию бедренной вены и общей сонной артерии. К артериальному катетеру присоединяли принимающую линию программно-аппаратного комплекса PhysExp (ООО «Cardioprotect», Россия), предназначенного для инвазивного определения показателей гемодинамики у лабораторных животных.Крысам группы «шок» с 5-й по 20-ю минуты медленно в три приема внутривенно вводили 1,0 мл взвеси живой культуры бифидобактерий (Бифидумбактерин, Микроген НПО ФГУП (НПО «Вирион»), Россия) в дозе (370 мг/кг) в стерильном физиологическом растворе. Взятие крови для лабораторных исследований производили на 60-й минуте от начала эксперимента путем транскутанной пункции сердца крысы в вакуумные системы с антикоагулянтом K3-EDTA.

Результаты. В группе контроль системная гемодинамика не претерпевала значимых отклонений от нормальных показателей (рис. 1.). Внутривенное введение подопытным животным культуры живых бифидобактерий приводило к развитию характерной картины тяжелого септического шока к 15-й минуте от начала введения препарата (рис. 2.). Это проявлялось, статистически значимым снижением всех исследуемых показателей системной гемодинамики у крыс группы «шок», по сравнению с аналогичными показателями у крыс группы «контроль» (табл. 1). Выраженные гемодинамические нарушения у подопытных крыс сочетались с развитием эндотелиальной дисфункции и усилением активности гемостатических механизмов (табл. 2).

Рисунок. 1. Показана 15-ая минута эксперимента в группе «контроль».

Рисунок. 2. Графическое представление тяжелого септического шока у крысы через 15 минут после внутривенного введения культуры бифидобактерий.

Таблица 1.

Показатели системной гемодинамики у крыс при внутривенном введении живой культуры бифидобактерий (M±SD)

Исследуемый показатель	Исследуемые группы крыс
	контроль	шок
АД систолическое, мм рт.ст.	124±13,3	41±20,3*
АД диастолическое, мм рт.ст.	90±15,6	25±14,2*
АД среднее, мм рт.ст.	107±14,2	32±16,9*
ЧСС, уд/мин	408±29,1	269±63,8*
*- отличия от группы «контроль» достоверны на принятом уровне значимости

Таблица 2.

Состояние эндотелия и системы гемостаза у крыс при внутривенном введении живой культуры бифидобактерий (M±SD)

Исследуемый показатель	Группа крыс
	контроль	шок
NO, мкмоль/л	101,0±10,56	220,4±57,93*
VEGF-A, пг/мл	21,5±6,90	7,9±5,36*
tPA, нг/мл	10,2±0,45	9,9±4,1
Фибриноген, г/л	5,8±0,25	7,0±1,20*
РКМФ, %	25	100*
*- отличия от группы «контроль» достоверны на принятом уровне значимости

Заключение. Внутривенное введение крысам живой культуры бифидобактерий является адекватной моделью септического шока. Это подтверждается характерными изменениями системной гемодинамики подопытных животных, развитием эндотелиальной дисфункции и активацией системы гемостаза в ответ на бактериемию. Описанная модель полностью безопасна для исследователя, может быть легко воспроизведена в условиях научной или учебной лаборатории и применяться для фундаментальных исследований проблемы септического шока, доклинических испытания лекарственных средств и в учебных целях, при проведении практических занятий со студентами медицинских вузов.