Аладинский В.А.^1,2, Никифоров Н.Г.^1,3,4, Горлова О.Ю.^1,2, Темченко А. В. ^1,2, Азарова И. Н. ^1,2, Орехов А.Н.^1,3

1. Научно-исследовательский институт атеросклероза (Сколково), 2. Московский Физико-Технический Институт (Государственный университет), 3. Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии Российской Академии медицинских наук, 4. Российский кардиологический научно-производственный комплекс Министерства здравоохранения Российской Федерации

АТЕРОГЕННЫЕ ЛНП ВЫЗЫВАЮТ ПОНИЖЕННУЮ ЭКСПРЕССИЮ ПРОВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ЦИТОКИНА TNF-α И ПОВЫШЕННУЮ ЭКСПРЕССИЮ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ХЕМОКИНА CCL18 МАКРОФАГАМИ ЧЕЛОВЕКА

Введение: Врожденный иммунитет играет важную роль в атерогенезе. В сосудистой стенке происходит проникновение моноцитов из крови в интиму и их дифференцировка в макрофаги. Макрофаги способны поглощать атерогенные липопротеиды низкой плотности (ЛНП) и накапливать липиды, что приводит к образованию пенистых клеток. Современные представления об атеросклерозе гистологически позволяют рассматривать атеросклероз как воспалительную патологию, поэтому при прогрессировании атеросклероза должна наблюдаться поляризация макрофагов по провоспалительному фенотипу. Однако, в связи с противоречивыми результатами при исследовании поляризации макрофагов на клеточных моделях, вопрос о способности атерогенных ЛНП модулировать фенотип макрофагов остается открытым. Нами было изучено влияние атерогенных ЛНП на секрецию и экспрессию провоспалительного цитокина TNF-α и противовоспалительного хемокина CCL18 макрофагами человека.

Методы: Секреция TNF-α и CCL18 индуцировалась ИФН-гамма и ИЛ-4 соответственно и измерялась методом твердофазного ИФА в культуральной среде первичной культуры моноцитов человека. Экспрессия генов TNF-α и CCL18 измерялась методом ПЦР в реальном времени. Внутриклеточное накопление липидов вызывалось путем инкубации клеток с атерогенными ЛНП, выделенными из сыворотки больных атеросклерозом.

Результаты: При инкубации макрофагов с атерогенными ЛНП наблюдалась пониженная экспрессия TNF-α по сравнению с клетками, инкубированными с неатерогенными ЛНП (рисунок 1). Экспрессия CCL18 в макрофагах, инкубированными с атерогенными ЛНП, была выше по сравнению с клетками, инкубированными с неатерогенными ЛНП (рисунок 2). При измерении секреции TNF-α и CCL18 были получены аналогичные результаты, однако значения не достигли статистической значимости (рисунок 3).

Выводы: Атерогенные ЛНП не оказывают провоспалительного эффекта на фенотип макрофагов, напротив, было обнаружено, что атерогенные ЛНП способствуют противовоспалительной активации макрофагов, что проявлялось в пониженной экспрессии TNF-α и повышенной экспрессии CCL18. На уровне секреции TNF-α и CCL18 выраженность эффекта снижается.

Рисунок 1. Экспрессия гена TNF-α в макрофагах при инкубации с ЛНП. Стимуляция ИФН-гамма. N = 4, p = 0,047.

Гистограмма 2. Экспрессия гена CCL18 в макрофагах при инкубации с ЛНП. Стимуляция ИЛ-4. N = 3, p = 0,013

Рисунок 3. Профиль активации макрофагов при инкубации с ЛНП. Стимуляция ИФН-гамма. N = 8, p = 0,226