Биологические науки/6. Микробиология

Мацай Ю. А., Сосонная Е. В., Троценко А. А.,

Гонсалес Кабанова Лесли, Рзаев Т. Г., Россихин В.В.

Национальный технический университет «Харьковский политехнический институт», Харьков

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ СИНЕГНОЙНОЙ БАКТЕРИИ

К ДЕКАМЕТОКСИНУ И ДИМЕКСИДУ

Декаметоксин считается достаточно действенным антисептиком, является производным аммония. Создавая концентрации на цитоплазматической мембране бактериальной клетки, вступает в связь с фосфолипидами оболочки и вызывает нарушения её проницаемости.  Декаметоксин обладает значительным противомикробным действием относительно стрептококков, стафилококков, палочек дифтерии и псевдомонады, проявляет активность, направленную против дрожжей, плесневых грибов, трихомонад, лямблий.  Устойчивость к препарату у бактерий развивается медленно. Концентрации препарата, достаточные для замедления роста бактерий, примерно равны концентрациям, губительно действующим на бактерии, вирусы и грибковую инфекцию. 

Цель работы — выяснить возможность усиления повреждающего действия декаметоксина сочетанным применением его с димексидом на культуру синегнойной бактерии.

Материал и методы. Взвесь культуры синегнойной бактерии, содержавшую 2Х10¹⁰ клеток в 1 мл изотонического раствора натрия хлорида, обрабатывали водным раствором 0,05% декаметоксина (опыт I), указанным раствором декаметоксина, в который добавляли димексид до его конечной концентрации 0,025% (опыт II), 20% раствором димексида (опыт III). Общий объем смеси — 2 мл. Таким образом, 1 мл взвеси культуры синегнойной бактерии контактировал с 1 мл химиопрепаратов, то есть в 1 мл смеси реагентов и возбудителя содержалось 0,0125% декаметоксина с 10% раствором димексида.

Опытные образцы дважды отмывали от химиопрепаратов в ацетат-вероналовом буфере (рН 7,2), центрифугировали по 5 мин при 4000 об./мин на центрифуге WE-1 и после ресуспендирования наносили на стабилизированные углеродом в установке ВУП-1 формваровые подложки. Препараты целых бактерий контрастировали 2% раствором фосфорновольфрамовой кислоты и уранилацетатом. Время эффективного контакта — 1 ч. Образцы поврежденных бактерий и контрольные после отмывания и осаждения заключали в 2% агар-агар. Дальнейшую проводку агаровых блоков и электронно-микроскопическое исследование проводили по методике П. П. Литовченко [1].

Результаты и обсуждение. Субмикроскопическая структура клеток синегнойных бактерий в контроле и в опыте III не отличалась от типичной.

Целые клетки синегнойных бактерий в опыте по структуре соответствовали контрольным образцам, но число делящихся клеток, сосчитанное из 100 одиночных или множественных их скоплений, по сравнению с контролем было в 5—10 раз меньшим. В поврежденных микроорганизмах выявляли изменение электронной плотности нуклеоплазмы, лизис внутрицитоплазматического вещества клетки, расположенного вблизи клеточной стенки. Структура ее на срезах бактерий не нарушена, равномерно контурирована по окружности; рибополисомальный комплекс сжат, рибосомы уплотнены и равномерно расположены на плоскости среза. Вещество нуклеоплазмы разрежено преимущественно центрипетально, содержит единичные неравномерной величины электронно-плотные включения.

Структура целых клеток синегнойных бактерий в опыте II мало отличалась от контрольных препаратов. Вместе с тем вблизи клеточной стенки бактерий обнаруживали единичные округлой формы электронно-прозрачные гранулы; в нуклеоплазме бактерий выявляли единичные сферические электронно-неконтрастируемые гранулы, содержавшие, по-видимому, включения реагентов, используемых в данном опыте. В целых клетках синегнойных бактерий, кон-трастированных уранилацетатом, выявляли гомогенизацию ядерного вещества; расхождения и дифференциации структур ДНК, характерных для контрольных препаратов, не установлено. В 90% наблюдений выявлены неделящиеся клетки, а обнаруженные единичные бактерии в состоянии деления были с признаками деструкции. Наряду с сохранением целости контурируемых наружной и внутренней мембран между ними в периплазматическом пространстве и веществе нуклеоплазмы обнаруживали единичные овальной формы электронно-прозрачные зоны.

Таким образом, декаметоксин в концентрации 0, 125% проникает в клетку синегнойной бактерии и нарушает процесс ее деления. Данный раствор декаметоксина в сочетании с 10% раствором димексида вызывает более значительные разрушения микроорганизма, подавляет его регенерацию.

Полученные данные позволяют рекомендовать для практического применения 0,125% раствор декаметоксина с 10% раствором димексида у пациентов при местной синегнойной инфекции.

1. Литовченко П. П. Ультраструктурные изменения клеток несинхронной культуры Pseudomonas aeruginosa, возникающие под влиянием хлоргексидина биглюконата // Журн. микробиологии., 1979.— № 8.— С. 83—86.