Биологические науки/ 6. Микробиология

Ремеле В.В., Шаймерденова Д.А., Булашев Б.К.

ТОО «КазНИИ переработки сельскохозяйственной продукции», г. Астана

Микробное разнообразие в зерне основных культур Казахстана

На основе палеонтологических находок считается, что микроорганизмы появились на земле более 3 млрд. лет назад [1]. Однако, открыты они были в конце XVII в. голландским ученым А.Левингуком (1632-1723), а их колоссальная роль в процессах разрушения и созидания, протекающих в природе, установлена спустя сотни лет [2].

Сохранение и изучение микробного разнообразия является общей задачей человечества в мировом масштабе. Штаммы микроорганизмов (как полезных, так и вредных) с различной активностью могут быть использованы в различных областях науки и производства.

Классические работы Л.Пастера (1822-1895г.г.), показавшие, что мик­роорганизмы являются возбудителями процессов брожения, разнообразных болезней и разложения органических и минеральных соединений, имели карди­нальное значение для практики. На этой основе разработаны правильные под­ходы к лечению болезней человека, животных, растений, рационализировано виноделие, пивоварение, бродильные и другие процессы, явившиеся научной осно­вой консервирования пищевых продуктов и кормов.

Микроскопические грибы являются продуцентами ферментов (целлюлаз, хитиназ, пектиназ, ксиланаз и др.), используемых в целлюлозно-бумажной и пищевой промышленности, в производстве моющих средств, в получении спирта, преобразовании отходов, содержащих целлюлозу, глюкозу, получении кормовых добавок [3]. На основе антибиотиков, токсинов, ферментов, продуцируемых микроскопическими грибами, получают препараты для биологического контроля болезней и стимуляции роста растений.

Чрезвычайно насыщена микроорганизмами любая зерновая масса. Толь­ко в 1г ее содержится от нескольких десятков тысяч до миллионов различных микроорганизмов [4], в числе кото­рых, как правило, присутствуют микроскопические грибы и бактерии.

Что касается зерна, то развитие на нем микроскопических грибов приводит к потерям сухого вещества, снижению пищевой ценности, биологических, технологических и семенных достоинств, самосогреванию и полной порче зерна. Кроме того, продуктами метаболизма грибов являются ядовитые, опасные для человека и животных, вещества - микотоксины.

Из пищевых продуктов, кормов, промышленного сырья выделено около 30000 видов различных микроскопических грибов, в том числе, свыше 250 токсигенных, идентифицировано около 300 микотоксинов [5,6].

Правильная организация хранения зерна и продуктов его переработки возможна только с учетом жизнедеятельности микроорганизмов. Поэтому изучение микроскопических грибов, обеспечение микробиологической безвредности зерна является первоочередной задачей специалистов, работающих в области его производства и хранения.

С этой целью в Казахском научно-исследовательском институте переработки сельскохозяйственной продукции (КазНИИПСХП) исследовано 138 проб, в т.ч., 125 – зерна (семян) различных культур (пшеница, кукуруза, подсолнечник, ячмень, овес, рожь, просо, лен, соя, горох, рапс), и 13 – других субстратов (зерноотходы, отруби, кормосмесь, пожнивные остатки, сено, солома, полынь, перегной). Пробы отобраны в различных регионах Казахстана: северном – 75, южном – 18, восточном – 22, западном – 16 (рисунок 1).

Из общего количества исследованных 15 (12,0%) проб характеризуют зерно, хранившееся в неблагоприятных условиях (с повышенной влажностью и засоренностью), в т.ч., в разрезе лет: 2011 –  4 пробы (10,0%), 2012 –  7 проб (11,1%), 2013 – 4 пробы (22,0%). Кроме того, 3 пробы пшеницы №15, 20 и 29 характеризуют зерно урожая 2011 года, перезимовавшее в поле на корню, обмолоченное и обработанное в весеннее - летний период 2012 г.

 

    

а        

б

Рис. 1 – Количество исследованных проб:  а) в разрезе регионов; б) в разрезе субстратов                       

                  По результатам исследований все пробы обсеменены микроорганизмами (грибами и бактериями). Их численность и видовой состав колеблется в широких пределах (рисунок 2).

Микроскопические грибы (микромицеты) представлены в основном различными видами из родов: Aspergillus, Penicillium, Alternaria, Fusarium, Trichoderma, Cladosporium, Mucor, Claviceps, бактерии Erwinia, Pseudomonas. Общая численность грибов лежит в пределах 0,2 – 53,0 тыс/г., бактерий 2,3 – 1690,0 тыс/г и существенно отличается в разрезе регионов и культур, особенно в разрезе одной и той же культуры нормального и пониженного качества (с признаками самосогревания, порчи, с повышенной влажностью и засоренностью).

Так, в пробе пшеницы № 11 (общая засоренность 15,8%, в том числе, содержание поврежденных и испорченных зерен 2,9%), общая численность микроорганизмов составила 598,0 тыс/г, в том числе, грибов 53,0 тыс/г  преобладающие виды из родов Aspergillus (flavus, terreus) и Penicillium. В пробе пшеницы № 13 (засоренность 20,6%, в том числе, поврежденных – 4,6%), общая численность микроорганизмов  1321,5 тыс/г, в том числе, 51,5 тыс/г грибов (преобладающий вид Aspergillus flavus), бактерий – 1270,0 тыс/г.

Максимальное количество микромицетов установлено в пробах зерна пшеницы – до 53,0 тыс/г., бактерий – пробах зерноотходов – 1690 тыс/г.

Таким образом, численность микроорганизмов в зерне пшеницы, хранившемся в неблагоприятных условиях, значительно превышает аналогичный показатель при  хранении в нормальных условиях.

По результатам проведенных исследований, уточнения морфолого-культуральных и физиолого-биохимических свойств существующая коллекция  микроорганизмов пополнена 31-м штаммам в т.ч.: четырьмя –спорообразующих бактерий Bacillus thuringiensis, Bacillus pumilus, Bacillus vallismortis, Brevibacillus agri, девятью штаммами грибов Aspergillus (ochraceus, candidus, fumigatus), Cladosporium herbarum, Penicillium (rubrum, notatum), Claviceps purpurea, Fusarium heterosporum, graminearum) и тремя штаммами азотфиксирующих клубеньковых бактерий Rhizobium meliloti (с корней люцерны), Rhizobium leguminosarum (с корней чечевицы) и Rhizobium leguminosarum (с корней гороха).


 

а) микромицеты

          

б) бактерии

 

Рис.2– Численность микроорганизмов, выделенных из различных субстратов


Колонии штаммов Penicillium rubrum, Brevibacillus agri и Rhizobium leguminosarum представлены на рисунке 3.

 

        

     а) Penicillium  rubrum       б) Brevibacillus agri      в) Rhizobium leguminosarum

Рис.3 –Штаммы для пополнения коллекции     

                                                                                                                                   

Изучены свойства штаммов коллекции: ферментативная активность, токсигенные свойства и способность штаммов к биосинтезу лимонной кислоты по 11, 10 и 8 штаммам соответственно. Штаммы Penicillium viridicatum F-282 и Fusarium oxysporum F-109 обладали наибольшей протеолитической активностью по трем показателям: разжижение желатины, пептонизация, свертывание молока. Шесть штаммов Aspergillus flavus являются токсигенными, при уровне  0,27 – 10,5 мг/кг. Пять штаммов Aspergillus niger проявили высокую активность на продукцию лимонной кислоты.

По 12-ти колекционным штаммам получены инновационные патенты.

Штаммы коллекции могут быть использованы в инновационном развитии АПК при разработке экологически чистых микробных препаратов для защиты зерновых культур от болезней, вредителей и в технологии переработки селькохозяйственной продукции.

Заключение

Исследовано 138 проб зерна, зернопродуктов и других субстратов урожаев 2011- 2013гг., отобранных на предприятиях АПК в различных регионах Казахстана.

Установлена микробиологическая характеристика, выявлены существенные различия в численности и видовом составе микроорганизмов в зависимости от условий хранения. Для свежеубранного зерна характерно присутствие «полевых грибов», главным образом, из рода Alternaria. При хранении зерна в неблагоприятных условиях названные грибы вытесняются «грибами хранения» Aspergillus, Penicillium, Mucor, их численность существенно возрастает.

Изученные штаммы обладают различной способностью к продуцированию ими биологически активных веществ.

Штаммы микроорганизмов могут быть использованы при разработке технологии хранения и переработки зерна.

 

Список литературы

1 Гусев М.В. Микробиология / М.В. Гусев, Л.А. Минеева. – М.:  Издательский центр « Академия», 2005. – 448с.

2 Мишустин  Е.Н.,  Трисвятский Л.А.  Микробиология  зерна  и  муки. М,-1960.

3 Дудикова, Г.Н. Использование генофонда промышленных микроорганизмов в пищевых производствах [Текст]  / Г.Н.  Дудикова // Журн. Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. - Астана, 2000. - № 7. - С. 71-72.

4 Трисвятский Л.А. Хранение зерна. – 5-е изд. перераб. и доп. – М.: Агропомиздат, 1986. – 351 с.

5 Богородицкая В.П. Микроскопические грибы и токсины в пищевых продуктах // Чужеродные вещества в пищевых продуктах: Материалы 1 Всес. конф.- Алма-Ата,1979.-с.10-11.

6 Miller J.D. Fungi and Mycotoxins in Grein: Implications for Stored Product Research. – 1995. – Vol. 31. – N 1. – P. 1-16.