Біологічні науки/9. Биохимия и биофизиеп

Даниленко Е.Е., Дубовик Т.И., Шупова Н.И.

Россихин В.В., Чернявская Е.Г.

Национальный технический университет «Харьковский политехнический институт», Харьков

ОСМОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ ДОНОРСКОЙ КРОВИ И ПРОТЕКТИВНЫЕ СВОЙСТВА ЭКСТРАКТА ПРОСТАТЫ

Одним из актуальных вопросов современной биологии является разработка методов продолжительного хранения клеток. На сегодняшний день разработаны методы низкотемпературного хранения эритроцитов крови человека с сохранением функциональной активности после реконсервации. Доказана значимость исходного состояния клеток на эффективность функционирования на конечном этапе низкотемпературного хранения. Для поддержания структурной и функциональной активности еритроцитов на этапах подготовки к консервации применяют разные биологически активные вещества, обладающий мембраностабилизирующим действием, например, - препараты, выделенные из плаценты и ее водно-солевые экстракты.

Экстракты плаценты влияют на показатель осмотической резистентности и на динамику кислотного гемолиза [1], что и побуждает исследователей применять эти препараты в качестве веществ, стабилизирующих мембранные структуры. Это связано также с тем, что плацента является высокоактивной железой внутренней секреции, иммуногенным орган с ярко выраженными иммунными функциями [2]. Подобными свойствами обладает и предстательная железа [5].

Целью исследования было изучение влияния экстракта предстательной железы (ПЖ) на осмотическую резистентность эритроцитов донорской крови.

В ходе исследований эритроциты получали из донорской крови мужчин (ІІ+). Кровь центрифугировали, отделяя эритроциты от плазмы, а потом трижды отмывали их физиологическим раствором. Водно-солевые экстракты простаты получали с гомогената свежих тканей ПЖ, проводя экстракцию физиологическим раствором. В работе использовали экстракты ПЖ, которые не вызывают собственного гемолиза, концентрация белка в которых составляла ориентировочно 10 мг/мл [1]. Экспозиция эритроцитов с экстрактами ПЖ составляла 2 часа или 18 часов. Для этого эритромассу разводили в соотношении 1:1 физиологическим раствором и совмещали с равным количеством экстракта, через 2 или 18 часов суспензию разводили физиологическим раствором и эритроциты подвергали

центрифугуванню. В осадке измеряли концентрацию белка и нуклеотидов спектрофотометричним методом [3]. Осмотическую резистентность эритроцитів оценивали по уровню гемолиза в гипотонических растворах NaCl [4]. Спектры поглощения записывали на спектрофотометре "Руe Unіcam SР 8000".

Изучение влияния экспозиции эритроцитов в суспензии с экстрактом ПЖ на осмотическую резистентность эритроцитов показало, что срок экспозиции до 18 часов не влияет на приобретенное в первые две часа уменьшение показателей осмотической устройчивости. Оценка содержимого белка и нуклеотидов в осадочной жидкости, полученной после осаждения эритроцитов указывает на то, что в то время, как содержимое нуклеотидов практически не изменяется, концентрация белка достоверно снижается.

Таким образом, проведенные исследования показали, что свойства экстрактов ПЖ зависят от характера распределения по молекулярным массам входящих в их состав белков. Подавляющее большинство экстрактов ПЖ оказывают стабилизирующее действие на мембраны эритроцитов, снижая их осмотическую резистентность и повышая устойчивость к кислотному гемолизу.

ЛИТЕРАТУРА

1. Погожих Д.Н., Розанова Е.Д., Нардид О.А. Вплив екстракту плаценти на осмотичну крихкість еритроцитів донорської крові. //Проблеми кріобіології-.№3.—с.40-43.

2. Ваджі Кхалаф Шаміль Манад. Вплив модифікаторів мембрани і форми еритроцитів на деякі функціональні властивості клітин. Автореф дисс. Канд. біол. н.. X.— 2006.— 20с.

3. Harris D.A. Spectrophotometric assays in: Spectrophotometry & spectrofluonmetry.-Washington: IRL Press, 1987.-P.49-90.

4. Kumar, S. An analogy for explaining erythrocyte fragility: concepts made easy ADV PHYSIOL EDUC. — 2002 26:134-135.

5. Walsh P.C., Retick A.B., Vanghan E.D. Jr.,Wein A.J.(eds). Campbell^,s Uroligy,10th ed. Philadelphia, W.B. Saunders, 2004.